產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3531 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
牛棒桿菌PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng) | Corynebacterium bovisPCR | BKP3531 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:牛棒桿菌PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
兔兒茶酚胺EAelisa試劑盒 兔兒茶酚胺EA試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔兒茶酚胺EA試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔兒茶酚胺EA試劑盒、兔兒茶酚胺EAelisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 4-Chlorodehydromethyltestosterone 2446-23-3 中文名:4-氯去氫甲基睪酮 分子式:C20H27ClO2 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
兔兒茶酚胺(CA)ELISA試劑盒 4-Difluoromethoxy-3-hydroxybenzaldehyde 中文名: 分子式:C8H6F2O3 度:98.0%
兔兒茶酚胺(CA)ELISAKit 4-Chloro-6-iodoquinazoline 98556-31-1 中文名: 分子式:C8H4ClIN2 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
兔蛋白激酶A 英文名稱: Rabbit Protein Kinase A 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): PKA 4-Hydroxysapriparaquinone 中文名: 分子式:C20H26O4
兔單核細(xì)胞趨化蛋白-1(rabbit MCP-1) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 4-Methylamino-3-nitrobenzoic acid 41263-74-5 中文名: 分子式:C8H8N2O4
Torososide A 中文名: 分子式:C38H32O15 度:% 兔子TH糖蛋白(THP)ELISA試劑盒
Floribundone 1 中文名: 分子式:C32H22O10 度:99.0% 兔子S100蛋白(S-100)ELISA試劑盒
Rubianthraquinone 中文名: 分子式:C16H12O5 度:98.0% 兔子S100B蛋白(S-100B)ELISA試劑盒
6-Hydroxyrubiadin 中文名:6-羥基甲基異茜草素 分子式:C15H10O5 度:97.5% 兔子α2抗纖溶酶elisa試劑盒 兔子α2抗纖溶酶試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子α2抗纖溶酶試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子α2抗纖溶酶試劑盒、兔子α2抗纖溶酶elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
1,5,15-Tri-O-methylmorindol 中文名: 分子式:C18H16O6 度:98.0% 兔增殖細(xì)胞核抗原elisa試劑盒 兔增殖細(xì)胞核抗原試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔增殖細(xì)胞核抗原試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔增殖細(xì)胞核抗原試劑盒、兔增殖細(xì)胞核抗原elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
牛棒桿菌PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)苦玄參苷IV(標(biāo)準(zhǔn)品) Picfeltarraenin IV 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 ELISAKitPP人胰多肽規(guī)格:48T/96T
瓜子金皂苷XXXI(對(duì)照品) Polygalasaponin XXXI 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠甲狀腺素抗體(TAb)ELISA試劑盒 ,英文名: TAb ELISA Kit
俾斯麥棕R Bismarck Brown R 質(zhì)量規(guī)格:BS 大鼠誘導(dǎo)型合成酶(iNOS)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratinducibleniicoxidesyhase,iNOSELISAKIT 96T/48T
俾斯麥棕Y Bismarck Brown Y 質(zhì)量規(guī)格:BS 人雌激素(E)試劑盒 Human esogen,E ELISA Kit
偶氮氯膦I Chlorophosphonazo Ⅰ 質(zhì)量規(guī)格:AR,顯色劑 RatSolubleprotein-100,S-100ELISAKit大鼠S100蛋白(S-100)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
香豆素(標(biāo)準(zhǔn)品) Coumarin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 IKB-α(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克
茜素 Alizarin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Nasoniaviipennisvitellogenin,VtgELISA試劑盒蝶蛹金小蜂卵黃蛋白原(vtg)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
姜黃素 Curcumin 質(zhì)量規(guī)格:姜黃素類化合物>95%,姜黃素>75%,去甲氧基姜黃素<20% 小鼠甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒 ,英文名: T4 ELISA Kit
姜黃素(標(biāo)準(zhǔn)品) Curcumin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠合成酶(NOS)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratniicoxidesyhase,NOSELISAKit 96T/48T
姜黃素(高) Curcumin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥97%,BR 人雌二醇受體(ER)試劑盒 Human Esadiol receptor,ER ELISA Kit
二苯并-15-冠5-醚(>95.0%(GC)) Dibenzo-15-crown 5-Ether 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 小鼠組蛋白去乙?;?/span>4(HDAC4)ELISA試劑盒 ,英文名: HDAC4 ELISA Kit
二苯并-21-冠7-醚(>96.0%(GC)) Dibenzo-21-crown 7-Ether 質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(GC) 小鼠組蛋白脫乙酰基酶1(HDAC1)ELISA試劑盒 ,英文名: HDAC1 ELISA Kit
4'-甲酰苯并-15-冠-5-醚(>98.0%(GC)) 4'-Formylbenzo-15-crown 5-Ether 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 小鼠組蛋白脫乙酰基酶2(HDAC2)ELISA試劑盒 ,英文名: HDAC2 ELISA Kit
4'-甲酰苯并-18-冠-6-醚(>98.0%(GC)) 4'-Formylbenzo-18-crown 6-Ether 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 小鼠組蛋白脫乙酰基酶4(HDAC4)ELISA試劑盒 ,英文名: HDAC4 ELISA Kit
4,7,13,21,24-六氧雜-1,10-二氮雜雙環(huán)[8,8,8]-二十六烷(>98.0%(GC)(T)) 4,7,13,16,21,24-Hexaoxa-1,10-diazabicyclo[8.8.8]hexacosane 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T) 小鼠組蛋白脫乙酰酶(HDAC1)ELISA試劑盒 ,英文名: HDAC1 ELISA Kit
2-(羥甲基)-12-冠4-醚(>95.0%(GC)) 2-(Hydroxymethyl)-12-crown 4-Ether 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 小鼠組酸豐富糖蛋白(HRG)ELISA試劑盒 ,英文名: HRG ELISA Kit
2-(羥甲基)-15-冠5-醚(>96.0%(GC)) 2-(Hydroxymethyl)-15-crown 5-Ether 質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(GC) 小鼠組織蛋白酶A(CTSA)ELISA試劑盒 ,英文名: CTSA ELISA Kit
2-(羥甲基)-18-冠6-醚(>93.0%(GC)) 2-(Hydroxymethyl)-18-crown 6-Ether 質(zhì)量規(guī)格:>93.0%(GC) 小鼠組織蛋白酶B(CTSB)ELISA試劑盒 ,英文名: CTSB ELISA Kit
1,4,8,11-四氮雜環(huán)十四烷(>98.0%(T)) 1,4,8,11-Tetraazacyclotetradecane 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T) 小鼠組織蛋白酶D(CTSD)ELISA試劑盒 ,英文名: CTSD ELISA Kit
1,4,7-三氮雜環(huán)壬烷三鹽酸鹽(>98.0%(N)(T)) 1,4,7-Triazacyclononane Trihydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(N)(T) 小鼠組織蛋白酶G(CTSG)ELISA試劑盒 ,英文名: CTSG ELISA Kit
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。