產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3437 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
類鼻疽伯克霍爾德菌PCR檢測(cè)試劑盒直銷 | Burkholderia pseudomalleiPCR | BKP3437 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
人視黃醇結(jié)合蛋白4(RBP-4)ELISAKit Thiamphenicol 15318-45-3 中文名:甲砜霉素 分子式:C12H15Cl2NO5S
人生長(zhǎng)激素受體(GHR)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 Human GHR (Growth Hormone Receptor) ELISA Kit 3,5-Di-O-caffeoylquinic acid 中文名:異綠原酸A 分子式:C25H24O12
人三0酸鳥(niǎo)苷環(huán)水解酶1 英文名稱: Human Guanosine 5′-iphosphate Cyclohydrolase 1 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): GCH1 3-O-Acetylandrostenone hydrazone 中文名:3-O-乙?;弁?/span> 分子式:C21H32N2O2
人乳酸脫氫酶 英文名稱: Human Lactate Dehydrogenase 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): LDH 3-Acetyl-2,5-dichlorothiophene 36157-40-1 中文名: 分子式:C6H4Cl2OS
人溶菌酶 英文名稱: lysozyme 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): LZM/LYS 3-[4-[(2-Chloro-5-iodophenyl)methyl]phenoxy]tetrahydro-furan 中文名: 分子式:C17H16ClIO2 度:98.0%
1,8-Bis(dimethylamino)naphtalene 20734-58-1 中文名:1,8-雙二甲氨基萘 分子式:C14H18N2 綠膿桿菌(PA)核酸檢測(cè)試劑盒 48T
Bis(4-bromophenyl)amine 16292-17-4 中文名:雙(4-溴苯基)胺 分子式:C12H9Br2N 腸道病毒EV71核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?/span>) 48T
CTU Guanamine 22535-90-6 中文名: 分子式:C17H26N10O4 食品DNA提取試劑盒 50T
Bis[4-(2-hydroxyethoxy)phenyl] sulfone 27205-03-4 中文名:雙[4-(2-羥乙氧基)苯基]砜 分子式:C16H18O6S FoodDNAExactionKit 100T
Bis[4-(dimethylamino)phenyl]methane 101-61-1 中文名:雙[4-(二甲氨基)苯基]甲烷 分子式:C17H22N2 快速真菌DNA提取試劑盒 50T
類鼻疽伯克霍爾德菌PCR檢測(cè)試劑盒直銷羥乙基磺酸銨鹽 AHES 質(zhì)量規(guī)格:>99% ELISAKitPC人血漿抗凝蛋白C規(guī)格:48T/96T
羥乙基磺酸 HES 質(zhì)量規(guī)格:>80%,粘狀液體 小鼠花生四烯酸-15-脂加氧酶(ALOX15)ELISA試劑盒 ,英文名: ALOX15 ELISA Kit
DIPSO.Na;3-[N-N-雙(2-羥乙基)氨基]-2-羥基丙磺酸單鈉鹽 DIPSO Mono 質(zhì)量規(guī)格:>98% 人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白α(C/EBPα)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanCCAAT/enhancerbindingproteinalpha,C/EBPαELISAKit 96T/48T
DIPSO; 3-[N-N-雙(2-羥乙基)氨基]-2-羥基丙磺酸 DIPSO 質(zhì)量規(guī)格:>99% 大鼠維生素B6(VB6)試劑盒 Rat Vitamin B6,VB6 ELISA Kit
2,3-二巰基丙磺酸鈉 DMPS 質(zhì)量規(guī)格:>95%,一水合物 英文名稱RatCA199ELISAKit大鼠胃標(biāo)志物(CA199)規(guī)格:96T/48T
CHPS-Na;3-氯-2-羥基丙磺酸鈉 CHPS-Na 質(zhì)量規(guī)格:>98.5% 黑色96孔板1塊
SBES;2-乙基磺酸鈉 2-bromoethanesulphonate 質(zhì)量規(guī)格:>98.5% ELISAKitGMP-140人血漿α顆粒膜蛋白規(guī)格:48T/96T
BICINE;N,N-二羥乙基甘氨酸 BICINE 質(zhì)量規(guī)格:>99% 小鼠花生四烯酸-12-脂加氧酶(ALOX12)ELISA試劑盒 ,英文名: ALOX12 ELISA Kit
BES salt; N,N-二(2-羥乙基)-2-氨基乙磺酸鈉 BES Salt 質(zhì)量規(guī)格:>99% 人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白δ(C/EBPδ)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanCCAAT/enhancerbindingproteindeta,C/EBPδELISAKit 96T/48T
BES free acid; N,N-(2-羥乙基)-2-氨基乙磺酸 BES free acid 質(zhì)量規(guī)格:>99% 大鼠維生素B12(VB12)試劑盒 Rat Vitamin B12,VB12 ELISA Kit
丙磺舒(標(biāo)準(zhǔn)品) Probenecid 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 冰凍切片組織CDK6蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20
諾氟沙星 Norfloxacin 質(zhì)量規(guī)格:>99,USP,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 冰凍切片組織COLLAGENII蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20
諾氟沙星(標(biāo)準(zhǔn)品) Norfloxacin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 冰凍切片組織COLLAGENI蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20
諾氟沙星鹽酸鹽 Norfloxacin HCl 質(zhì)量規(guī)格:含量大于98.5% 冰凍切片組織CREB蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20
諾氟沙星鹽酸鹽(標(biāo)準(zhǔn)品) Norfloxacin HCl 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 冰凍切片組織CYP1A2蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20
吲哚美辛 Indometacin 質(zhì)量規(guī)格:>99%,AR,BP2010 冰凍切片組織CYP2B1蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20
吲哚美辛(標(biāo)準(zhǔn)品) Indometacin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 冰凍切片組織CYTOCHROMEC蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20
西米替汀 Cimetidine 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP32,A型 冰凍切片組織DAPKINASE蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20
西米替?。?biāo)準(zhǔn)品) Cimetidine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 冰凍切片組織DHPR受體蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20
阿德福韋/阿德福韋酯 Adefovir dipivoxil 質(zhì)量規(guī)格:>99%,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 冰凍切片組織EGFR蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:類鼻疽伯克霍爾德菌PCR檢測(cè)試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。