產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3411 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
牛病毒型PCR檢測試劑盒供應(yīng) | Bovine Rhinitis A Virus (BRAV)ARTPCR | BKP3411 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:牛病毒型PCR檢測試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
檸檬酸(CA)含量測試盒 可見分光光度法 50管/48樣 Rizatriptan benzoate 145202-66-0 中文名:苯甲酸利扎曲坦 分子式:C22H25N5O2
鎳快速測試盒 Nickel rapid test case Ranitidine 66357-35-5 中文名:雷尼替丁 分子式:C13H22N4O3S 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
鎳測試盒 Nickel test case 4-[2-(2-Amino-4,7-dihydro-4-oxo-1H-pymol[2,3-d]pyrimodin-5-yl)ethyl]benzoic acid methyl ester 中文名: 分子式:C16H16N4O3 度:98.0%
尿酸含量測試盒 可見分光光度法 50管/48樣 Tropisetron hydrochloride 105826-92-4 中文名:鹽酸托烷司瓊 分子式:C17H21ClN2O2
尿激酶型纖溶酶原激活因子受體 (uPA-R) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 O-Benzyl-L-tyrosine 16652-64-5 中文名:O-芐基-L-酪氨酸 分子式:C16H17NO3
Ampicillin Trihydrate 7177-48-2 中文名:氨芐西林三水酸 分子式:C16H19N3O4S 普氏立克次體(RP)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
2-Acetylfluorene 781-73-7 中文名:2-乙酰芴 分子式:C15H12O 莫氏立克次體(RM)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
1-Allyl-3,5-Dimethylpyrazole 13369-74-9 中文名:1-烯丙基-3,5-二甲基吡唑 分子式:C8H12N2 瑞氏-姬姆薩復(fù)合染液 Vascular permeability test solion
(1R,2S)-2-Amino-1,2-diphenylethanol 23190-16-1 中文名:(1R,2S)-2-氨基-1,2-二苯基乙醇 分子式:C14H15NO 姬姆薩染液 Peroxidase staining
5,6-Dimethyl-2-Benzothiazolamine 29927-08-0 中文名:5,6-二甲基-2-苯并噻唑胺 分子式:C9H10N2S 巴氏染液(脫落細(xì)胞染色) Name
牛病毒型PCR檢測試劑盒供應(yīng)甘草酸二銨鹽 Diammonium Glycyrrhizate 質(zhì)量規(guī)格:UV≥97%,BR ELISAKitANG人生長素規(guī)格:48T/96T
橄欖苦苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Oleuropein 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠核連蛋白1(NUCB1)ELISA試劑盒 ,英文名: NUCB1 ELISA Kit
高麗槐素(標(biāo)準(zhǔn)品) Maackiain 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 人甘露糖受體(MR)ELISA檢測試劑盒Humanmannosereceptor,MRELISAKit 96T/48T
高良姜素(標(biāo)準(zhǔn)品) Galangin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠褪黑素(MT)試劑盒 Rat Melatonin,MT ELISA Kit
高三尖杉酯堿(標(biāo)準(zhǔn)品) Homoharringtonine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱RatGlycogenphosphorylaseIIELISAKit大鼠糖原0酸化酶同工酶II(GPII)規(guī)格:96T/48T
高香草酸(標(biāo)準(zhǔn)品) Homovanillic acid 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 胡蘿卜(carrot)完全培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑
告達(dá)亭苷元 caudatin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 ELISAKitVCAM-1/CD106人內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1規(guī)格:48T/96T
格列風(fēng)內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Griffonilide 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠核苷酸還原酶M1(RRM1)ELISA試劑盒 ,英文名: RRM1 ELISA Kit
葛根素(標(biāo)準(zhǔn)品) Puerarin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 人甘露糖(Mannose)ELISA檢測試劑盒HumanMannoseELISAKit 96T/48T
葛根素 Puerarin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,BR 大鼠突觸體素/突觸素(Syp/SYN)試劑盒 Rat Synaptophysin,Syp ELISA kit
苯并[g,h,i]芘(標(biāo)準(zhǔn)品) Benzo[ghi]perylene 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 犬α-3干擾素(IFN-α3)試劑盒 Canine Ierferon alpha-3,IFN-α3 ELISA kit
1-十八烯(標(biāo)準(zhǔn)品) 1-Octadecene 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC) 犬α干擾素(IFN-α)ELISA檢測試劑盒CanineIerferonα,IFN-αELISAKit 96T/48T
辛胺(標(biāo)準(zhǔn)品) n-Octylamine 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC) 犬β2微球蛋白(BMG/β2-MG)試劑盒 Dog β2-microglobulin,BMG/β2-MG ELISA Kit
十八烷(標(biāo)準(zhǔn)品) Octadecane 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC) 犬β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA檢測試劑盒CanineBeta-Endorphin,β-EPELISAKit 96T/48T
2-辛酮(標(biāo)準(zhǔn)品) 2-Octanone 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC) 犬β內(nèi)啡肽(β-EP)試劑盒 Canine Beta-Endorphin,β-EP ELISA Kit
苯氧乙酸(標(biāo)準(zhǔn)品) Phenoxyacetic acid 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 犬γ氨基(GABA)ELISA檢測試劑盒CanineGamma-aminobyricacid,GABAELISAKit 96T/48T
菲(標(biāo)準(zhǔn)品) Phenanthrene 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于環(huán)境分析 犬γ氨基(GABA)試劑盒 Canine Gamma-aminobyric acid,GABA ELISA Kit
芘(標(biāo)準(zhǔn)品) Pyrene 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 犬γ干擾素(IFN-γ)試劑盒 Dog Ierferon γ ,IFN-γ ELISA Kit
(-)-鹽酸東莨菪堿(標(biāo)準(zhǔn)品) (?)-Scopolamine hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.0% 犬癌胚抗原(CEA)試劑盒 Canine carcinoembryonic aign,CEA ELISA Kit
十四烷(標(biāo)準(zhǔn)品) Tetradecane 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC) 犬白介素1(IL-1)試劑盒 Canine Ierleukin 1,IL-1 ELISA Kit
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。