產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3495 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
弗氏檸檬酸桿菌PCR檢測試劑盒供應(yīng) | Citrobacter freundiiPCR | BKP3495 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:弗氏檸檬酸桿菌PCR檢測試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
生成素 -2(Angiopoietin-2) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Oxiracetam 中文名:奧拉西坦 分子式:C6H10N2O3 度:98.0%
內(nèi)皮抑素 (Endostatin) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Oxandrolone 中文名:氧甲氫龍 分子式:C19H30O3 度:98.0%
內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子 -1(VCAM-1) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Androstanolone acetate 1164-91-6 中文名:雄諾龍醋酸酯 分子式:C21H32O3
內(nèi)皮生長因子受體3 英文名稱: vascuiar endothelial growth factor receptor 3 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: VEGF-R3 Otophylloside T 中文名: 分子式:C48H70O18
內(nèi)皮生長因子受體2 英文名稱: vascuiar endothelial growth factor receptor 2 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: VEGF-R2 Otophylloside T 中文名: 分子式:C48H70O18 度:98.0%
6β-Hydroxystigmast-4-en-3-one 中文名:6β-羥基豆甾-4-烯-3-酮 分子式:C29H48O2 乙酰L-肉堿鹽酸鹽 100g
6-O-Methylcerevisterol 中文名: 分子式:C29H48O3 Acetyl-L-carnitinehydrochlorid
6-O-Feruloylglucose 中文名:6-O-阿魏酰葡萄糖 分子式:C16H20O9 橙 1g
6-O-(p-Hydroxybenzoyl)glucose 中文名:6-O-對羥基苯甲酰葡萄糖 分子式:C13H16O8 AcridineOrange,hemi(zincchloride)salt 10g
6-Hydroxystigmasta-4,22-dien-3-one 中文名: 分子式:C29H46O2 乙肟 500ml
弗氏檸檬酸桿菌PCR檢測試劑盒供應(yīng)N甲基野靛堿 HPLC≥98% 20mg 10%蛋白電泳分離預(yù)制膠溶液500毫升
N去甲基荷葉堿 HPLC≥98% 20mg MouseCalcitonin,CTELISA試劑盒小鼠降鈣素(CT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
OXi HPLC≥98% 20mg 小鼠血小板激活因子乙酰水解酶2(PAFAH2)ELISA試劑盒 ,英文名: PAFAH2 ELISA Kit
PinocembrinO(''galloyl'',''(S)hexahydroxydiphenoyl)βDglucose HPLC≥98% 20mg 兔子基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA檢測試劑盒rabbitmaixmetalloproteinase9,MMP-9ELISAKit 96T/48T
RTA HPLC≥98% 10mg 犬白介素2(IL-2)試劑盒 Canine Ierleukin 2,IL-2 ELISA Kit
S HPLC≥98% 20mg 英文名稱HumanAquaporin4ELISAKit人水通道蛋白4(AQP4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
SN HPLC≥98% 20mg 大鼠PGES基因甲基化檢測試劑盒20
Tafluposide HPLC≥98% 20mg Ratlipolysaccharidebindingprotein,LBPELISA試劑盒大鼠脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Terameprocol HPLC≥98% 20mg 小鼠血小板激活因子(PAF)ELISA試劑盒 ,英文名: PAF ELISA Kit
Tesetaxel HPLC≥98% 20mg 兔子基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA檢測試劑盒rabbittissueinhibitorsofmetalloproteinase1,TIMP-1ELISAKit 96T/48T
香紫蘇醇 GC≥98% 20mg HumanPerforin/Pore-formingprotein,PF/PFPELISAKit 人穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
香紫蘇二醇 GC≥98% 20mg HumanPhosphoglucomase,PGMELISAKit 人0酸葡萄糖變位酶(PGM)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
香紫蘇內(nèi)酯 GC≥98% 20mg HumanPhospholipaseC,PLCELISAKit 人0酯酶C(PLC)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
消旋山莨菪堿 HPLC≥98% 20mg HumanPhosphotylinosital3kinase,PI3KELISAKit 人0酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
小白菊內(nèi)酯 HPLC≥98% 20mg Humanplasmin/fibrinolysin,PL/FbnELISAKit 人纖溶酶/纖維蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
小檗胺 HPLC≥98% 20mg HumanplateletmembraneglycoproteinⅣ,GP-ⅣELISAKit 人血小板膜糖蛋白Ⅳ(GP-Ⅳ)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
小檗紅堿 HPLC≥98% 20mg HumanpoiculinELISAKit 人膜橋蛋白(poiculin)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
小檗紅堿硫酸酯 HPLC≥98% 20mg HumanPolymorphonuclearElastase,PMNElastaseELISAKit 人多形核白細(xì)胞彈性蛋白酶(PMNElastase)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
小檗堿 HPLC≥98% 20mg Humanprealbumin,PAELISAKit 人前白蛋白(PA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
小豆蔻明 HPLC≥98% 20mg humanprolactin,PRLELISAKit 人催乳素(PRL)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝