產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3447 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
唾液彎曲桿菌PCR檢測試劑盒供應(yīng) | Campylobacter sputorumPCR | BKP3447 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:唾液彎曲桿菌PCR檢測試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
人粘膜相關(guān)上皮趨化因子elisa試劑盒 人粘膜相關(guān)上皮趨化因子試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人粘膜相關(guān)上皮趨化因子試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人粘膜相關(guān)上皮趨化因子試劑盒、人粘膜相關(guān)上皮趨化因子elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 2-Amino-N-(2-chloro-6-methylphenyl) thiazole-5-carboxamide 中文名: 分子式:C11H10ClN3OS 度:98.0%
人粘膜相關(guān)上皮趨化因子(MEC/CCL28)ELISA試劑盒 2-Aminophenyl phenyl sulfide 中文名:2-氨基二苯硫醚 分子式:C12H11NS
人粘膜相關(guān)上皮趨化因子(MEC/CCL28)ELISAKit 2-Aminofluorene 153-78-6 中文名:2-氨基芴 分子式:C13H11N 度:99.0% 關(guān)鍵詞:
人早老素2elisa試劑盒 人早老素2試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人早老素2試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人早老素2試劑盒、人早老素2 elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 2-Amino-N-(2-chloro-6-methylphenyl) thiazole-5-carboxamide 中文名: 分子式:C11H10ClN3OS
人游離特異性抗原(fPSA)ELISAKit 3-(Bromomethyl)-2-cyclopropyl-4-(4'-fluorophenyl)quinoline 中文名: 分子式:C19H15BrFN 度:98.0%
(S)-4-Benzyl-2-oxazolidinone 90719-32-7 中文名:(S)-4-芐基-2-噁唑烷酮 分子式:C10H11NO2 S-100蛋白 英文名稱: S-100protein 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: S-100
1-Benzyl-1H-indazol-3-ol 2215-63-6 中文名:1-芐基-1H-吲唑-3-醇 分子式:C14H12N2O 四甲基化銨 100g
4-Benzyl L-aspartate 2177-63-1 中文名:L-天冬氨酸-4-芐酯 分子式:C11H13NO4 TMA 500g
Bezafibrate 41859-67-0 中文名:苯扎貝特 分子式:C19H20ClNO4 四甲基聯(lián) 5g
Benzoyleneurea 86-96-4 中文名:亞苯甲?;?/span> 分子式:C8H6N2O2 TMB 1g
唾液彎曲桿菌PCR檢測試劑盒供應(yīng)V Lup-20(29)-en-28-oic acid, 3-[β-D-glucopyranosyl(1→4)[a-L-rhamnopyranosyl) (1→2)-a -L-arabinopyranosyl]oxy], (3β,4a)-) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱RatCytochromeCELISAKit大鼠細(xì)胞色素C(CytochromeC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
V Hederagenin 3-O-α-L-rhamnopyranosyl(1→2)-(β-D-glucopyranosyl(1→4))-α-L-arabinopyranoside 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 核酸氧化8-氧脫氧鳥苷(8-oxo-dG)高效液相色譜(HPLC)分析試劑盒20
GDC0994 GDC-0994 質(zhì)量規(guī)格:ERK1/2 抑制劑 ELISAKitHSA人血清白蛋白規(guī)格:48T/96T
氨三乙酸 Nitrilotriacetic acid 質(zhì)量規(guī)格:AR 小鼠環(huán)胍酸肽(CCP)ELISA試劑盒 ,英文名: CCP ELISA Kit
靈芝酸I(標(biāo)準(zhǔn)品) Ganoderic acid I 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 人2,3-二0酸甘油酸(2,3-DPG)ELISA檢測試劑盒Human2,3-Disphosphoglycerate,2,3-DPGELISAKit 96T/48T
苦蘇花皂苷C Cussosaponin C 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠維生素D2(VD2)試劑盒 Rat Vitamin D2,VD2 ELISA Kit
常春藤苷C Hederacoside C 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱RatCytochromeCELISAKit大鼠細(xì)胞色素C(CytochromeC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Hederacolchiside E Hederacolchiside E 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 核桃誘導(dǎo)(DKWJuglans)培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑
3-O-β-D-葡萄糖( 1→3)- a -L-鼠李糖(1→2)- a-L-阿拉伯糖 齊墩果酸– 28-O-鼠李糖(1→4)葡萄糖(1→6)葡萄糖苷 V 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 ELISAKitHA人血凝素規(guī)格:48T/96T
3-O-b-D-葡萄糖( 1→4)-[ a -L-鼠李糖(1→2)]- a-L-阿拉伯糖 23-羥基羽扇豆20(29)-烯-28–酸- 28-O-鼠李糖(1→4)葡萄糖(1→6)葡萄糖苷 V 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠環(huán)孢素A(CsA)ELISA試劑盒 ,英文名: CsA ELISA Kit
梣酮(標(biāo)準(zhǔn)品) Fraxinellone 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠封閉蛋白3(CLDN3)ELISA試劑盒 ,英文名: CLDN3 ELISA Kit
茶黃素(標(biāo)準(zhǔn)品) Theaflavin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠輔肌動(dòng)蛋白α2(ACTN2)ELISA試劑盒 ,英文名: ACTN2 ELISA Kit
茶黃素-3'-沒食子酸酯 Theaflavin-3'-gallate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠復(fù)制啟動(dòng)因子1(REPIN1)ELISA試劑盒 ,英文名: REPIN1 ELISA Kit
茶黃素-3-沒食子酸酯 Theaflavin-3-gallate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠鈣蛋白酶1(CAPN1)ELISA試劑盒 ,英文名: CAPN1 ELISA Kit
柴胡皂苷A(標(biāo)準(zhǔn)品) Saikosaponin A 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠鈣蛋白酶10(CAPN10)ELISA試劑盒 ,英文名: CAPN10 ELISA Kit
柴胡皂苷B2(標(biāo)準(zhǔn)品) Saikosaponin B2 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠鈣蛋白酶抑制蛋白(CAST)ELISA試劑盒 ,英文名: CAST ELISA Kit
柴胡皂苷C(標(biāo)準(zhǔn)品) Saikosaponin C 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠鈣非依賴型0脂酶A2(iPLA2)ELISA試劑盒 ,英文名: iPLA2 ELISA Kit
柴胡皂苷D(標(biāo)準(zhǔn)品) Saikosaponian D 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠鈣非依賴性0脂酶A2(iPLA2)ELISA試劑盒 ,英文名: iPLA2 ELISA Kit
常春藤皂苷元(標(biāo)準(zhǔn)品) Hederagenin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠鈣結(jié)合蛋白(CR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
常春藤皂苷元 Hederagenin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥97%,BR 小鼠鈣結(jié)合蛋白(CR)ELISA檢測試劑盒MouseCalretinin,CRELISAKit 96T/48T
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。