產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3329 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
巴貝斯屬蟲通用PCR檢測(cè)試劑盒直銷 | Babesia spp.PCR | BKP3329 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:巴貝斯屬蟲通用PCR檢測(cè)試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
α-Spinasterol 481-18-5 中文名:α-菠甾醇 分子式:C29H48O 度:97.0% 關(guān)鍵詞: ; 栝樓; 豆甾烷; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠抗線粒體抗體(mouse AMA) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
α-Lipoic acid 1077-28-7 中文名:α-硫辛酸 分子式:C8H14O2S2 度:98.5% 關(guān)鍵詞: 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠抗核抗體(mouse ANA) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
α-Lapachone 4707-33-9 中文名: 分子式:C15H14O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 萘醌; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠緊張素II(mouse ANG II) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
α-D-Glucose 492-62-6 中文名:α-D-葡萄糖 分子式:C6H12O6 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠脂肪酸合成酶 英文名稱: Mouse Fatty Acid Syhase 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: FAS
中文名:佐匹克隆 分子式:C17H17ClN6O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠促卵泡生成激素 英文名稱: Mouse Follicle Stimulating Hormone 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: FSH
2-Methyl-4-(2-methylbenzoylamino)benzoic acid 317374-08-6 中文名: 分子式:C16H15NO3 CLIAKitforBeta2-GP1IgA/G/MELISAKit大鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M規(guī)格:48T/96T
7-Chloro-1,2,3,4-tetrahydrobenzo[b]azepin-5-one 160129-45-3 中文名: 分子式:C10H10ClNO 細(xì)菌營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板50個(gè)
Nicorandil 65141-46-0 中文名:尼可地爾 分子式:C8H9N3O4 RabbitEpidermalgrowthfactor,EGFELISAKit兔子表皮生長(zhǎng)因子(EGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Dronedarone hydrochloride 141625-93-6 中文名:鹽酸決奈達(dá)隆 分子式:C31H45ClN2O5S 豚鼠白介素10(IL10)ELISA試劑盒 ,英文名: IL10 ELISA Kit
Bisoprolol fumarate 104344-23-2 中文名:富馬酸比索洛爾 分子式:C22H35NO8 Human mannose receptor (MR) ELISA Kit 人甘露糖受體(MR)ELISA試劑盒
巴貝斯屬蟲通用PCR檢測(cè)試劑盒直銷5-氨基水楊酸,美沙拉秦 5-Aminosalicylic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人β2糖蛋白(β2-GP)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanbeta2glycoprotein,β2-GPELISAKit 96T/48T
鹽酸喹那普利(標(biāo)準(zhǔn)品) Quinapril hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測(cè)定 大鼠蛋白(nephrin)試劑盒 Rat Nephrin ELISA Kit
愛普列特(標(biāo)準(zhǔn)品) Epristeride 質(zhì)量規(guī)格:UV法含量測(cè)定 英文名稱RatPSAELISAKit大鼠特異性抗原(PSA)規(guī)格:96T/48T
羥苯磺酸鈣(標(biāo)準(zhǔn)品) Calcium dobesilate 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 活體細(xì)胞半胱氨酸蛋白酶-2(CASPASE-2)活性原位熒光染色檢測(cè)試劑盒20
異鼠李素-3-O-葡萄糖-7-O-鼠李糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Isorhamnetin 3-glucoside-7-rhamnoside 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,標(biāo)準(zhǔn)品 ELISAKitABCA1人腺苷三0酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1規(guī)格:48T/96T
西吡氯銨(標(biāo)準(zhǔn)品) Cetylpyridinium chloride 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 小鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長(zhǎng)因子(SCF/MGF)ELISA試劑盒 ,英文名: SCF/MGF ELISA Kit
硫酸羥氯喹(標(biāo)準(zhǔn)品) Hydroxychloroquine sulfate 質(zhì)量規(guī)格:UV法溶出度檢查 大鼠葉酸(FA)ELISA檢測(cè)試劑盒RatFolicacid,FAELISAKit 96T/48T
車葉草苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Asperuloside 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 人白介素35(IL-35)試劑盒 Human Ierleukin 35,IL-35 ELISA Kit
Galeterone (TOK001) TOK-001 質(zhì)量規(guī)格:>98%,CYP17抑制劑 Wheatgermagglinin,WGAELISAKit麥胚凝集素/凝集蛋白(WGA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
山柰酚-3-槐二糖-7-鼠李糖苷 Kaempferol 3-sophoroside-7-rhamnoside 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥85%,標(biāo)準(zhǔn)品 PAR-2(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克
Prosapogenin CP6 Prosapogenin CP6 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 兔細(xì)胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)ELISA檢測(cè)試劑盒Rabbitlymphocytefunctionassociatedaigen3,LFA-3ELISAKit 96T/48T
Crovatin Crovatin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 兔內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISA檢測(cè)試劑盒RabbitEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISAKit 96T/48T
Croverin Croverin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 兔尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA檢測(cè)試劑盒Rabbiturokinaseplasminogenactivator,uPAELISAkit 96T/48T
levatin levatin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 兔尿激酶型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA檢測(cè)試劑盒RabbitUrokinase-typePlasminogenActivatorReceptor,PLAUR/uPARELISAkit 96T/48T
蒼耳亭(標(biāo)準(zhǔn)品) Xanthatin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 兔凝血酶原片段F1+2(F1+2)ELISA檢測(cè)試劑盒Rabbitprothrombinfragme1+2,F1+2ELISAKit 96T/48T
辛辣內(nèi)酯A(標(biāo)準(zhǔn)品) Pungiolide A 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 兔去甲(NA)ELISA檢測(cè)試劑盒RabbitNoradrenaline,NAELISAKit 96T/48T
麻楓樹酚酮B(標(biāo)準(zhǔn)品) Jatropholone B 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 兔熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA檢測(cè)試劑盒RabbitHeatShockProtein20,HSP-20ELISAKit 96T/48T
3β-乙酰氧基-7,25-甘遂二烯-24(R)-醇(標(biāo)準(zhǔn)品) 3β-acetoxy-eupha- 7,25-dien-24(R)-ol 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 兔熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA檢測(cè)試劑盒RabbitHeatShockProtein40,HSP-40ELISAKit 96T/48T
11-羥基柳杉酚(標(biāo)準(zhǔn)品) 11-hydroxy-sugiol 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 兔熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA檢測(cè)試劑盒RabbitHeatShockProtein70,HSP-70ELISAKit 96T/48T
L-乳酸(標(biāo)準(zhǔn)品) L-(+)-Lactic acid 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 兔熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA檢測(cè)試劑盒RabbitHeatShockProtein90,HSP-90ELISAKit 96T/48T
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。