產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3335 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
幼蟲芽胞桿菌PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng) | Bacillus larvaePCR | BKP3335 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:幼蟲芽胞桿菌PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
β-Sitosterol 83-46-5 中文名:β-谷甾醇 分子式:C29H50O Humanepidermalbasememembranezone,EBMZELISAKit 人抗表皮細(xì)胞基底膜抗體(EBMZ)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Thevetin B 27127-79-3 中文名: 分子式:C42H66O18 HumanEamoebahistolyticaAigenELISA試劑盒人內(nèi)阿米巴抗原ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
6,7-Dihydroneridienone A 72959-46-7 中文名: 分子式:C21H28O3 組織PKCη激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次
Dregeoside A11 89020-11-1 中文名: 分子式:C55H88O22 HumanParathyroidHormoneRelatedProtein,PTHrPELISAKit人甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Stigmasta-4,22-diene-3β,6β-diol 167958-89-6 中文名: 分子式:C29H48O2 兔子基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
4-[(4-Methylpiperazin-1-yl) methyl]benzoic acid dihydrochloride 106261-49-8 中文名:甲磺酸伊馬替尼 分子式:C13H20Cl2N2O2 CLIAKitforATM(HumanAtaxiatelangiectasiamated)ELISAKit人擴(kuò)張性突變基因規(guī)格:48T/96T
4-(4-Aminophenyl)morpholin-3-one 438056-69-0 中文名: 分子式:C10H12N2O2 線粒體復(fù)合物II蛋白共沉淀分析試劑盒5次
N-(2,3-Epoxypropyl)phthalimide 161596-47-0 中文名: 分子式:C11H9NO3 RabbitangiotensionⅡ,ANG-ⅡELISAKit兔緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
5-Chlorothiophene-2-carboxylic acid 24065-33-6 中文名: 分子式:C5H3ClO2S 豚鼠白介素13(IL-13)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-13 ELISA Kit
Rivaroxaban 366789-02-8 中文名:利伐沙班 分子式:C19H18ClN3O5S Human aryl hydrocarbon receptor (AhR) ELISA Kit 人芳香烴受體(AhR)ELISA試劑盒
幼蟲芽胞桿菌PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)貝美格(標(biāo)準(zhǔn)品) 3-ETHYL-3-METHYLGLUTARIMIDE 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 大鼠γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratierferon-inducibleprotein16,IFI16/p16ELISAKit 96T/48T
地喹氯銨(標(biāo)準(zhǔn)品) Dequalinium chloride 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 人白介素6受體(IL-6R)試劑盒 Human IL-6R ELISA Kit
硫酸氫小檗堿(標(biāo)準(zhǔn)品) BERBERINE ACID SULFATE 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 Soybeanagglinin,SBAELISAKit大豆凝集素(SBA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
度米芬(標(biāo)準(zhǔn)品) Domiphen bromide 質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測(cè)定 P53(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微升
醋酸優(yōu)力司特;醋酸烏利司他 Ulipristal acetate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Porcinemelanomametastasissurfaceadhesionmolecule,MMSAMELISA試劑盒豬轉(zhuǎn)移表面黏附分子(MMSAM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鹽酸硫必利(標(biāo)準(zhǔn)品) Tiapride hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:UV法含量測(cè)定 小鼠高敏甲狀腺素(u-T4)ELISA試劑盒 ,英文名: u-T4 ELISA Kit
甲基橙皮甙 Methyl hesperidin 質(zhì)量規(guī)格:≥95% 大鼠8異素(8-iso-PG)ELISA檢測(cè)試劑盒Rat8-isoprostaglandin,8-iso-PGELISAKit 96T/48T
嗎多明 Molsidomine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人白介素6(IL-6)試劑盒 Human IL-6 ELISA KIT
嗎多明(標(biāo)準(zhǔn)品) Molsidomine 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 swinemajorhistocompatibilitycomplexⅠ,MHCⅠ/SLAⅠELISAKit豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/SLAⅠ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
O,P-滴滴滴(標(biāo)準(zhǔn)品) Mitotane;O,P'-DDD 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 PA317包裝細(xì)胞克隆選擇培養(yǎng)基500毫升
SB 203580 SB203580 質(zhì)量規(guī)格:>98%,p38 MAPK抑制劑 人糖基化依賴的細(xì)胞黏附分子(GlyCAM-1)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanglycosylation-dependecelladhesionmolecule-1,GlyCAM-1ELISAKit 96T/48T
6-氨基-3-甲基嘌呤(3MA);細(xì)胞自噬抑制劑 3-MA;6-Amino-3-methylpurine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥97%,autophagy inhibitor 人糖鏈抗原19-9(CA19-9)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanCarbohydrateaigen19-9,CA19-9ELISAKit 96T/48T
黃嘌呤;2,6-二羥基嘌呤; 2,6-Dihydroxypurine;Xanthine 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 人糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白(CDT)ELISA檢測(cè)試劑盒Humancarbohydrate-deficieansferrin,CDTELISAKit 96T/48T
Necrostatin1 Necrostatin-1 質(zhì)量規(guī)格:>98%,RIP1抑制劑 人套膜蛋白(iNV)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanInvolucrin,iNVELISAKit 96T/48T
大豆分離蛋白 Soy protein isolate 質(zhì)量規(guī)格:蛋白含量≥90%,BR 人特異性巨噬細(xì)胞武裝因子(SMAF)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanSpecifieMacrophageArmingPaetot,SMAFELISAKit 96T/48T
L-甲狀腺素鈉鹽五水化合物 L-Thyroxine Salt Pentahydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanAspaateaminoansferase,ASTELISAKit 96T/48T
LY2940680 LY2940680 質(zhì)量規(guī)格:>98% 人天青殺素(AZU)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanazurocidin,AZUELISAKit 96T/48T
LY2886721 LY-2886721 質(zhì)量規(guī)格:>98,BACE1 inhibitor 人調(diào)寧蛋白-1(CNN1)試劑盒 Human Calponin-1,CNN1 ELISA Kit
利尼伐尼;ABT869 Linifanib (ABT-869) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,VEGFR/PDGFR抑制劑 人通用轉(zhuǎn)錄復(fù)合體(GTC)ELISA檢測(cè)試劑盒Humangeneralanscriptioncomplex,GTCELISAKit 96T/48T
頭孢匹林鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) Cefapirin 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 人銅藍(lán)蛋白(CP/CER)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanCeruloplasmin,CP/CERELISAKit 96T/48T
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。