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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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毒PCR檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
  • 貨號(hào):BK-P63728
  • 價(jià)格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-06
  • 更新日期: 2024-11-25
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
品牌 帛科
貨號(hào) BK-P63728
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號(hào)
是否進(jìn)口

本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

產(chǎn)品名稱(chēng)

規(guī)格

貨號(hào)

PCR檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)

50T

BK-P63728

實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix
2mM 
4 μl     
引物110pM 
2 μl     
引物210pM 
2 μl     Taq
酶 (2U/μl 
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl 
1 μl     
ddH2O 50 μl 

PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,1530℃孵育23分鐘。4℃12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA
沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530℃孵育10分鐘后,于4℃12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA
清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA
干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1
、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2
、血液樣品:用無(wú)菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無(wú)菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3
、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4
、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1.
注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2.
標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,54,3,2。
3.
用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專(zhuān)用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.
7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5.
換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用
6.
換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7.
重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。

小鼠泛素蛋白(Ub)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           Dabigatran etexilate benzenesulfonate  中文名:苯磺酸達(dá)比加群酯  分子式:C40H47N7O8S 

小鼠泛素蛋白(Ub)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Bis(3-ethyl-5-methyl-4-maleimidophenyl)methane  105391-33-1  中文名:雙(3-乙基-5-甲基-4-馬來(lái)基苯基)甲烷  分子式:C27H26N2O4 

小鼠二肽基肽酶elisa試劑盒   小鼠二肽基肽酶試劑盒   規(guī)格型號(hào):96T/48T   小鼠二肽基肽酶試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠二肽基肽酶試劑盒、小鼠二肽基肽酶eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個(gè)月。     Colelomycerone A  中文名:  分子式:C17H18O6 

小鼠二肽基肽酶Ⅳ(mouse DPP4)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝     Cynatratoside A  中文名:白薇苷分子式:C28H40O8 

小鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Dabigatran etexilate  211915-06-9  中文名:  分子式:C34H41N7O5  度:98.0%  關(guān)鍵詞:
CD80 Others Mouse 小鼠 CD80 / B7-1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 1,4,7-三甲基-1,4,7-三氮雜環(huán)壬烷(含穩(wěn)定劑碳酸氫鈉)1,4,7-Trimethyl-1,4,7-triazacyclononane (stabilized with NaHCO3)質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)

HGC-27 細(xì)胞(未分化)1,4,8,11-四硫代環(huán)十四烷(>98.0%(GC))1,4,8,11-Tetrathiacyclotetradecane質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)

HuT 78T細(xì)胞細(xì)胞 HuT 78 human T lymphocyte leukemia cell IMDM培養(yǎng)基+20%FBS1,4,7-三硫雜環(huán)壬烷(>98.0%(GC))1,4,7-Trithiacyclononane質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)

VEGFA Protein Human 重組 VEGF121b / VEGF-A 蛋白1,4,8,11-四氮雜環(huán)十四烷-1,4,8,11-四乙酸四乙酯(>97.0%(GC))Tetraethyl 1,4,8,11-Tetraazacyclotetradecane-1,4,8,11-tetraacetate質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)

大鼠雪旺細(xì)胞(RSC)(5×105) 786-O [786-0], 腎透明腺癌細(xì)胞 Human1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二烷-1,4,7-三乙酸三叔丁酯(>93.0%(N))Tri-tert-butyl 1,4,7,10-Tetraazacyclododecane-1,4,7-triacetate質(zhì)量規(guī)格:>93.0%(N)
KIT Others Rat 大鼠 KIT / c-KIT 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 那格列奈?;?span>-β-D-葡萄糖苷酸Nateglinide Acyl-β-D-glucuronide質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口

微內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL4-羥苯基馬拉維若4-Hydroxyphenyl Maraviroc質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口

VERO E6細(xì)胞,猴腎細(xì)胞系 Lec1(卵巢細(xì)胞) 小鼠結(jié)締組織L細(xì)胞株929克隆;L-929 [L929]依澤替米貝酮Ezetimibe Ketone質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口

EFNA5 Protein Canine 重組狗 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)3-O-乙酰依澤替米貝3-O-Acetyl Ezetimibe質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口

VCaP(細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠單核巨噬細(xì)胞細(xì)胞;RAW 264.7 [RAW264.7依澤替米貝羥基β-D-葡萄糖苷酸 Ezetimibe Hydroxy β-D-Glucuronide質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
4-Amino-N-methylbenzamide  6274-22-2  中文名:4-氨基-N-甲基苯甲酰胺  分子式:C8H10N2O  度:98.0%      小鼠銅藍(lán)蛋白(CP/CER)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

4-Aminohippuric acid  61-78-9  中文名:4-氨基馬尿酸  分子式:C9H10N2O3  度:98.0%      小鼠p53(p53)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

4-Aminobutyric acid 1956/12/2  中文名:4-氨基丁酸  分子式:C4H9NO2  度:98.0%  關(guān)鍵詞:    小鼠巨噬細(xì)胞游走抑制因子   英文名稱(chēng):   macrophage migration inhibitory factor   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫(xiě):   MIF

4-Aminobenzophenone  1137-41-3  中文名:4-氨基二苯甲酮  分子式:C13H11NO  度:99.0%  關(guān)鍵詞:    小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白-1   英文名稱(chēng):   Macrophage Inflammatory protein 1   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫(xiě):   MIP-1

4-Aminoantipyrine 1983/7/8  中文名:4-氨基安替比林  分子式:C11H13N3O  度:99.0%  關(guān)鍵詞:    小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白-2   英文名稱(chēng):   Macrophage Inflammatory protein 2   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫(xiě):   MIP-2

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1
RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2
)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱(chēng)和ID號(hào);
3
)客戶盡量不要提供DNARNA樣品。
4
)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCRquantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類(lèi)和非探針類(lèi)兩類(lèi),探針類(lèi)是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類(lèi)是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
毒PCR檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)主要服務(wù):DNARNA*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

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