產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3391 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
同牛病毒3型牛巨細胞病毒PCR檢測試劑盒供應(yīng) | Bovine Cytomegalovirus(BCV,3)PCR | BKP3391 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:同牛病毒3型牛巨細胞病毒PCR檢測試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
緊張素Ⅱ一型受體抗原 英文名稱: Angiotensin 2 Receptor 1 Aigen 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: AT1R 3-Amino-5-mercapto-1,2,4-triazole 16691-43-3 中文名:3-氨基-5-巰基-1,2,4-三唑 分子式:C2H4N4S
緊張素Ⅱ 英文名稱: Angiotensin Ⅱ 英文縮寫: ANGⅡ 規(guī)格: 48T/96T Ophiopogonin D 945619-74-9 中文名:麥冬皂苷D 分子式:C44H70O16
緊張素Ⅰ 英文名稱: AngiotensinⅠ 英文縮寫: ANGⅠ 規(guī)格: 48T/96T Ophiopogonin D 945619-74-9 中文名:麥冬皂苷D 分子式:C44H70O16 度:% 關(guān)鍵詞: 抗增殖; 麥冬; 螺甾烷; 甾苷; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
緊張素Ⅰ 英文名稱: AngiotensinⅠ 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: ANGⅠ 3-Amino-4-methylbenzamide 中文名:3-氨基-4-甲基苯甲酰胺 分子式:C8H10N2O
緊張素2受體1型 英文名稱: Human Angiotensin 2 receptor Type 1 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: AG2 Ondansetron hydrochloride 99614-01-4 中文名:鹽酸昂丹司瓊 分子式:C18H20ClN3O 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
5α-Androstanedione 中文名:5α-雄甾烷二酮 分子式:C19H28O2 錳過氧化物酶(MnP)測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
5α-Androstane-3β,17β-diol 中文名:5α-雄烷二醇 分子式:C19H32O2 雙縮脲法蛋白含量測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
5-O-Ethylcleroindicin D 中文名: 分子式:C10H16O4 雙縮脲法蛋白含量測試盒 可見分光光度法 100管/96樣
5'-O-Dimethoxytrityl-N-benzoyl-desoxycytidine 中文名:5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯基)-N(4)-苯甲?;?/span>-2'-脫氧胞苷 分子式:C37H35N3O7 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白5 英文名稱: human Insulin like Growth Factor Binding Protein 5 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: IGFBP5
5-Hydroxymethylfurfural 中文名:5-羥甲基糠醛 分子式:C6H6O3 胰島素 英文名稱: Human Insulin 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: INS
同牛病毒3型牛巨細胞病毒PCR檢測試劑盒供應(yīng)甲基七葉亭 HPLC≥98% 20mg 小鼠血小板反應(yīng)蛋白(THBS1)ELISA試劑盒 ,英文名: THBS1 ELISA Kit
,二羥基苯基香豆素 HPLC≥98% 20mg 兔子可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA檢測試劑盒rabbitsolubleE-selectin,sE-selectinELISAKit 96T/48T
,二羥基(三氟甲基)香豆素 HPLC≥98% 20mg 犬白介素11(IL-11)試劑盒 Canine Ierleukin 11,IL-11 ELISA kit
,二羥基甲基香豆素 HPLC≥98% 20mg 英文名稱Humandihy-drotestosteroneElisakit人雙氫睪同(DHT)規(guī)格:96T/48T
甲基瑞香素甲基醚 HPLC≥98% 20mg 大鼠腎上腺髓質(zhì)素(AM)基因重組表達載體(pCMV5-AM)感受態(tài)菌DH-5α1毫升
,二羥基苯基香豆素 HPLC≥98% 20mg Ratlowdensitylipoprotein,LDLELISA試劑盒大鼠(LDL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
苯基瑞香素甲基醚 HPLC≥98% 20mg 小鼠血小板/內(nèi)皮細胞粘附分子-1(PECAM-1/CD31)ELISA試劑盒 ,英文名: PECAM-1/CD31 ELISA Kit
羥基基香豆素;黃檀素 HPLC≥98% 20mg 牛金屬硫蛋白(MT)ELISA檢測試劑盒BovineMetallothionein,MTELISAKit 96T/48T
,二羥基甲基香豆素 HPLC≥98% 20mg 人ADAM金屬肽酶含血小板反應(yīng)蛋白1基元4(ADAMTS4)試劑盒 Human ADAMTS4 ELISA kit
石當(dāng)歸素 HPLC≥98% 20mg 英文名稱MouseIL-1βELISAKit小鼠白介素1β(IL-1β)規(guī)格:96T/48T
香草酸 HPLC≥97% 100mg HumanNOD-likereceptor9,NLRELISAKit 人NOD樣受體(NLR)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
香草乙酮 HPLC≥98% 20mg HumanNon-PhosphorylatedIGFBP-1ELISAKit 人未0酸化類胰島素生長因子結(jié)合蛋白-1ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
香豆素 HPLC≥98% 20mg humanNoradrenaline,NAELISAKit 人去甲(NA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
香蜂草苷 HPLC≥98% 20mg HumanN-terminalpro-brainnaiureticpeptide,-proBNPELISAKIT 人N端前腦素(-proBNP)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
香荊芥酚 HPLC≥98% 50mg Humanoctameranscriptionfactor2A,OTF2AELISAKit 人八聚體轉(zhuǎn)錄因子(OTF2A)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
香蘭素 HPLC≥98% 20mg Humanoctameranscriptionfactor2B,OTF2BELISAKit 人八聚體轉(zhuǎn)錄因子(OTF2B)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
香蒲新苷 HPLC≥98% 20mg humanpapillomavirusIgG,HPV-IgGELISAKit 人狀瘤病毒抗體IgG(HPV-IgG)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
香葉醇 HPLC≥98% 20mg Humanparaoxonase,PONELISAKit 人酶(PON)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
香葉木素 HPLC≥98% 20mg Humanpeptidoglycan,PGELISAKit 人肽聚糖(PG)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
香葉木素O葡萄糖苷 HPLC≥98% 20mg HumanPeptidylprolylcis/ansisomerase,PPIELISAKit 人肽基脯氨酰順反異構(gòu)酶(PPI)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。