產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3389 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
1牛腺病毒通用PCR檢測(cè)試劑盒直銷 | Bovine Adenovirus(BAV1) PCR | BKP3389 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:1牛腺病毒通用PCR檢測(cè)試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
金黃地鼠可溶性間黏附分子1 英文名稱: Golden hamster soluble Vascular Cellular Adhesion Molecule 1 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: sVCAM-1 Alogliptin benzoate 中文名:阿格列汀苯甲酸鹽 分子式:C25H27N5O4 度:98.0%
金黃地鼠壞死因子α 英文名稱: Golden hamster Tumor Necrosis Factor α 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: TNFα Alogliptin benzoate 中文名:阿格列汀苯甲酸鹽 分子式:C25H27N5O4
結(jié)核分枝桿菌抗體 英文名稱: Mycobacterium Tuberculosis Aibody 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: TB p-Nitrohydrocinnamic acid 16642-79-8 中文名: 分子式:C9H9NO4 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
結(jié)締組織生長(zhǎng)因子 (CTGF) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Araliadiol 1354638-93-9 中文名: 分子式:C15H20O2
結(jié)蛋白 (Desmin) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Nicorandil 65141-46-0 中文名:尼可地爾 分子式:C8H9N3O4 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
2-Acetonaphthone 1993/8/3 中文名:2'-萘乙酮 分子式:C12H10O 人清道夫受體B類成員1(SCARB1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 Human SCARB1 (Scavenger receptor class B member 1) ELISA kit
1'-Acetonaphthone 941-98-0 中文名:1'-萘乙酮 分子式:C12H10O 人總鐵結(jié)合力(TIBC)ELISA試劑盒
Exemestane 107868-30-4 中文名:依西美坦 分子式:C20H24O2 人總特異抗原(tPSA)ELISA試劑盒
Hemapolin 4267-80-5 中文名:甲基環(huán)硫雄醇中間體 E 分子式:C20H32OS 人總抗氧化能力(T-AOC)ELISA試劑盒
Formestane 566-48-3 中文名:福美司坦 分子式:C19H26O3 人總蛋白(TP)ELISA試劑盒
1牛腺病毒通用PCR檢測(cè)試劑盒直銷檸檬苦素,黃柏內(nèi)酯(橙皮提取) Limonin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,橙皮提取 大鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA檢測(cè)試劑盒Rat15-lipoxygenase,15-LO/LOXELISAKit 96T/48T
硬脂酸(50%) Stearic acid 質(zhì)量規(guī)格:含量50%,藥用級(jí) 人表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)試劑盒 Human EGFR ELISA Kit
硬脂酸(98%) Stearic acid 質(zhì)量規(guī)格:含量98%,藥用級(jí) RatUrokinase-typePlasminogenActivatorReceptor,PLAUR/uPARELISAKit大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
牛蒡苷元(標(biāo)準(zhǔn)品) Arctigenin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 NFKAPPABP65蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒25
牛蒡子苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Arctiin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Porcinehepatocytegrowthfactor,HGFELISA試劑盒豬肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
日當(dāng)藥黃素(標(biāo)準(zhǔn)品) Swertiajaponin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠果糖胺(FRA)ELISA試劑盒 ,英文名: FRA ELISA Kit
牛磺膽酸鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) Taurocholic acid Salt 質(zhì)量規(guī)格:TLC≥97%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠抗中性粒細(xì)胞核周抗體(pANCA)ELISA檢測(cè)試劑盒RatPerinuclearai-neuophilcytoplasmicaibody,pANCAELISAKit 96T/48T
牛磺膽酸鈉 Taurocholic acid Salt 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR 人表皮生長(zhǎng)因子(EGF)試劑盒 Human Epidermal growth factor,EGF ELISA Kit
諾米林(標(biāo)準(zhǔn)品) Nomilin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 RatVascularEndothelialcellGrowthFactorB,VEGF-BELISAKit大鼠內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子B(VEGF-B)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
歐當(dāng)歸內(nèi)酯A(標(biāo)準(zhǔn)品) Levistilide A 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 NFKAPPABP65蛋白共沉淀分析試劑盒5
巴氯芬(標(biāo)準(zhǔn)品) Baclofen 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Ratmonocytechemotacticprotein3,MCP-3ELISA試劑盒大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
巴洛沙星(標(biāo)準(zhǔn)品) Balofloxacin Dihydrate 質(zhì)量規(guī)格:> 98%,水合物標(biāo)準(zhǔn)品 Ratmonocytechemotacticprotein4,MCP-4ELISAKit大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
巴洛沙星 Balofloxacin Dihydrate 質(zhì)量規(guī)格:度> 98.5%,BR,二水合物 Ratmonocytechemotacticprotein4,MCP-4ELISA試劑盒大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鹽酸苯達(dá)莫司汀 Bendamustine HCl 質(zhì)量規(guī)格:度> 98% RatMothersagainstdecapeaplegichomolog1,Smad1ELISAKit大鼠Smad1ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鹽酸苯達(dá)莫司?。?biāo)準(zhǔn)品) Bendamustine HCl 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 RatMothersagainstdecapeaplegichomolog1,Smad1ELISA試劑盒大鼠Smad1ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
倍他米松 Betamethasone 質(zhì)量規(guī)格:>98% RatMothersagainstdecapeaplegichomolog7,Smad7ELISAKit大鼠Smad7ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
倍他米松(標(biāo)準(zhǔn)品) Betamethasone 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98% ,標(biāo)準(zhǔn)品 RatMothersagainstdecapeaplegichomolog7,Smad7ELISA試劑盒大鼠Smad7ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
比阿培南 Biapenem 質(zhì)量規(guī)格:度>97% RatMotilin,MTLELISAKit大鼠胃動(dòng)素(MTL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
比阿培南(標(biāo)準(zhǔn)品) Biapenem 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 RatMotilin,MTLELISA試劑盒大鼠胃動(dòng)素(MTL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
膽紅素(標(biāo)準(zhǔn)品) Bilibubin 質(zhì)量規(guī)格:UV≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 RatMullerianInhibitingSubstance/Ai-Mullerianhormone,MIS/AMHELISAKit大鼠繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素(MIS/AMH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。