產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3418 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
豬短螺旋體PCR檢測(cè)試劑盒說明書 | Brachyspira hyodisenteriaePCR | BKP3418 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
熱休克蛋白 27(HSP27) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Panaxydiol 中文名: 分子式:C17H24O2
曲拉通X-100 100ml 3-Amino-4-hydroxybenzoic acid 中文名:3-氨基-4-羥基苯甲酸 分子式:C7H7NO3 度:98.0%
羥自由基檢測(cè) Hydroxyl radical detection Rasagiline mesylate 中文名:甲磺酸雷沙吉蘭 分子式:3S
羥脯酸測(cè)試前處理試劑 Preeatme reage hydroxyproline test Rengynic acid 中文名: 分子式:C8H14O4
羥脯酸(Hyp)測(cè)試盒 Glamine syhetase (GS) test kit Rengynic acid 517883-38-4 中文名: 分子式:C8H14O4
Atrazine 1912-24-9 中文名:阿特拉津 分子式:C8H14ClN5 山羊白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒
D(-)-Arginine 157-06-2 中文名:D-精氨酸 分子式:C6H14N4O2 山羊白介素2(IL-2)ELISA試劑盒
Benserazide hydrochloride 14919-77-8 中文名:鹽酸芐絲肼 分子式:C10H16ClN3O5 山羊白介素10(IL-10)ELISA試劑盒
Trenbolone heptanoate N 中文名: 分子式:C25H34O3 山羊γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒
3H-1,2-Benzodithiol-3-one-1,1-dioxide 66304-01-6 中文名:3H-1,2-苯并二硫醇-3-酮-1,1-二氧化物 分子式:C7H4O3S2 山羊β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISAKit
豬短螺旋體PCR檢測(cè)試劑盒說明書大麥芽堿(標(biāo)準(zhǔn)品) Hordenine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,標(biāo)準(zhǔn)品 Porcinegasieceptor,GsaRELISA試劑盒豬促素受體(GsaR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
丹參素(標(biāo)準(zhǔn)品) Danshensu 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠核因子kb(NF-kb)ELISA試劑盒
丹參素 Danshensu 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>95%,丹參提取 Rat ovalbumin specific IgE (OVA sIgE) ELISA Kit 大鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)ELISA試劑盒
丹參素鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) Danshensu 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 humanAi-ThyroidMicrosomeAibody,ATMA/TMABELISAKIT 人抗甲狀腺微粒體抗體(ATMA/TMAB)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
丹參酮I(標(biāo)準(zhǔn)品) Tanshinone I 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 HumanAi-OvaryAibody,AOAbELISA試劑盒人抗卵巢抗體(AOAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
丹參酮I Tanshinone I 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,BR 植物維生素E高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒20
丹參酮IIA(標(biāo)準(zhǔn)品) Tanshinone IIA 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Humayrosinekinase2,Tyk-2ELISAKit人酪氨酸激酶2(Tyk-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
丹參酮IIA Tanshinone IIA 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠核因子I/B(NFIB)ELISA試劑盒 ,英文名: NFIB ELISA Kit
丹參酮IIA-磺酸鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) Tanshinone IIA-sulfonic 質(zhì)量規(guī)格:UV≥98%,HPLC≥95% 人脂多糖/內(nèi)(LPS)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanLipopolysaccharides,LPSELISAKit 96T/48T
丹酚酸A(標(biāo)準(zhǔn)品) Salvianolic acid A 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)試劑盒 Rat Peosidine ELISA Kit
苯氧乙酸鈉(>98%,BR) Phenoxyaceti acid salt 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠鋅指同源框蛋白1B(ZFHX1B)ELISA試劑盒 ,英文名: ZFHX1B ELISA Kit
水楊酸苯酯(>98%,BR) Phenyl salicylate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
磷脂酶A2 Phospholipase A2 from Crotalus adamanteus Venom 質(zhì)量規(guī)格:比活性:>200U/mg,BC 小鼠新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA試劑盒 ,英文名: NN-T4 ELISA Kit
對(duì)尼泊金丁酯鈉(>98%,USP) p-Hydroxybenzoic acid butyl ester salt 質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP 小鼠信號(hào)素3E(SEMA3E)ELISA試劑盒 ,英文名: SEMA3E ELISA Kit
尼泊金乙酯鈉(>98.5%,BR) p-Hydroxybenzoic acid ethyl ester salt 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR 小鼠信號(hào)素7A(SEMA7A)ELISA試劑盒 ,英文名: SEMA7A ELISA Kit
尼泊金甲酯鈉(>99%,BR) p-Hydroxybenzoic acid methyl ester salt 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 小鼠信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子(Smad1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
尼泊金丙酯鈉(>98.5%,USP) p-Hydroxybenzoic acid propyl ester salt 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,USP 小鼠信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子(Smad1)ELISA檢測(cè)試劑盒Mousesignalansduction-Smad1ELISAKit 96T/48T
庚二酸(>98%,BR) Pimelic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子1(Smad1)ELISA試劑盒 ,英文名: Smad1 ELISA Kit
聚維酮 Poly(vinylpyrrolidone)–Iodine complex 質(zhì)量規(guī)格:BR 小鼠信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子7(Smad7)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
聚 Polypropylene glycol 2000 質(zhì)量規(guī)格:BR 小鼠信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子7(Smad7)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseSmad7ELISAKit 96T/48T
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:豬短螺旋體PCR檢測(cè)試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。