產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3405 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
牛病毒PCR檢測(cè)試劑盒直銷 | Bovine Papillomavirus(BoPV)PCR | BKP3405 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:牛病毒PCR檢測(cè)試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
內(nèi)皮生長(zhǎng)因子 165(VEGF165) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Otophylloside B 4'''-O-β-D-cymaropyranoside 中文名: 分子式:C56H90O19
內(nèi)皮生長(zhǎng)因子 (VEGF) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Androstanolone 17-benzoate 中文名:雄諾龍苯甲酸酯 分子式:C26H34O3 度:98.0%
緊張素轉(zhuǎn)化酶 英文名稱: Angiotensin Conveing Enzyme 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: ACE Otophylloside B 中文名:青陽參苷B 分子式:C49H78O16 度:97.0%
緊張素I(素、AngI) 96T/48T Ornidazole 中文名:奧硝唑 分子式:C7H10ClN3O3 度:98.0%
緊張素Ⅱ一型受體抗原 英文名稱: Angiotensin 2 Receptor 1 Aigen 英文縮寫: AT1R 規(guī)格: 48T/96T Ophiopogonin D 中文名:麥冬皂苷D 分子式:C44H70O16 度:%
6-Amino-1-methyl-5-nitrosouracil 中文名: 分子式:C5H6N4O3 乙醇脫氫酶(ADH)測(cè)定試劑盒(紫外比色法)
6-Amino-1,3-dimethyluracil 中文名: 分子式:C6H9N3O2 微量游離血紅蛋白(FHb)測(cè)定試劑盒(比色法)
6,7-Dihydroneridienone A 中文名: 分子式:C21H28O3 超微量Na+K+–ATP酶測(cè)定試劑盒
6,6'-Di-O-sinapoylsucrose 中文名:6,6'- 二芥子酰基蔗糖 分子式:C34H42O19 胰蛋白酶測(cè)定試劑盒(紫外比色法)
6-(5-Chloropyridin-2-yl)-7-hydroxy-6,7-dihydro-5H-pyrrolo[3,4-b]pyrazin-5-one 中文名: 分子式:C11H7ClN4O2 乙醇酸氧化酶測(cè)試盒 可見分光光度法 50管/48樣
牛病毒PCR檢測(cè)試劑盒直銷DL色氨酸 HPLC≥98% 200mg 人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)試劑盒 Human TIMP-3 ELISA Kit
DL纈氨酸 HPLC≥98% 200mg RatCarboxyterminalpropeptideoftypeⅠprocollagen,PⅠCPELISAKit大鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
DL亮氨酸 HPLC≥98% 200mg 10%辛基-β-D-硫代葡萄糖苷(Octyl-β-D-thioglucopyranoside)1毫升
DL谷氨酸 HPLC≥98% 200mg MouseCalfiestinalalkalinephosphatase,CIAPELISA試劑盒小鼠牛小腸堿性0酸酶(CIAP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
青霉素V鉀 HPLC≥97% 100mg 小鼠血小板反應(yīng)蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)ELISA 試劑盒
去氫茯苓酸 HPLC≥98% 10mg Rat muscarinic acetylcholine receptor (M-AChR) ELISA Kit 大鼠毒蕈堿型乙酰膽堿受體(M-AChR)ELISA試劑盒
刺五加苷D HPLC≥98% 20mg Humanα-galactosidase,αGALELISAKit 人α半乳糖苷酶(αGAL)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
葫蘆素IIA HPLC≥98% 10mg CLIAKitfor(Mouseai-IgEreceptoraibody)ELISAKit小鼠抗IgE受體抗體規(guī)格:48T/96T
β,β二甲基丙烯酰紫草素 HPLC≥98% 20mg 飲料總?cè)樗岜壬ǘ繖z測(cè)試劑盒20
黃華堿 HPLC≥98% 20mg MouseIerleukin4,IL-4ELISAKit小鼠白介素4(IL-4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
香橙素,香樹素 HPLC≥98% 5mg RabbitIerleukin3,IL-3ELISA試劑盒兔子白介素3(IL-3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小構(gòu)樹醇 B HPLC≥98% 5mg rabbitImmunoglobulinA,IgAELISA試劑盒兔子球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小葉九里香內(nèi)酯 HPLC≥98% 5mg rabbitImmunoglobulinE,IgEELISA試劑盒兔子球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小蕓木香豆精 HPLC≥98% 5mg rabbitImmunoglobulinG,IgGELISA試劑盒兔子球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
瀉根醇酸 HPLC≥98% 5mg Rabbitinducibleniicoxidesyhase,iNOSELISA試劑盒兔誘導(dǎo)型合成酶(iNOS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
辛可寧 HPLC≥98% 5mg rabbitInsulin,INSELISA試劑盒兔子胰島素(INS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
辛夷烯酮 HPLC≥98% 5mg rabbitInsulin-likegrowthfactor1,IGF-1ELISA試劑盒兔子胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
新比克白芷內(nèi)酯 HPLC≥98% 5mg rabbitInsulin-likegrowthfactor2,IGF-2ELISA試劑盒兔子胰島素樣生長(zhǎng)因子2(IGF-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
新槐胺 HPLC≥98% 5mg RabbitoponinⅠ,Tn-ⅠELISAKit兔肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
星魚甾醇 HPLC≥98% 5mg RabbitThromboxaneB2,TX-B2ELISAKit兔素B2(TXB2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。