產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3310 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
同禽病毒禽呼腸孤病毒PCR檢測(cè)試劑盒說明書 | Avian Reovirus(ARV,)RTPCR | BKP3310 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:同禽病毒禽呼腸孤病毒PCR檢測(cè)試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
Valnemulin hydrochloride 中文名:鹽酸沃尼妙林 分子式:C31H53ClN2O5S 度:98.0% 小鼠(LDL)ELISA試劑盒
2-Chloromethyl-3-methyl-4-(2,2,2-trifluoroethoxy)pyridine hydrochloride 中文名: 分子式:C9H10Cl2F3NO 度:98.0% 小鼠蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶(PDI)ELISA試劑盒
Rizatriptan benzoate 中文名:苯甲酸利扎曲坦 分子式:C22H25N5O2 度:98.0% 小鼠蛋酸酯酶2B(PP-2B)ELISA試劑盒
Dexmedetomidine hydrochloride 中文名:鹽酸右美托咪定 分子式:C13H17ClN2 度:98.0% 小鼠蛋酸酶(PP)ELISA試劑盒
Sitafloxacin 中文名:西他沙星 分子式:C19H18ClF2N3O3 度:98.5% 小鼠蛋白激酶B(PKB)ELISAKit
2-Cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)-quinolyl-3-methanol 121660-11-5 中文名: 分子式:C19H16FNO humanai-neuophilcytoplasmicaibody,cANCAELISAKit 人抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體(cANCA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
3-(Bromomethyl)-2-cyclopropyl-4-(4'-fluorophenyl)quinoline 154057-56-4 中文名: 分子式:C19H15BrFN HumanCytochromeP450c21/21-hydroxylase,CYP21BELISA試劑盒人細(xì)胞色素P450c21B/21-羥化酶(CYP21B)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
3-[2-Cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)-3-quinolinyl-2-propenal 148901-68-2 中文名: 分子式:C21H16FNO 組織HHV6-B(HUMANHERPESVIRUS6-B)病毒定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒20次
Pitavastatin ethyl ester 167073-19-0 中文名: 分子式:C27H28FNO4 Humanplatelet-derivedgrowthfactor,PDGFELISAKit人血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
2-Cyclopropyl-3-[(diphenylphosphinyl)methyl]-4-(4-fluorophenyl)quinoline 146578-99-6 中文名: 分子式:C31H25FNOP 兔子組胺(HIS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
同禽病毒禽呼腸孤病毒PCR檢測(cè)試劑盒說明書氨基三乙酸(標(biāo)準(zhǔn)品) Nitrilotriacetic acid 質(zhì)量規(guī)格:供HPLC法雜質(zhì)檢查用 ELISAKitCyclin-D3人細(xì)胞周期素D3規(guī)格:48T/96T
1,3-(標(biāo)準(zhǔn)品) 1,3- Propylene Glycol 質(zhì)量規(guī)格:供檢查用 小鼠甘酸脫氫酶(GLDC)ELISA試劑盒 ,英文名: GLDC ELISA Kit
二甘醇(標(biāo)準(zhǔn)品) Diethylene Glycol 質(zhì)量規(guī)格:供檢查用 人堿性胎兒蛋白(BFP)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanbasicfetoprotein,BFPELISAKit 96T/48T
氯噻嗪(標(biāo)準(zhǔn)品) Chlorothiazide 質(zhì)量規(guī)格:供HPLC法系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用 大鼠三甲狀腺原氨酸(T3)試劑盒 Rat i-iodothyronine,T3 ELISA Kit
鹽酸阿米洛利雜質(zhì)(4-氨基-6-氯-1,3-苯基二硫酰胺)(標(biāo)準(zhǔn)品) 4-amino-6-chloro-1,3-benzenedisulfonamide 質(zhì)量規(guī)格:供檢查用 英文名稱RatthrombieceptorELISAKit大鼠凝血酶受體()規(guī)格:96T/48T
鹽酸地芬尼多雜質(zhì)(烯化合物)(標(biāo)準(zhǔn)品) Alkene 質(zhì)量規(guī)格:供檢查用 活體組織線粒體內(nèi)膜功能/膜電位測(cè)定試劑盒10
N-甲基帕羅西?。?biāo)準(zhǔn)品) N-Methylparoxetine 質(zhì)量規(guī)格:供檢查用 ELISAKitMEPE人細(xì)胞外基質(zhì)0酸糖蛋白規(guī)格:48T/96T
七氟烷(標(biāo)準(zhǔn)品) Sevoflurane 質(zhì)量規(guī)格:供GC法檢查用 小鼠甘露糖受體C2(MRC2)ELISA試劑盒 ,英文名: MRC2 ELISA Kit
二甲氧芐啶(標(biāo)準(zhǔn)品) Diaveridine 質(zhì)量規(guī)格:檢查 人副甲狀旁腺激素相關(guān)肽(PTHrp)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanparathyroidhormonerelatedpeptide,PTHrpELISAKit 96T/48T
美雄諾龍(標(biāo)準(zhǔn)品) Mestanolone 質(zhì)量規(guī)格:供HPLC法系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用 大鼠山梨醇脫氫酶(SDH)試劑盒 Rat sorbitol dehydrogenase,SDH ELISA Kit
N-十八烷酰二氫-D-赤-鞘氨醇 N-Stearoyldihydro-D-erythro-Sphingosine 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 載玻片細(xì)胞P38蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20
Fmoc-3-苯甲酰-赤-鞘氨醇 Fmoc-3-benzoyl-erythro-sphingosine 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 載玻片細(xì)胞PAR-1蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20
D-赤-鞘氨醇(硫酸) D-erythro-Sphingosine (sulfate) 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 載玻片細(xì)胞PAR-1蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20
D-赤-鞘氨醇-1-鹽 D-erythro-Sphingosine-1-phosphate 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 載玻片細(xì)胞PAR-2蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20
N-十八烷酰-D-鞘氨醇 N-Stearoyl-D-Sphingosine 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 載玻片細(xì)胞PAR-3蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20
二氫-D-赤-鞘氨醇 Dihydro-D-erythro-Sphingosine 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 載玻片細(xì)胞PAR-3蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20
N-油酰-D-赤-鞘氨醇 D-erythro-Sphingosine, N-Oleoyl- 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 載玻片細(xì)胞PARP蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20
D-赤-鞘氨醇C-20 D-erythro-Sphingosine C-20 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 載玻片細(xì)胞PDGF-A蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20
L-蘇型-鞘氨醇C-18 L-threo-Sphingosine C-18 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 載玻片細(xì)胞PDGF-A蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20
C16 神經(jīng)酰胺(N-十六烷酰鞘氨醇,D-赤) C16 Ceramide (N-Palmitoylsphingosine, D-erythro) 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 載玻片細(xì)胞PDGF-B蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20