產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3445 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
空腸彎曲桿菌PCR檢測(cè)試劑盒直銷 | Campylobacter jejuniPCR | BKP3445 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:空腸彎曲桿菌PCR檢測(cè)試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
人乙脫氫酶elisa試劑盒 人乙脫氫酶試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 人乙脫氫酶試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人乙脫氫酶試劑盒、人乙脫氫酶elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 3-(Bromomethyl)-2-cyclopropyl-4-(4'-fluorophenyl)quinoline 154057-56-4 中文名: 分子式:C19H15BrFN
人原(PI)ELISAKit Tiamulin 55297-95-5 中文名:泰妙菌素 分子式:C28H47NO4S 度:98.0%
人受體β(ISR-β)ELISAKit Tiamulin 55297-95-5 中文名:泰妙菌素 分子式:C28H47NO4S
人氧化抗體(OLAb)ELISAKit Timosaponin AIII 41059-79-4 中文名:知母皂苷AIII 分子式:C39H64O13
人血小板生成素(TPO)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 Human TPO (Thrombopoietin) ELISA Kit 2-Naphthyl N-benzoylphenylalaninate 15873-25-3 中文名:2-萘基N-苯甲?;奖彼狨?/span> 分子式:C26H21NO3
N4-Benzoylcytosine 26661-13-2 中文名:N4-苯甲?;奏?/span> 分子式:C11H9N3O2 DPD臭氧測(cè)定試劑盒 DPD ozone reage kit
Benzyl 2,4-dihydroxyphenyl ketone 3669-41-8 中文名:2,4-二羥基苯基芐酮 分子式:C14H12O3 臭氧快速試劑盒 Ozone rapid reage kit
5-Benzyl N-(tert-butoxycarbonyl)-L-glutamate 13574-13-5 中文名:N-(叔丁氧羰基)-L-谷氨酸-5-芐酯 分子式:C17H23NO6 DPD余測(cè)定試劑盒 DPD residual test kit
N6-Benzyladenine 1214-39-7 中文名:N6-芐基腺嘌呤 分子式:C12H11N5 水樣中離子(Hg2+)濃度測(cè)試盒 可見分光光度法 50管/48樣
Benzidamine hydrochloride 132-69-4 中文名:鹽酸芐達(dá)明 分子式:C19H24ClN3O 水樣中六價(jià)鉻離子(Cr6+)濃度測(cè)試盒 可見分光光度法 50管/48樣
空腸彎曲桿菌PCR檢測(cè)試劑盒直銷尿苷-5'-二葡萄糖鈉鹽(UDPG) Uridine-5-diphosphoglucose di salt 質(zhì)量規(guī)格:>98%,Sigma Humanuridinedipho-sphateglucuronosylansferase2familypolypeptideB4,UGT2B4ELISAKit人二0酸尿核苷葡糖酸基轉(zhuǎn)移酶2家族肽B4(UGT2B4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
5-鳥苷一二鈉鹽(GMP) GMP 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠壞死因子樣細(xì)胞凋亡弱誘導(dǎo)因子(TWEAK)ELISA試劑盒 ,英文名: TWEAK ELISA Kit
腺苷-5單(進(jìn)口原裝) AMP 質(zhì)量規(guī)格:>99,ALFA原裝 小鼠卵泡抑素(FS)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseFollistatin,FSELISAKit 96T/48T
腺苷-5單(AMP) Adenosine-5-monophosphoric acid 質(zhì)量規(guī)格:>98,BR 人抗Sa抗體(ai-Sa-Ab)試劑盒 Human ai-Sa-aibody ELISA Kit
5'-尿嘧啶 5-Bromouracil 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Rat26Sproteasome,26SPSMELISAKit大鼠26S蛋白酶體(26SPSM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
尿嘧啶 Uracil 質(zhì)量規(guī)格:>99%,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 載玻片細(xì)胞NFKAPPABP65蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20
胞嘧啶 Cytosine 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR MacrobrachiumrosenbergiiNodavirus,MrNVELISA試劑盒羅氏沼蝦諾達(dá)病毒(MrNV)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
胞嘧啶(標(biāo)準(zhǔn)品) Cytosine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體4(AIL-R4)ELISA試劑盒 ,英文名: AIL-R4 ELISA Kit
硫酸腺嘌呤 Adenine sulfate 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 小鼠補(bǔ)體片斷3a(C3a)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseComplemefragme3a,C3aELISAKit 96T/48T
硫酸腺嘌呤(標(biāo)準(zhǔn)品) Adenine sulfate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 人抗Mi2抗體(ai-Mi2-Ab)試劑盒 Human ai-Mi2-aibody ELISA Kit
草酰乙酸 Oxaloacetic acid 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR 蛋白雜交封閉溶液100毫升
硫酸鋅七水(AR) Zinc sulfate, heptahydrate 質(zhì)量規(guī)格:>99.5%,AR 蛋白雜交封閉溶液100毫升
鉀鈉四水 Potassium tatrate, tetrahydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 蛋白雜交封閉溶液100毫升
縮二脲 Biuret 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 蛋白巰基化(S-thiolation)高效液相色譜(HPLC)分析試劑盒20
硫酸鎂無水(分子生物學(xué)級(jí)) Magnesium sulfate anhydrous 質(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學(xué)級(jí) 蛋白巰基化(S-thiolation)同位素法分析試劑盒20
石英砂 Quartz sand 質(zhì)量規(guī)格:BR 蛋白體復(fù)合物制備試劑盒20
3-氨基-1,2,4-三唑 3-AT 質(zhì)量規(guī)格:>96%,分子生物學(xué)級(jí) 蛋白硝基化染色測(cè)定試劑盒10
鈉十二水 phosphate, tribasic, dodecahydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,AR 蛋白樣品沉淀法去內(nèi)試劑盒20
無水氫二鈉(分子生物學(xué)級(jí)) phosphate, dibasic, anhydrous 質(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學(xué)級(jí) 蛋白樣品沉淀法去內(nèi)試劑盒20
菲啰嗪,菲洛嗪 Ferrozine 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR 蛋白樣品多粘菌素層析法去內(nèi)試劑盒20
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。