產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3564 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
質(zhì)型多角體病毒PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格 | Cytoplasmic polyhedrosis virus(CPV)PCR | BKP3564 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:質(zhì)型多角體病毒PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
兔相關(guān)蛋白A(rabbit PAPP-A) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 5-Formamide-1-(2-formyloxyethl)pyrazole 中文名: 分子式:C7H9N3O3
兔纖維蛋白原降解產(chǎn)物(rabbit FDP) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 5-Acetyl-3-chloro-10,11-dihydro-5H-dibenz[b,f]azepine 25961-11-9 中文名: 分子式:C16H14ClNO
兔纖溶抑制因子/凝血酶激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISAKit 6-Benzyloxypurine 中文名:6-芐氧基嘌呤 分子式:C12H10N4O
兔纖溶酶原激活劑抑制物-1 (rabbit PAI-1) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 5-Formamide-1-(2-formyloxyethl)pyrazole 中文名: 分子式:C7H9N3O3 度:98.0%
兔纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物elisa試劑盒 兔纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物試劑盒、兔纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 5-Benzyl-1H-tetrazole 18489-25-3 中文名:5-芐基-1H-四唑 分子式:C8H8N4O
5-Hydroxymethyl-2-furoic acid 中文名:5-羥甲基-2-糠酸 分子式:C6H6O4 度:% 兔子凝血酶受體elisa試劑盒 兔子凝血酶受體試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子凝血酶受體試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子凝血酶受體試劑盒、兔子凝血酶受體elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
(2Z,6Z,10E,14E,18E)-Farnesylfarnesol 中文名: 分子式:C30H50O 度:96.0% 兔子內(nèi)皮抑素elisa試劑盒 兔子內(nèi)皮抑素試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子內(nèi)皮抑素試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子內(nèi)皮抑素試劑盒、兔子內(nèi)皮抑素elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Solanesol 中文名:茄尼醇 分子式:C45H74O 度:% 兔子甲狀腺素elisa試劑盒 兔子甲狀腺素試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子甲狀腺素試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子甲狀腺素試劑盒、兔子甲狀腺素elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Methyl (9Z,11E)-13-hydroxyoctadeca-9,11-dienoate 中文名: 分子式:C19H34O3 度:% 兔子凝血因子Ⅱelisa試劑盒 兔子凝血因子Ⅱ試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子凝血因子Ⅱ試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子凝血因子Ⅱ試劑盒、兔子凝血因子Ⅱ elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
1,6,2',6'-O-Tetraacetyl-3-O-trans-p-coumaroylsucrose 中文名: 分子式:C29H36O17 度:95.0% 兔子凝血酶受體elisa試劑盒 兔子凝血酶受體試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子凝血酶受體試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子凝血酶受體試劑盒、兔子凝血酶受體elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
質(zhì)型多角體病毒PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格O-芐基-L-酪氨酸芐酯鹽酸鹽 O-Benzyl-L-tyrosine benzyl ester hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:0.985 ELISAKitHBVpreS2Ab人病毒前S2抗體規(guī)格:48T/96T
O-芐基-L-酪氨酸甲酯鹽酸鹽 O-Benzyl-L-tyrosine methyl ester hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:0.985 小鼠精胺氧化酶(SMOX)ELISA試劑盒 ,英文名: SMOX ELISA Kit
L-正纈氨酸叔丁酯鹽酸鹽 L-Valine t-butyl ester hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:0.99 人α2纖溶酶抑制物(α2-PI)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanα2-plasmininhititor,α2-PIELISAKit 96T/48T
4-硝基-L-苯丙氨酸 4-Nitro-L-phenylalanine monohydrate 質(zhì)量規(guī)格:0.98 大鼠生長(zhǎng)素(ANG)試劑盒 Rat Angiogenin,ANG ELISA Kit
N-乙酰-DL-丙氨酸 N-Acetyl-DL-Alanine 質(zhì)量規(guī)格:0.98 英文名稱RatFree-T3ELISAKit大鼠游離三甲狀腺原氨酸(Free-T3)規(guī)格:96T/48T
N-乙酰-DL-谷氨酸 Ac-DL-Glu-OH 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 高質(zhì)化聚烯酰胺凝膠粉碎法膠回收試劑盒20
DL-α-氨基己二酸,2-氨基己二酸 DL-a-Aminoadipic acid 質(zhì)量規(guī)格:>97%,混旋 ELISAKitICD人異檸檬酸脫氫酶規(guī)格:48T/96T
DL-半胱氨酸鹽酸鹽,一水 DL-Cysteine·HCl·H2O 質(zhì)量規(guī)格:0.98 小鼠晶狀體蛋白αB(CRYαB)ELISA試劑盒 ,英文名: CRYαB ELISA Kit
DL-胱氨酸鹽酸鹽 DL-Cysteine hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanα-GlucosidaseELISAKit 96T/48T
DL-胱氨酸 DL-Cystine 質(zhì)量規(guī)格:0.98 大鼠內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C(VEGF-C)試劑盒 Rat Vascular Endothelial cell Growth Factor C,VEGF-C ELISA kit
肥牛木素 HPLC≥95% 20mg RatHighdensitylipoprotein,HDLELISAKit大鼠(HDL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
南五味子木脂素L HPLC≥95% 20mg RatHighdensitylipoprotein,HDLELISA試劑盒大鼠(HDL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
五脂酮A HPLC≥95% 20mg RatHighmobilitygroupproteinB1,HMGB-1ELISA試劑盒大鼠高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
五脂酮C HPLC≥95% 20mg RathighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRPELISAKit大鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
五脂酮D HPLC≥95% 20mg RathighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRPELISA試劑盒大鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
南五味子木脂素N HPLC≥95% 20mg RatHistamine,HISELISAKit大鼠組胺(HIS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
異性南五味子丙素; 異南五味子素 C HPLC≥95% 20mg RatHistamine,HISELISA試劑盒大鼠組胺(HIS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
安五酸 HPLC≥95% 20mg RatHistoneDeacetylase,HDELISAKit大鼠組織蛋白去乙?;?/span>(HD)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
O乙酰五味子酯L HPLC≥95% 20mg RatHistoneDeacetylase,HDELISA試劑盒大鼠組織蛋白去乙?;?/span>(HD)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
去甲白屈菜紅堿 HPLC≥95% 20mg Rathiston-H2bELISAKit大鼠組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。