產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3367 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
藍(lán)舌病病毒通用PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng) | Bluetongue Virus(BTV)RTPCR | BKP3367 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:藍(lán)舌病病毒通用PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
肝生素/肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子 英文名稱(chēng): hepatocyte growth factor 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): HGF Przewaquinone A 76843-23-7 中文名:紫丹參甲素 分子式:C19H18O4
肝/肌糖元檢測(cè) Lipofuscin (including colorimeic detection) Racecadotril 81110-73-8 中文名:消旋卡多曲 分子式:C21H23NO4S 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
肝/肌糖元測(cè)試盒 Liver / muscle glycogen test kit 4,6-Dichloro-2-(propylthio)pyrimidin-5-amine 145783-15-9 中文名: 分子式:C7H9Cl2N3S
甘油三酯(TG酶法)測(cè)試盒 Serum high-density lipoprotein (HDL) test kit Oxytetracycline hydrochloride 2058-46-0 中文名:鹽酸土霉素 分子式:C22H25ClN2O9 度:98.0%
甘油三酯(TG)含量測(cè)試盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/48樣 Atorvastatin calcium 中文名:阿托伐他汀鈣 分子式:C33H35FN2O5 度:98.0%
2-[(Acetylthio)methyl]-phenylpropionic acid 91702-98-6 中文名: 分子式:C12H14O3S 人趨化因子(fractalkine/CX3CL1)ELISAKit
Cinnamyl 3-aminobut-2-enoate 113898-97-8 中文名: 分子式:C13H15NO2 人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子9(bFGF-9)ELISAKit
2-Deoxy-2,2-difluoro-D-erythro-pentafuranous-1-ulose-3,5-dibenzoate 122111-01-7 中文名: 分子式:C19H14F2O6 人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子6(bFGF-6)ELISAKit
D-Mannitol diacetonide 1707-77-3 中文名: 分子式:C12H22O6 人中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白elisa試劑盒 人中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 人中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白試劑盒、人中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Pemetrexed 137281-23-3 中文名:培美曲塞二鈉 分子式:C20H21N5O6 人中性粒細(xì)胞堿性0酸酶elisa試劑盒 人中性粒細(xì)胞堿性0酸酶試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 人中性粒細(xì)胞堿性0酸酶試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人中性粒細(xì)胞堿性0酸酶試劑盒、人中性粒細(xì)胞堿性0酸酶elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
藍(lán)舌病病毒通用PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)異鼠李素(標(biāo)準(zhǔn)品) Isorhamnetin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 ELISAKitTSLP人胸腺基質(zhì)細(xì)胞生成素規(guī)格:48T/96T
異鼠李素-3-O-葡萄糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Isorhamnetin-3-O-β-D-Glucoside 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠骨骼肌快肌肌鈣蛋白I(TNNI2)ELISA試劑盒 ,英文名: TNNI2 ELISA Kit
異鼠李素-3-O-新橙皮苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Isorhamnetin-3-O-neohespeidoside 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 人前體蛋白(TpP)ELISA檢測(cè)試劑盒Humahrombusprecursorprotein,TpPELISAKit 96T/48T
異土木香內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Isoalantolactone 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠酸性0酸酶(ACP)試劑盒 Rat Acid Phosphatase,ACP ELISA Kit
異烏藥內(nèi)酯/異烏藥醚內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Isolinderalactone 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱(chēng)RatglialfibrillaryacidicproteinELISAKit大鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISAKit規(guī)格:96T/48T
VRT752271 VRT-752271.HCl 質(zhì)量規(guī)格:>98%,鹽酸鹽形式,蛋白激酶抑制劑 環(huán)境傷寒沙門(mén)氏菌B(SalmonellaParatyphiB)定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒20
奧巴克拉甲磺酸鹽 Obatoclax Mesylate;GX15-070 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,Bcl-2拮抗劑 ELISAKitTARC/CCL17人胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子規(guī)格:48T/96T
淫羊藿素(標(biāo)準(zhǔn)品) Icaritin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠骨鈣素/骨谷酸蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒 ,英文名: OT/BGP ELISA Kit
銀杏內(nèi)酯A(標(biāo)準(zhǔn)品) Ginkgolide A 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)ELISA檢測(cè)試劑盒RatParathyroidHormone-LikeRelatedProtein,PTHrPELISAKit 96T/48T
銀杏內(nèi)酯B(標(biāo)準(zhǔn)品) Ginkgolide B 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 人包蟲(chóng)抗體IgG 試劑盒 Human echinococcus aibody IgG ELISA Kit
阿替洛爾-d7 Atenolol-d7 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 英文名稱(chēng)HumanFree-T4ELISAKit人游離甲狀腺素(Free-T4)規(guī)格:96T/48T
阿托伐他汀 Atorvastatin 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 英文名稱(chēng)HumanFXELISAKit人凝血因子X(FX)規(guī)格:96T/48T
4-羥基阿托伐他汀內(nèi)酯 4-Hydroxy Atorvastatin Lactone 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 英文名稱(chēng)humanf-β-HCGELISAKIT人游離β絨毛膜激素(f-β-HCG)規(guī)格:96T/48T
2-羥基阿托伐他汀內(nèi)酯 2-Hydroxy Atorvastatin Lactone 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 英文名稱(chēng)humanGADELISAKIT人谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD)規(guī)格:96T/48T
2-羥基阿托伐他汀內(nèi)酯-d5 2-Hydroxy Atorvastatin Lactone-d5 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 英文名稱(chēng)HumanGamma-aminobyricacidELISAKit人γ氨基(GABA)規(guī)格:96T/48T
2-羥基阿托伐他汀單鈉鹽二水合物 2-Hydroxy Atorvastatin Dihydrate Mono Salt 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 英文名稱(chēng)HumanGATA4ELISAKit人心肌轉(zhuǎn)錄因子(GATA4)規(guī)格:96T/48T
阿托伐他汀內(nèi)酯 Atorvastatin Lactone 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 英文名稱(chēng)HumanG-CSFELISAKit人粒細(xì)胞克隆刺激因子(G-CSF)規(guī)格:96T/48T
阿托伐他汀 ?;?/span>-β-D-葡萄糖醛酸苷 70%, 含 30% 內(nèi)酯 Atorvastatin Acyl-β-D-glucuronide 70%, contains up to 30% lactone 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 英文名稱(chēng)HumanGehrelinElisakit人腦腸肽(Gehrelin)規(guī)格:96T/48T
脫氟阿托伐他汀鈉 Defluoro Atorvastatin Salt 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 英文名稱(chēng)HumanGelsolinELISAKit人凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
阿托伐他汀內(nèi)酯-d5 Atorvastatin-d5 Lactone 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 英文名稱(chēng)HumanghrelinELISAKit人生長(zhǎng)激素釋放多肽(ghrelin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。