產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3352 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
箭毒蛙壺菌PCR檢測試劑盒價(jià)格 | Batrachochytrium dendrobatidisPCR | BKP3352 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:箭毒蛙壺菌PCR檢測試劑盒價(jià)格使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
大鼠核因子κB抑制蛋白α(IKBα)ELISAKit Hypocrellin A 中文名:竹紅菌甲素 分子式:C30H26O10
大鼠過敏/補(bǔ)體片斷4a(C4a)ELISAKit Tokinolide B 中文名: 分子式:C24H28O4
大鼠過敏/補(bǔ)體片斷4a(C4a)ELISAKit Tokinolide B 112966-16-2 中文名: 分子式:C24H28O4 度:96.0% 關(guān)鍵詞:
大鼠固(ALD)ELISAKit Tolazoline hydrochloride 中文名:鹽酸妥拉唑林 分子式:C10H13ClN2
大鼠二氧化酶elisa試劑盒 大鼠二氧化酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 大鼠二氧化酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:大鼠二氧化酶試劑盒、大鼠二氧化酶elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 Lonidamine 中文名:氯尼達(dá)明 分子式:C15H10Cl2N2O2
Tegafur 17902-23-7 中文名:替加氟 分子式:C8H9FN2O3 人真核翻譯起始因子3aelisa試劑盒 人真核翻譯起始因子3a試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人真核翻譯起始因子3a試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人真核翻譯起始因子3a試劑盒、人真核翻譯起始因子3a elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Sorafenib tosylate 475207-59-1 中文名:索拉非尼 分子式:C28H24ClF3N4O6S 人長效甲狀腺刺激素elisa試劑盒 人長效甲狀腺刺激素試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人長效甲狀腺刺激素試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人長效甲狀腺刺激素試劑盒、人長效甲狀腺刺激素elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Sorafenib 284461-73-0 中文名:索拉非尼 分子式:C21H16ClF3N4O3 人粘膜相關(guān)上皮趨化因子elisa試劑盒 人粘膜相關(guān)上皮趨化因子試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人粘膜相關(guān)上皮趨化因子試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人粘膜相關(guān)上皮趨化因子試劑盒、人粘膜相關(guān)上皮趨化因子elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Loxoprofen 68767-14-6 中文名:洛索洛芬 分子式:C15H18O3 人早老素2elisa試劑盒 人早老素2試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人早老素2試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人早老素2試劑盒、人早老素2 elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Retigabine 150812-12-7 中文名:瑞替加濱 分子式:C16H18FN3O2 人著絲粒蛋白Belisa試劑盒 人著絲粒蛋白B試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人著絲粒蛋白B試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人著絲粒蛋白B試劑盒、人著絲粒蛋白B elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
箭毒蛙壺菌PCR檢測試劑盒價(jià)格土大黃苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Rhapontin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 ELISAKitcTn-Ⅰ人心肌肌鈣蛋白Ⅰ規(guī)格:48T/96T
鹽酸苯海索(標(biāo)準(zhǔn)品) Benzhexol hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:含量測定 小鼠谷酸脫羧酶自身抗體IgM(GAD-Ab-IgM)ELISA試劑盒 ,英文名: GAD-Ab-IgM ELISA Kit
葉酸(標(biāo)準(zhǔn)品) Folic acid 質(zhì)量規(guī)格:含量測定 大鼠抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體(AECA)ELISA檢測試劑盒Ratai-endothelialcellaibody,AECAELISAKit 96T/48T
葡萄糖酸鈣(標(biāo)準(zhǔn)品) Calcium gluconate 質(zhì)量規(guī)格:檢查 人白細(xì)胞活化黏附因子(ALCAM)試劑盒 Human ALCAM ELISA Kit
雙羥萘酸噻嘧啶(標(biāo)準(zhǔn)品) Pyrantel pamoate 質(zhì)量規(guī)格:含量測定 Ricinuscommunisagglinin,RCAELISAKit蓖麻凝集素(RCA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
雙羥萘酸(標(biāo)準(zhǔn)品) Pamoic acid 質(zhì)量規(guī)格:含量測定 P21基因表達(dá)北方雜交分析試劑盒5
酚酞(標(biāo)準(zhǔn)品) Phenolphthalein 質(zhì)量規(guī)格:含量測定 Porcineierleukin8,IL-8ELISA試劑盒豬白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
香草醛(熔點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)品) Vanillin 質(zhì)量規(guī)格:熔點(diǎn)測定 小鼠谷酸脫羧酶自身抗體IgG(GAD-Ab-IgG)ELISA試劑盒 ,英文名: GAD-Ab-IgG ELISA Kit
環(huán)吡酮;環(huán)匹羅司 Ciclopirox 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 大鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)ELISA檢測試劑盒RatannexinⅤ,ANX-ⅤELISAKit 96T/48T
環(huán)吡酮;環(huán)匹羅司(標(biāo)準(zhǔn)品) Ciclopirox 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 人白細(xì)胞調(diào)節(jié)素(LR)試劑盒 Human leukoregulin,LR ELISA Kit
ε-聚賴氨酸 Epsilon Polylysine 質(zhì)量規(guī)格:溶解性數(shù)據(jù)為19.8,分子量小于5000 大鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)試劑盒 Rat Gelsolin ELISA Kit
普羅雌烯 Promestriene 質(zhì)量規(guī)格:≥99.0%,BR 大鼠凝血酶抗凝血酶Ⅲ復(fù)合物(TAT-III)試劑盒 Rat thrombin-aithrombin III complex,TAT-III ELISA Kit
波生坦(水合物) Bosentan hydrate 質(zhì)量規(guī)格:≥98.5%(HPLC),BR,一水合物 大鼠凝血酶抗凝血酶復(fù)合物(TAT)ELISA檢測試劑盒Ratthrombin-aithrombincomplex,TATELISAKit 96T/48T
波生坦水合(標(biāo)準(zhǔn)品) Bosentan hydrate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠凝血酶抗凝血酶復(fù)合物(TAT)試劑盒 Rat thrombin-aithrombin complex,TAT ELISA Kit
福沙吡坦二甲葡胺(MK-0517) Fosaprepitant dimeglumine 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%;P/神經(jīng)激肽受體拮抗劑 大鼠凝血酶受體()ELISA檢測試劑盒Ratthrombieceptor,ELISAKit 96T/48T
普拉格雷 Prasugrel 質(zhì)量規(guī)格:≥99.0%,BR 大鼠凝血酶受體()試劑盒 Rat thrombin receptor, ELISA Kit
鹽酸可樂定 Clonidine hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%,BR 大鼠凝血酶原片段F1+2(F1+2)試劑盒 Rat prothrombin fragme 1+2,F1+2 ELISA Kit
鹽酸可樂定(標(biāo)準(zhǔn)品) Clonidine hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA檢測試劑盒RatcoagulationfactorⅡ,FⅡELISAKit 96T/48T
2-甲氧基雌二醇(進(jìn)分) 2-Methoxyestradiol 質(zhì)量規(guī)格:進(jìn)分,SigmaM6383 大鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)試劑盒 Rat coagulation factor Ⅱ,FⅡ ELISA Kit
2-甲氧基雌二醇 2-Methoxyestradiol 質(zhì)量規(guī)格:≥98.0%,國產(chǎn) 大鼠凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原(FⅧ-Ag)ELISA檢測試劑盒RatcoagulationfactorⅧrelatedaigen,FⅧ-AgELISAKit 96T/48T
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。