產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3508 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
溶血梭狀芽孢桿菌PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格 | Clostridium haemolyticumPCR | BKP3508 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:溶血梭狀芽孢桿菌PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
酸性成纖維生長(zhǎng)因子 英文名稱: acid fibroblast growth factor 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): a-FGF 4,4'-Bis(diethylamino)benzophenone 90-93-7 中文名:四乙基米氏酮 分子式:C21H28N2O 度:98.0%
酸性0酸酶(ACP)檢測(cè) Prostate acid enzyme (PACP) detection Polypodine B 18069-14-2 中文名:水龍骨甾酮B 分子式:C27H44O8 度:97.5% 關(guān)鍵詞: 昆蟲(chóng)蛻皮激素活性; 歐亞水龍骨; 蛻化類(lèi)固醇; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)
酸性0酸酶(ACP)測(cè)定試劑盒(微板法) Repaglinide ethyl ester 中文名: 分子式:C29H40N2O4
酸性0酸酶(ACP)測(cè)定試劑盒(微板法) Repaglinide 中文名:瑞格列奈 分子式:Repaglinide
素 英文名稱: Human Renin 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): RN 4,4'-Bis(5-methyl-2-benzoxazolyl)stilbene 2397-00-4 中文名:4,4'-雙(5-甲基-2-苯并惡唑基)芪 分子式:C30H22N2O2 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
Makisterone A 20,22-monoacetonide 中文名: 分子式:C31H50O7 度:% 兔素(Renin)ELISA試劑盒
Glaucogenin C mono-D-thevetoside 中文名: 分子式:C28H40O9 度:98.0% 兔神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)ELISA試劑盒
17α-Estradiol 中文名:17α-雌二醇 分子式:C18H24O2 度:99.0% 兔色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒
Stauntosaponin A 中文名: 分子式:C28H38O7 度:97.0% 兔熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒
Ergosta-7,22-dien-3-one 中文名:麥角甾-7,22-二烯-3-酮 分子式:C28H44O 度:95.0% 兔素(Renin)ELISAKit
溶血梭狀芽孢桿菌PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格乳清酸 Orotic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98%(T),BR 大鼠γ氨基(GABA)ELISA檢測(cè)試劑盒RatGamma-aminobyricacid,GABAELISAKit 96T/48T
氟尼酸(標(biāo)準(zhǔn)品) Niflumic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 人成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子6(FGF6)試劑盒 Human FGF6 ELISA kit
木聚糖 XYLAN 質(zhì)量規(guī)格:>95%,來(lái)源于玉米芯,溶于水 RatSomalcellderivedfactor1a,SDF-1aELISAKit大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
阿特拉津,莠去津 Atrazine 質(zhì)量規(guī)格:>97% ISCOVE’SMDM培養(yǎng)基1/10升(片劑)
丁苯羥酸 Bufexamac 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR PlaGibberellicAcid,GAELISA試劑盒植物赤霉素(GA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
3-甘油酸激酶 3-Phosphoglyceric Phosphokinase 質(zhì)量規(guī)格:1000u/mg,Sigma分裝 小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1α(SDF-1α/SDF1A)ELISA試劑盒 ,英文名: SDF-1α/SDF1A ELISA Kit
1,5-二-D-核酮糖/1,5二核酮糖 d-ribulose 1,5-diphosphate/RuDP 質(zhì)量規(guī)格:90.0%,Sigma 大鼠乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratacetylcholinereceptoraibody,AChRabELISAKit 96T/48T
酸性蛋白酶;蛋白酶來(lái)自佐氏曲霉 Acidic Protease from Aspergillus 質(zhì)量規(guī)格:BR,50u/mg 人成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子4(FGF4)試劑盒 Human FGF4 ELISA kit
撲草凈 Prometryn 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR RatSomalcellderivedfactor1β,SDF-1βELISAKit大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
蘿卜硫素;萊菔硫烷(標(biāo)準(zhǔn)品) Sulforaphane 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,標(biāo)準(zhǔn)品 JM109電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)菌5X100微升
地達(dá)諾辛;去羥肌苷 Dideoxyinosine;Didanosine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 大鼠前體蛋白(TpP)試劑盒 Rat thrombus precursor protein,TpP ELISA Kit
淫羊藿苷I Icariin I; Icariside I 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠素A2(TXA2)試劑盒 Rat Thromboxane A2,TXA2 ELISA Kit
寶藿苷II;大花淫羊藿苷A;意卡瑞苷A(標(biāo)準(zhǔn)品) Baohuoside II 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥97%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠素B2(TXB2)ELISA檢測(cè)試劑盒RatThromboxaneB2,TXB2ELISAKit 96T/48T
槐屬苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Sophoricoside 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠素B2(TXB2)試劑盒 Rat Thromboxane B2,TXB2 ELISA Kit
槐屬苷 Sophoricoside 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,BR 大鼠素合成酶(TXAS)試劑盒 Rat thromboxane syhase,TXAS ELISA Kit
甲基麥冬二氫高異黃酮A,甲基麥冬黃烷酮A Methylophiopogonanone A 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠調(diào)節(jié)蛋白(TM)試劑盒 Rat thrombomodulin,TM ELISA Kit
甲基麥冬黃烷酮B Methylophiopogonanone B 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠血纖蛋白原(Fbg)ELISA檢測(cè)試劑盒RatFibrinogen,FbgELISAKit 96T/48T
7,2'-二羥基-3′,4′-二甲氧基異黃烷 7,2-Dihydroxy-3,4-Dimethoxyisoflavan 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠血纖蛋白原(Fbg)試劑盒 Rat Fibrinogen,Fbg ELISA Kit
6aR,11aR)3-羥基-9,10-二甲氧基紫檀烷 3-Hydroxy-9,10-Dimethoxypterocarpan 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)試劑盒 Rat Fibrinogen Degradation Product,FDP ELISA Kit
千層紙素A-7-0-β-D-葡萄糖醛酸苷 Oroxyloside 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠血小板反應(yīng)蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratthrombospondin1,TSP-1ELISAKit 96T/48T
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。