產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3443 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
大腸彎曲桿菌PCR檢測試劑盒供應(yīng) | Campylobacter coliPCR | BKP3443 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:大腸彎曲桿菌PCR檢測試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
人血漿抗凝蛋白C(PC)ELISAKit 2-C-Methyl-D-erythrono-1,4-lactone 中文名: 分子式:C5H8O4
人血紅蛋白elisa試劑盒 人血紅蛋白試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人血紅蛋白試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:人血紅蛋白試劑盒、人血紅蛋白elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 3-(Boc-Amino)piperidine 中文名: 分子式:C10H20N2O2 度:98.0%
人生長因子elisa試劑盒 人生長因子試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人生長因子試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:人生長因子試劑盒、人生長因子elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 2-Fluoroadenosine 中文名: 分子式:C10H12FN5O4
人生長因子(TAF)ELISA試劑盒 2-Deoxy-2,2-difluoro-D-erythro-pentafuranous-1-ulose-3,5-dibenzoate 122111-01-7 中文名: 分子式:C19H14F2O6
人內(nèi)皮細胞生長因子受體3(VEGFR-3/Flt-4)ELISAKit 2-Amino-9H-fluoren-9-one 中文名:2-氨基-9H-芴-9-酮 分子式:C13H9NO 度:99.0%
Benzoyl-L-histidine 5354-94-9 中文名:苯甲?;?/span>-L-組氨酸 分子式:C13H13N3O3 動植物組織葡萄糖含量試劑盒 可見分光光度法 50管/48樣
1-Benzyl D-aspartate 79337-40-9 中文名:D-天冬氨酸1-芐酯 分子式:C11H13NO4 水飽和酚 10x250ml
1-Benzyl L-aspartate 7362-93-8 中文名:L-天冬氨酸1-芐酯 分子式:C11H13NO4 Phenol,WaterSaturated,pH5.3
Benzoyl leuco methylene blue 1249-97-4 中文名:芐?;鶡o色亞甲基蘭 分子式:C23H23N3OS 0酰二肽 10x250ml
Benzyl 4-bromophenyl ketone 2001-29-8 中文名:芐基4-溴代苯基酮 分子式:C14H11BrO Phosphoramidon
大腸彎曲桿菌PCR檢測試劑盒供應(yīng)佛司可林(標(biāo)準(zhǔn)品) Forskolin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠過敏/補體片斷4a(C4a)ELISA檢測試劑盒MouseComplemefragme4a,C4aELISAKit 96T/48T
黃藤素(標(biāo)準(zhǔn)品) Palmatine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 人抗Ku抗體(ai-Ku-Ab)試劑盒 Human ai-Ku-aibody ELISA Kit
鹽酸西那卡塞;鹽酸甲狀旁腺激素 Cinacalcet HCl,AMG073 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR Rat5-Nucleotidase,5-ELISAKit大鼠5核苷酸酶(5-)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
黃藤素 Palmatine 質(zhì)量規(guī)格:≥97%,BR 載玻片細胞P27蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20
鏈霉蛋白酶/鏈絲菌蛋白酶/鏈霉菌蛋白酶 Pronase E 質(zhì)量規(guī)格:BR,4000u/mg,進分 MonkeyapoproteinB100,apo-B100ELISA試劑盒猴載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
抗蛋白酶(進口) Antipain dihydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:美國進口 小鼠壞死因子受體相關(guān)因子6(AF6)ELISA試劑盒 ,英文名: AF6 ELISA Kit
D-巖藻糖 D-(+)-FUCOSE 質(zhì)量規(guī)格:>98%,日本進口原裝 小鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISA檢測試劑盒MousedipeptidylpeptldaseⅣ,DPPⅣELISAKit 96T/48T
N-乙酰-DL-絲氨酸 N-Acetyl-DL-Serine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人抗IVIgG抗體試劑盒 Human ai-IVIgG aibody ELISA Kit
玉米素 Zeatin 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Rat6-keto-prostaglandinF1a,6-K-PGF1aELISAKit大鼠6同素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
水飛薊素 Silymarin 質(zhì)量規(guī)格:水飛薊素UV 80%;單賓30% 載玻片細胞P35蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20
草酸銅(>97%,Tech Grade) Copper(II) oxalate hydrate 質(zhì)量規(guī)格:>97%,工業(yè)級 活體細胞線粒體跟蹤試劑盒100
無水硫酸銅(>99%,BR) Copper(II) sulfate, anhydrous 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 活體細胞線粒體膜通道孔(MPTP)熒光檢測試劑盒20
肌酸酐;肌酐 Creatinine 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 活體細胞線粒體內(nèi)膜功能/膜電位測定試劑盒20
酸性猩紅7B(>70%,BS) Crocein scarlet 7B 質(zhì)量規(guī)格:>70%,BS 活體細胞線粒體損傷/氧化(NAO)熒光測定試劑盒20/400
酸性紅44(BS) Crystal ponceau 6R 質(zhì)量規(guī)格:BS 活體細胞線粒體損傷/氧化(NAO)熒光測定試劑盒20/400
環(huán)胞甙鹽酸鹽;鹽酸環(huán)胞苷;安西他濱鹽酸鹽 Cyclocytidine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 活體細胞線粒體形態(tài)/活性熒光染色試劑盒100/200
5'-三胞苷三鈉鹽 Cytidine-5'-triphosphate (CTP), 3 質(zhì)量規(guī)格:>98%,分子生物學(xué)級 活體細胞線粒體長期跟蹤試劑盒20
細胞松弛素A(>98%,BR) Cytochalasin A 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 活體細胞線粒體流式細胞儀測定試劑盒20
細胞松弛素C(>98%,BR) Cytochalasin C 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 活體細胞氧化應(yīng)激活性氧(ROS)原位比色法定量檢測試劑盒(超氧陰離子)100
細胞松弛素 D(>98%,BR) Cytochalasin D 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 活體細胞氧化應(yīng)激活性氧(ROS)原位染色試劑盒(超氧陰離子)100
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。