產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3410 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
牛合胞體病毒PCR檢測試劑盒說明書 | Bovine Respiartory Syncytial Virus(BRSV)RTPCR | BKP3410 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:牛合胞體病毒PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
尿激酶型纖溶酶原激活因子 (uPA) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 O-Benzyl-L-tyrosine 16652-64-5 中文名:O-芐基-L-酪氨酸 分子式:C16H17NO3 度:98.0%
定性測試盒 Acid esterase stain 3-Quinuclidinone 中文名:3-奎寧環(huán)酮 分子式:C7H11NO
內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素 英文名稱: Visfatin 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: Visfatin Otophylloside T 1642306-14-6 中文名: 分子式:C48H70O18
內(nèi)脂素 / 內(nèi)臟脂肪素 (Visfatin) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Ondansetron 中文名:昂丹司瓊 分子式:C18H19N3O
內(nèi)源性糖皮質(zhì)激素 英文名稱: Human Glucocoicoid Endogenous 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: GC Androstenediol 521-17-5 中文名:雄烯二醇 分子式:C19H30O2
Acyclovir 59277-89-3 中文名:阿昔洛韋 分子式:5O3 快速H-E組織細(xì)胞及脫落細(xì)胞染液 Phosphate buffer
4-Aminobenzophenone 1137-41-3 中文名:4-氨基二苯甲酮 分子式:C13H11NO 瑞-吉染色劑 100ml
N-Acetylcaprolactam 1888-91-1 中文名:N-乙酰己內(nèi)酰胺 分子式:C8H13NO2 Wright's-GiemsaStainingSolion
4-Aminoantipyrine 1983/7/8 中文名:4-氨基安替比林 分子式:C11H13N3O 蛋白標(biāo)準(zhǔn)(5mg/mlBSA) 1ml
2-Amino-5-chlorobenzophenone 719-59-5 中文名:2-氨基-5-氯二苯甲酮 分子式:C13H10ClNO 1-乙 25g
牛合胞體病毒PCR檢測試劑盒說明書根皮苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Phlorizin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱RatGlycogenphosphorylaseIIELISAKit大鼠糖原0酸化酶同工酶II(GPII)規(guī)格:96T/48T
根皮苷 Phlorizin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,BR 琥珀酸待測樣品處理試劑盒20
根皮素(標(biāo)準(zhǔn)品) Phloretin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 ELISAKitVEGFR-3人內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體3規(guī)格:48T/96T
根皮素 Phloretin 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR 小鼠和肽素(CPP)ELISA試劑盒 ,英文名: CPP ELISA Kit
鉤藤堿(標(biāo)準(zhǔn)品) Rhyncholphylline 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 人脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)ELISA檢測試劑盒HumanLipoarabinomannan,LAMELISAKit 96T/48T
β-谷甾醇 β-Sitosterol 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠突觸蛋白1(Syn1)試劑盒 Rat Synapsin-1,Syn1 ELISA kit
光甘草定 Glabridin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱RatGlycogenphosphorylaseBBELISAKit大鼠糖原0酸化酶同工酶BB(GPBB)規(guī)格:96T/48T
鬼臼(標(biāo)準(zhǔn)品) Podophyllotoxin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 花椰菜完全培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑
鬼臼(95%) Podophyllotoxin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>95%,BR ELISAKitVEGFR-2人內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體2規(guī)格:48T/96T
鬼臼(85%) Podophyllotoxin 質(zhì)量規(guī)格:>85%,BR 小鼠含性因子A域蛋白3A(vWA3A)ELISA試劑盒 ,英文名: vWA3A ELISA Kit
倍他米松 21-醋酸鹽 Betamethasone 21-acetate 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口 英文名稱HumanHeatShockProtein70ELISAKit人熱休克蛋白70(HSP70)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
倍他米松β-D-葡萄糖醛酸 Betamethasone β-D-Glucuronide 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口 英文名稱HumanHeatShockProtein90ELISAKit人熱休克蛋白90(HSP90)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
倍他米松-21-鈉鹽 Betamethasone 21-phosphate salt 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口 英文名稱Humanhemeoxygenase-1ELISAKit人血紅素氧合酶1(HO-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
比馬素游離酸 Bimatoprost, free acid 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口 英文名稱Humanhemeoxygenase-2ELISAKit人血紅素氧合酶2(HO-2)規(guī)格:96T/48T
比馬素酰胺 Bimatoprost amide 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口 英文名稱humanHistamineELISAKIT人組胺(Histamine)規(guī)格:96T/48T
布地奈德-d8 Budesonide-d8 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口 英文名稱HumanHistoneDeacetylaseELISAKit人組織蛋白去乙酰化酶(HD)規(guī)格:96T/48T
6α-羥基布地奈德 6α-Hydroxy Budesonide 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口 英文名稱HumanHLA-1ELISAKit人組織相容性抗原(HLA-1)規(guī)格:96T/48T
6β-羥基布地奈德 6β-Hydroxy Budesonide 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口 英文名稱HumanHLA-2ELISAKit人組織相容性抗原(HLA-2)規(guī)格:96T/48T
亞葉酸鈣水合物 Folinic acid calcium salt hydrate 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口 英文名稱HumanHRAbIgGELISAKit人抗心肌抗體IgG(HRAbIgG)規(guī)格:96T/48T
喜樹堿鈉鹽 Camptothecin 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口 英文名稱HumanHRAbIgMELISAKit人抗心肌抗體IgM(HRAbIgM)規(guī)格:96T/48T