產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3525 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
短古柏線蟲PCR檢測試劑盒直銷 | Cooperia curticeiPCR | BKP3525 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:短古柏線蟲PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
兔白介素17(IL-17)ELISAKit 4-Benzoyloxy-2-azetidinone 28562-58-5 中文名:4-苯甲酰氧基-2-氮雜環(huán)丁酮 分子式:C10H9NO3 度:98.0%
兔白介素-12(rabbit IL-12) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 4-Benzyl N-carbobenzoxy-L-aspartate 中文名:N-芐氧羰基-L-天冬氨酸-4-芐脂 分子式:C19H19NO6
兔白介素-10(rabbit IL-10) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 4-Benzyl N-carbobenzoxy-L-aspartate 中文名:N-芐氧羰基-L-天冬氨酸-4-芐脂 分子式:C19H19NO6 度:98.0%
兔白介素1(IL-1)ELISA試劑盒 4-Benzyl N-(tert-butoxycarbonyl)-L-aspartate 中文名:N-(叔丁氧羰基)-L-天冬氨酸-4-芐酯 分子式:C16H21NO6 度:98.0%
兔阿霉素(ADR)ELISA試劑盒 4-Benzyl N-(tert-butoxycarbonyl)-L-aspartate 中文名:N-(叔丁氧羰基)-L-天冬氨酸-4-芐酯 分子式:C16H21NO6
Deoxylapachol 中文名: 分子式:C15H14O2 度:97.0% 兔子Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISAKit
9-Hydroxy-α-lapachone 中文名: 分子式:C15H14O4 度:96.0% 兔主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHCⅡ/RLAⅡ)ELISA試劑盒
Dehydro-α-lapachone 中文名: 分子式:C15H12O3 度:97.5% 兔主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/RLAⅠ)ELISA試劑盒
α-Lapachone 中文名: 分子式:C15H14O3 度:98.0% 兔壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒
9-Methoxy-α-lapachone 中文名: 分子式:C16H16O4 度:% 兔脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒
短古柏線蟲PCR檢測試劑盒直銷3-吲哚乙酸(IAA) 3-Indoleacetic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR ELISAKitIA-2A人胰島細(xì)胞抗原2抗體/蛋白酪氨酸0酸酶抗體規(guī)格:48T/96T
葉酸(標(biāo)準(zhǔn)品) Folic acid 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)ELISA試劑盒 ,英文名: PTHrP ELISA Kit
葉酸 Folic acid 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR 大鼠原(PI)ELISA檢測試劑盒RatProinsulin,PIELISAKit 96T/48T
托法替尼;CP-690550 Tofacitinib(CP-690550,Tasocitinib) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,JAK3抑制劑 人垂草扁桃酸(VMA)試劑盒 Human VMA ELISA Kit
1-萘乙酸(NAA);α-萘乙酸 1-Naphthylacetic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98%,Suitable for plant cell culture RatsolubleToll-likereceptor2,sTLR-2ELISAKit大鼠可溶性Toll樣受體2(sTLR2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
變色酸2R Chromotrope 2R 質(zhì)量規(guī)格:AR INSULI-ALPHA蛋白共沉淀分析試劑盒5
磷鉬酸 Phosphomolybdic acid hydrate 質(zhì)量規(guī)格:BC NudeMouseProteinPhosphatase,PPELISA試劑盒裸鼠蛋酸酶(PP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
甘氨酸 Glycine 質(zhì)量規(guī)格:>99%,美侖 小鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)ELISA 試劑盒
甘氨酸(Sigma) Glycine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,sigma分裝 Rat soluble cell differeiation aigen 40 Ligand (sCD40L) ELISA Kit 大鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原40配體(sCD40L)ELISA試劑盒
L-甘氨酸(標(biāo)準(zhǔn)品) L-Glycine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 HumanSurfactaProteinA,SP-AELISAKit 人表面活性蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
對乙烯基愈瘡木酚 GC≥98% 20mg Mousethyroidstimulatinghormonereceptoraidoby,AbELISA試劑盒小鼠抗促甲狀腺素受體抗體(Ab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
磺胺對甲氧嘧啶 HPLC≥98% 100mg Mousethyroopin-releasinghormone,HELISA試劑盒小鼠促甲狀腺素釋放激素(H)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
萘酚磺酸鉀 HPLC≥98% 20mg Mousethyroxine,T4ELISA試劑盒小鼠甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
磺胺異惡唑 HPLC≥98% 250mg MouseThyroxineaibody,TAbELISA試劑盒小鼠甲狀腺素抗體(TAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鹽酸環(huán)丙沙星 HPLC≥98% 20mg MouseTissuefactorpathwayinhibitor,TFPIELISA試劑盒小鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
高紫檀素 HPLC≥98% 5mg MouseToll-likereceptor9,TLR-9ELISA試劑盒小鼠Toll樣受體9(TLR-9/CD289)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
杠柳毒苷元 HPLC≥98% 20mg Mousetoxicshocksyndrometoxin,TSST-1ELISA試劑盒小鼠毒性休克綜合征1(TSST-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
甘油三酯 GC≥98% 20mg MouseTumornecrosisfactorsolublereceptorⅠ,TNFsR-ⅠELISA試劑盒小鼠可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
α酮戊二酸 HPLC≥98% 20mg MouseTumornecrosisfactorsolublereceptorⅡ,TNFsR-ⅡELISA試劑盒小鼠可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
D熒光素鉀鹽 98% 20mg MouseTumornecrosisfactorα,TNF-αELISA試劑盒小鼠α(TNF-α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。