產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3436 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
鼻疽伯克霍爾德氏菌PCR檢測試劑盒價(jià)格 | Burkholderia malleiPCR | BKP3436 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:鼻疽伯克霍爾德氏菌PCR檢測試劑盒價(jià)格使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
人趨化因子(fractalkine/CX3CL1)ELISAKit 2-Cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)-quinolyl-3-methanol 121660-11-5 中文名: 分子式:C19H16FNO
人清道夫受體B類成員1(SCARB1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 Human SCARB1 (Scavenger receptor class B member 1) ELISA kit 3,3-Dimethoxy-5α-androstan-17-one 中文名:3,3-二甲氧基-5α-雄烷-17-酮 分子式:C21H34O3
人特異性抗原(PSA)ELISAKit 3-(Bromomethyl)-2-cyclopropyl-4-(4'-fluorophenyl)quinoline 中文名: 分子式:C19H15BrFN
人葡萄糖依賴性釋放多肽(GIP)ELISAKit Tiamulin 中文名:泰妙菌素 分子式:C28H47NO4S
人葡萄糖激酶(GCK)ELISAKit Timosaponin B-II 136656-07-0 中文名:知母皂苷B-II 分子式:C45H76O19 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 知母; 甾苷; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
2,2-Bis(hydroxymethyl)butyric acid 10097-02-6 中文名:2,2-二羥甲基丁酸 分子式:C6H12O4 FTFungalDNAKit 100T
1,3-Bis(4,5-dihydro-2-oxazolyl)benzene 34052-90-9 中文名:1,3-雙(4,5-二氫-2-惡唑)苯 分子式:C12H12N2O2 十六烷基基溴化胺 50g
4,4'-Cyclohexylidenebisphenol 843-55-0 中文名:4,4'-環(huán)亞己基雙苯酚 分子式:C18H20O2 CTAB 250g
2,2'-Dithiobisbenzanilide 135-57-9 中文名:2,2'-二苯甲酰氨基二苯二硫 分子式:C26H20N2O2S2 5’-三0酸胞苷三鹽 50mg
Dimethylolurea 140-95-4 中文名:雙羥甲脲 分子式:C3H8N2O3 CTP 100mg
鼻疽伯克霍爾德氏菌PCR檢測試劑盒價(jià)格黃芪多糖(68%) 2-(Chloromethyl)-4-(4-Nitrophenyl)-1,3-thiazole 質(zhì)量規(guī)格:>68% 英文名稱RatCA199ELISAKit大鼠胃標(biāo)志物(CA199)規(guī)格:96T/48T
黃芪多糖(50%) 2-(Chloromethyl)-4-(4-Nitrophenyl)-1,3-thiazole 質(zhì)量規(guī)格:>50% 烘培食物尿素比色法定量檢測試劑盒20
黃芪多糖(30%) 2-(Chloromethyl)-4-(4-Nitrophenyl)-1,3-thiazole 質(zhì)量規(guī)格:>30% ELISAKitHO-2人血紅素氧合酶2規(guī)格:48T/96T
3-奎寧環(huán)酮鹽酸鹽 3-Quinuclidinone HCl 質(zhì)量規(guī)格:>98% 小鼠花生四烯酸(AA)ELISA試劑盒 ,英文名: AA ELISA Kit
伊索拉定 Irsogladine 質(zhì)量規(guī)格:≥99%,BR 大鼠補(bǔ)體片斷3a(C3a)ELISA檢測試劑盒RatComplemefragme3a,C3aELISAKit 96T/48T
ADA單鈉鹽 ADA mono salt 質(zhì)量規(guī)格:>99% 人補(bǔ)體1抑制物抗體-IgM(C1INH-IgM)試劑盒 Human Compleme 1 inhibitor aoaibody-IgM,C1INH-IgM ELISA Kit
N-(乙酰氨基)亞氨基二乙酸二鈉鹽 ADA di salt 質(zhì)量規(guī)格:>98% Ratansforminggrowthfactor-beta-stimulatedProteinclone-22,TSC22ELISAKit大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β刺激蛋白22(TSC22)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
ADA;N-(2-乙酰胺基)-2-亞氨基二乙酸 ADA 質(zhì)量規(guī)格:>99% MAYER蘇木素復(fù)染試劑盒50
(2S)-2-N-芴甲氧羰基氨基-2-甲基-6-庚烯酸 (S)-N-Fmoc-2-(4'-pentenyl)alanine 質(zhì)量規(guī)格:>97% PorcineEndothelialniicoxidesyhase3,eNOS-3ELISA試劑盒豬內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
潑尼松龍鈉 Prednisolone phosphate 質(zhì)量規(guī)格:>97%,USP 小鼠呼腸孤病毒3型抗體(RV-3 Ab)ELISA試劑盒
丙谷二肽,L-丙-谷二肽,力肽 Ala-Gln 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人肝脂酶(HL)試劑盒 Human hepatic lipase,HL ELISA Kit
L-精氨酸甲酯二鹽酸 H-Arg-OMe·2HCl 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 人桿狀病毒IAP重復(fù)包含蛋白2/3(BIRC2/3)試劑盒 Human BIRC2/3 ELISA Kit
D-丙氨酰胺鹽酸鹽 D-Alaninamide hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人干擾素a-抗體(Ai-IFN-ab)試劑盒 Human Ai-ierferon aibody(Ai-IFN-ab)ELISA Kit
硝酸芬替康唑; 硝酸芬康唑 Fenticonazole Nitrate 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 人干擾素活化基因205(Ifi205)試劑盒 human ierferon activated gene 205,Ifi205 ELISA Kit
1-芐基D-谷氨酸 1-Benzyl D-Glutamate 質(zhì)量規(guī)格:0.98 人干擾素調(diào)節(jié)因子3(IRF3)試劑盒 Human IRF3 ELISA Kit
D-苯丙氨酸 D-Phenylalanine 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 人干擾素調(diào)節(jié)因子8(IRF8)試劑盒 Human IRF8 ELISA Kit
D-丙氨酸 D-Alanine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人干擾素誘導(dǎo)T細(xì)胞趨化因子(ITAC/CXCL11)試劑盒 Human ITAC ELISA Kit
β-丙氨酸 β-Alanine 質(zhì)量規(guī)格:>98% 人干擾素誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)試劑盒 Human IP-10 ELISA Kit
β-丙氨酸(標(biāo)準(zhǔn)品) β-Alanine 質(zhì)量規(guī)格:>98%(T),標(biāo)準(zhǔn)品 人干擾素誘導(dǎo)跨膜蛋白1(IFITM1/CD225/IFI17)試劑盒 Human IFITM1 ELISA kit
D-色氨酸 D-Tryptophan 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長因子(SCF/MGF)試劑盒 Human SCF/MGF ELISA kit
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。