產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3429 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
豬布魯氏桿菌PCR檢測試劑盒直銷 | Brucella suisPCR | BKP3429 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:豬布魯氏桿菌PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
人抗原(CCA)ELISAKit 3-(Boc-Amino) 309956-78-3 中文名: 分子式:C10H20N2O2
人堿性成纖維細(xì)胞生長因子9(bFGF-9)ELISAKit 2-Cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)quinoline-3-carboxaldehyde 中文名: 分子式:C19H14FNO 度:98.0%
人堿性成纖維細(xì)胞生長因子6(bFGF-6)ELISAKit 2-Cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)quinoline-3-carboxaldehyde 中文名: 分子式:C19H14FNO
人基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISAkit 2-Methylanthraquinone 84-54-8 中文名:2-甲基蒽醌 分子式:C15H10O2
人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISAKit 中文名: 分子式:C29H39N5O8 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
Benzimidazole 51-17-2 中文名:苯并咪唑 分子式:C7H6N2 骨橋蛋白 ( Osteopoin) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 德國 IBL
Benzoin oxime 441-38-3 中文名:安息香肟 分子式:C14H13NO2 OX-40 ELISA Kit 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 奧地利 Bender
Benzopinacol 464-72-2 中文名:苯頻哪醇 分子式:C26H22O2 Human sP53 Kit 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 法國 Diaclone
5-Benzimidazolecarboxylic acid 15788-16-6 中文名:5-苯并咪唑甲酸 分子式:C8H6N2O2 神經(jīng)營養(yǎng)素 3(-3) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
m-Anisic acid 586-38-9 中文名:間茴香酸 分子式:C8H8O3 神經(jīng)營養(yǎng)素 4(-4) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
豬布魯氏桿菌PCR檢測試劑盒直銷rU亞磷酰胺單體 rU Phosphoramidite 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 英文名稱RatVitaminB6ELISAKit大鼠維生素B6(VB6)規(guī)格:96T/48T
Bz-rA亞磷酰胺單體 Bz-rA Phosphoramidite 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 烘賠食品乙酸激酶法定量檢測試劑盒20
i-bu-rG亞磷酰胺單體 i-bu-rG Phosphoramidite 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR ELISAKitHb-AGE人血紅蛋白晚期糖基化終末產(chǎn)物規(guī)格:48T/96T
PF299804(EGFR抑制劑) Dacomitinib 質(zhì)量規(guī)格:>99%,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 小鼠黑色素細(xì)胞抗體(MC Ab)ELISA試劑盒 ,英文名: MC Ab ELISA Kit
Ac-rC亞磷酰胺單體 Ac-rC Phosphoramidite 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 大鼠黑色素細(xì)胞抗體(MCAb)ELISA檢測試劑盒Ratmelanocyteaibody,MCAbELISAKit 96T/48T
素(含檸檬酸鹽緩沖液) Tetrodotoxin 質(zhì)量規(guī)格:>98%,進(jìn)分 人波形蛋白(VIM)試劑盒 Human vimein ELISA Kit
素粉 Tetrodotoxin 質(zhì)量規(guī)格:>98%,進(jìn)分 Rati-iodothyronine,T3ELISAKit大鼠三甲狀腺原氨酸(T3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
AC-DC亞磷酰胺單體 Ac-dC Phosphoramidite 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR MHPG高效液相色譜電化學(xué)定量檢測試劑盒20
2,2'-脫水-5-甲基尿苷 2,2'-Anhydro-5-Me-U 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR PorcineEpinephrine/Adrenaline,EPIELISA試劑盒豬(EPI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
7-DEAZA-7--2'-脫氧鳥苷 7-Deaza-7-I-2’-dG 質(zhì)量規(guī)格:>97% 小鼠黑色素細(xì)胞抗體(MC Ab)ELISA 試劑盒
表兒茶素沒食子酸酯 ECG 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,BR 小鼠彈性蛋白微原纖維界面因子2(EMILIN2)ELISA試劑盒 ,英文名: EMILIN2 ELISA Kit
萊苞迪甙A Rebaudioside A 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠蛋白C(PROC)ELISA試劑盒 ,英文名: PROC ELISA Kit
萊苞迪甙A(標(biāo)準(zhǔn)品) Rebaudioside A 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠蛋白C(Protein C)ELISA試劑盒 ,英文名: Protein C ELISA Kit
環(huán)亮氨酸甲酯鹽酸鹽 Cycloleucine Methyl Ester.HCl 質(zhì)量規(guī)格:>98% 小鼠蛋白p53(TP53)ELISA試劑盒 ,英文名: TP53 ELISA Kit
水溶性四氮唑-3 GLT003 質(zhì)量規(guī)格:BR 小鼠蛋白Z(PROZ)ELISA試劑盒 ,英文名: PROZ ELISA Kit
三新戊醇 Trisbromoneopentyl Alcohol 質(zhì)量規(guī)格:>97% 小鼠蛋白二硫化物異構(gòu)酶A2(PDIA2)ELISA試劑盒 ,英文名: PDIA2 ELISA Kit
水溶性四氮唑-1 GLT001 質(zhì)量規(guī)格:BR 小鼠蛋白二硫化物異構(gòu)酶A4(PDIA4)ELISA試劑盒 ,英文名: PDIA4 ELISA Kit
Tricine;三(羥甲基)甲基甘氨酸 Tricine 質(zhì)量規(guī)格:>99% 小鼠蛋白激酶A(PKA)ELISA試劑盒 ,英文名: PKA ELISA Kit
三(羥甲基)甲基甘氨酸(標(biāo)準(zhǔn)品) Tricine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,日本進(jìn)口 小鼠蛋白激酶B(PKB)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
SAR245409 (XL765) SAR245409 (XL-765) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,雙重mTOR/PI3K抑制劑 小鼠蛋白激酶B(PKB)ELISA檢測試劑盒MouseproteinkinaseB,PKBELISAKit 96T/48T
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。