產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3446 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
彎曲桿菌PCR檢測(cè)試劑盒說明書 | Campylobacter spp.PCR | BKP3446 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:彎曲桿菌PCR檢測(cè)試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
人游離睪(F-TESTO)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 Human F-TESTO (Free Testosterone) ELISA Kit 3-(5-(2-Aminopropyl)-7-cyanoindolin-1-yl)propyl benzoate (2R,3R)-2,3-dihydroxysuccinate 239463-85-5 中文名: 分子式:C26H31N3O8
人優(yōu)球蛋白(EL)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 Human EL (EuglobulinLysis) ELISA Kit 3,3-Dimethylacrylic acid 中文名:千里光酸 分子式:C5H8O2 度:98.0%
人隱花色素1(CRY1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 Human CRY1 (Cryptochrome 1) ELISA Kit 3,3'-Sulfonyldianiline 599-61-1 中文名:3,3'-二氨基二苯砜 分子式:C12H12N2O2S
人抑絲蛋白1(PFN1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 Human PFN1 (Profilin 1) ELISA Kit 2-Cyano-N-[4-(Trifluoromethyl)Phenyl]Acetamide 中文名: 分子式:C10H7F3N2O
人乙酰肝素蛋白多糖(HSPG)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 Human HSPG (Heparan Sulfate Proteoglycan) ELISA Kit 3,4-O-Isopropylidene shikimic acid 183075-03-8 中文名: 分子式:C10H14O5
N-Benzylmaleimide 1631-26-1 中文名:N-芐基馬來 分子式:C11H9NO2 水質(zhì)檢測(cè)儀、比色計(jì)專用試劑 Water quality detector, colorimeic reage
Benzyl nicotinate 94-44-0 中文名:煙酸芐酯 分子式:C13H11NO2 便攜式臭氧比色計(jì) Poable ozone colorimeic meter
(R)-(+)-1,1'-Bi-2-naphthol 18531-94-7 中文名:(R)-(+)-1,1'-聯(lián)-2-萘酚 分子式:C20H14O2 便攜式余/總比色計(jì) Poable / total colorimeter
5-Benzyl L-glutamate 1676-73-9 中文名:L-谷氨酸5-芐酯 分子式:C12H15NO4 便攜式亞鹽比色計(jì) Poable niite colorimeic meter
1-Benzylimidazole 4238-71-5 中文名:1-芐基咪唑 分子式:C10H10N2 水質(zhì)讀卡儀器 Water quality reading card insume
彎曲桿菌PCR檢測(cè)試劑盒說明書3-O-β-D-葡萄糖( 1→4)-[ a -L-鼠李糖(1→2)]- a-L-阿拉伯糖 常春藤配基- 28-O-鼠李糖(1→4)葡萄糖(1→6)葡萄糖苷 V 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠組織蛋白去乙?;?/span>(HD)ELISA檢測(cè)試劑盒RatHistoneDeacetylase,HDELISAKit 96T/48T
D-果糖-6-二鈉鹽 D-Fructose-6-phosphate di salt 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 人補(bǔ)體7(C7)試劑盒 Human Compleme 7 ELISA Kit
白頭翁皂苷B Pulchinenoside B 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Ratansforminggrowthfactorα,TGF-αELISAKit大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α(TGF-α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
3-O-β-D-葡萄糖( 1→4)-[ a -L-鼠李糖(1→2)]- a-L-阿拉伯糖 23-羥基羽扇豆20(29)-烯-28–酸;白頭翁皂苷D V 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 MAPK蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒25
羅漢果皂苷Iva Mogroside IVa 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 PorcineDexamethasone,DexELISA試劑盒豬地塞米松(Dex)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
異羅漢果皂苷 V isomogroside V 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠環(huán)孢素A(CsA)ELISA 試劑盒
鹽酸青藤堿 Sinomenine HCl 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Rat phosphorylated exacellular signal regulated kinase (pERK) ELISA Kit 大鼠0酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)ELISA試劑盒
鹽酸青藤堿(標(biāo)準(zhǔn)品) Sinomenine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 humanprolactin,PRLELISAKit 人催乳素(PRL)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
脫氧核糖核酸鈉(小牛胸腺) DNA.Na 質(zhì)量規(guī)格:進(jìn)分sigmaD1501 Humanai-myelinaibodyIgA,AMAIgAELISA試劑盒人型瓜氨酸波形蛋白抗體(MCV)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
核糖核酸(酵母) RNA 質(zhì)量規(guī)格:>90%,BR 植物同還原酶(aldo-ketoreductase)總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20
側(cè)金盞花醇 GC≥98% 20mg Mouseglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISAKit小鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
D半乳糖 HPLC≥98% 100mg Mouseglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISA試劑盒小鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
D半乳糖醛酸 HPLC≥98% 20mg Mouseglucocoicoidreceptor,GRELISAKit小鼠糖皮質(zhì)類受體(GR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
D甘露糖 HPLC≥98% 100mg Mouseglucocoicoidreceptor,GRELISA試劑盒小鼠糖皮質(zhì)類受體(GR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
D果糖 HPLC≥99% 100mg Mouseglucoprotein130,gp130ELISAKit小鼠糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
D核糖 GC≥98% 100mg MouseGlucose-dependeinsulin-releasingpolypeptide,GIPELISA試劑盒小鼠葡萄糖依賴性釋放多肽(GIP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
D山梨醇 HPLC≥98% 20mg MouseGlycatedhemoglobinA1c,A1cELISA試劑盒小鼠A1c(A1c)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
D生物素 HPLC≥98% 20mg MouseGlycogenphosphorylaseBB,GP-BBELISA試劑盒小鼠糖原0酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
D四氫藥根堿 HPLC≥98% 20mg MouseGlycogenphosphorylaseII,GP-IIELISA試劑盒小鼠糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
D松醇 HPLC≥95% 20mg MouseGlycogenphosphorylaseMM,GP-MMELISA試劑盒小鼠糖原0酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T