產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3453 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
犬腺病毒PCR檢測試劑盒直銷 | Canine Adenovirus (CAV)PCR | BKP3453 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:犬腺病毒PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
人脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)ELISAKit 2-Benzylsuccinic acid 3972-36-9 中文名: 分子式:C11H12O4 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
人脂多糖elisa試劑盒 人脂多糖試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人脂多糖試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人脂多糖試劑盒、人脂多糖elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 2-Benzylacrylic acid 5669-19-2 中文名: 分子式:C10H10O2 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
人脂多糖/內(nèi)(LPS)ELISA試劑盒 2-Benzylsuccinic acid 中文名: 分子式:C11H12O4 度:98.0%
人脂蛋脂酶A2elisa試劑盒 人脂蛋脂酶A2試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人脂蛋脂酶A2試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人脂蛋脂酶A2試劑盒、人脂蛋脂酶A2 elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 2-Benzyl-2-(dimethylamino)-4'-morpholinobutyrophenone 中文名:2-芐基-2-(二甲基氨基)-4'-嗎啉基苯基丁酮 分子式:C23H30N2O2
人脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒 2-Benzoylbenzoic acid 85-52-9 中文名:2-苯甲酰苯甲酸 分子式:C14H10O3 度:98.0%
2-Amino-4-methylbenzothiazole 1477-42-5 中文名:2-氨基-4-甲基苯并噻唑 分子式:C8H8N2S Bite 1kg
2-Amino-6-methylbenzothiazole 2536-91-6 中文名:2-氨基-6-甲基苯并噻唑 分子式:C8H8N2S 四硼酸 5kg
5-Amino-2-naphthalenesulfonic acid 119-79-9 中文名:5-氨基-2-萘磺酸 分子式:C10H9NO3S Borate,Decahydrate 500g
2-Aminophenyl phenyl sulfide 1134-94-7 中文名:2-氨基二苯硫醚 分子式:C12H11NS 肽酶抑制因子3 英文名稱: Human Peptidase Inhibitor 3 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: PI-3
12-Aminolauric acid 693-57-2 中文名:12-氨基十二酸 分子式:C12H25NO2 過氧化物酶體增殖物活化受體γ 英文名稱: Human Peroxisome Proliferators Activated Receptor γ 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: PPARγ
犬腺病毒PCR檢測試劑盒直銷化新斯的明(標(biāo)準(zhǔn)品) Neostigmine bromide 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Humanaimousaibody,HAMAELISA人抗鼠抗體(HAMA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
木蘭脂素 Magnolin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 植物羥賴氨酸(HYL)含量比色法定量檢測試劑盒20
消旋山莨菪堿 Racanisodamine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Humanurinaryfreecoisol,UFCELISAKit人尿游離皮質(zhì)醇(UFC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
磺胺間二甲氧嘧啶鈉 Sulfadimethoxine salt 質(zhì)量規(guī)格:>98% 小鼠黃體生成素(LH)ELISA試劑盒 ,英文名: LH ELISA Kit
磺胺間二甲氧嘧啶鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) Sulfadimethoxine salt 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA檢測試劑盒Ratlipoproteinlipase,LPLELISAKit 96T/48T
毛地黃毒苷配基 Digitoxigenin 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(LC),原裝進(jìn)口 人補(bǔ)體蛋白5(C5)試劑盒 Human Compleme 5,C5 ELISA Kit
柯諾辛堿 Corynoxine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,標(biāo)準(zhǔn)品 RatToll-likereceptor4,TLR4ELISAKit大鼠Toll樣受體4(TLR4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
烏拉地爾(標(biāo)準(zhǔn)品) Urapidil 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 M9培養(yǎng)基500毫升
夫西地酸鈉 Fusidate 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR PorcineCoicosterone,COELISA試劑盒豬皮質(zhì)同/腎上腺同(CO)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
夫西地酸鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) Fusidate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠黃體激素(LH)ELISA試劑盒 ,英文名: LH ELISA Kit
橙黃Ⅰ OrangeⅠ 質(zhì)量規(guī)格:IND 頡氨霉素溶液(Valinomycin)0.1毫摩爾
藍(lán)VF Patent Blue VF 質(zhì)量規(guī)格:Indicator 金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)鑒定16SrDNAPCR擴(kuò)增檢測試劑盒20
酚酞(IND) Phenolphthalein 質(zhì)量規(guī)格:IND 金黃色葡萄球菌腸A(Staphylococcusaureus:eerotoxinA)鑒定16SrDNAPCR擴(kuò)增檢測試劑盒20
化鉀溶液(100g/L) Potassium iodide solution 質(zhì)量規(guī)格:100g/L 金黃色葡萄球菌腸B(Staphylococcusaureus:eerotoxinB)鑒定16SrDNAPCR擴(kuò)增檢測試劑盒20
化鉀溶液(1/60mol/L(0.1N)) Potassium iodide solution 質(zhì)量規(guī)格:1/60mol/L(0.1N) 金黃色葡萄球菌腸C(Staphylococcusaureus:eerotoxinC)鑒定16SrDNAPCR擴(kuò)增檢測試劑盒20
玫紅酸(AR) Rosolic acid 質(zhì)量規(guī)格:AR 金黃色葡萄球菌腸D(Staphylococcusaureus:eerotoxinD)鑒定16SrDNAPCR擴(kuò)增檢測試劑盒20
玫紅酸(指示劑級) Rosolic acid 質(zhì)量規(guī)格:指示劑級 金黃色葡萄球菌腸E(Staphylococcusaureus:eerotoxinE)鑒定16SrDNAPCR擴(kuò)增檢測試劑盒20
草酸鈉容量分析用溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) oxalate solution for volumetric analysis 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.96% 金黃色葡萄球菌腸G(Staphylococcusaureus:eerotoxinG)鑒定16SrDNAPCR擴(kuò)增檢測試劑盒20
百里香酚藍(lán)(IND) Thymolblue 質(zhì)量規(guī)格:IND 經(jīng)典水相封片液10毫升
百里香酚藍(lán)(ACS reagent,95 %) Thymolblue 質(zhì)量規(guī)格:ACS reagent,95 % 精氨酸(ARG)氧化高效液相色譜(HPLC)分析試劑盒20
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。