產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3579 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
槍狀肝吸蟲PCR檢測試劑盒供應 | Dicrocoelium dentriticumPCR | BKP3579 |
技術服務內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:槍狀肝吸蟲PCR檢測試劑盒供應使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
兔子S100B蛋白(S-100B)ELISAKit 6-Aminoindole 5318-27-4 中文名:6-氨基吲哚 分子式:C8H8N2 度:98.0%
兔子E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISAKit 6-Aminoindazole 6967-12-0 中文名:6-氨基吲唑 分子式:C7H7N3 度:98.0%
兔子D二聚體(D2D)ELISA試劑盒 6-Amino-4-hydroxy-2-naphthalenesulfonic acid 90-51-7 中文名:6-氨基-4-羥基-2-萘磺酸 分子式:C10H9NO4S 度:98.0%
兔子C反應蛋白(CRP)ELISA試劑盒 6-Amino-4-hydroxy-2-naphthalenesulfonic acid 90-51-7 中文名:6-氨基-4-羥基-2-萘磺酸 分子式:C10H9NO4S
兔子C反應蛋白(CRP)ELISAKit 9,9-Bis(4-amino-3-methylphenyl)fluorene 107934-60-1 中文名:9,9-雙(4-氨基-3-甲苯基)芴 分子式:C27H24N2
Perospirone hydrochloride 中文名:鹽酸哌羅匹隆 分子式:C23H31ClN4O2S 度:98.0% 兔血清總補體(CH50)ELISAKit
中文名:枸櫞酸 分子式:C28H38N6O11S 度:98.0% 兔乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISAKit
Amlexanox 中文名:氨來呫諾 分子式:C16H14N2O4 度:98.0% 兔誘導型合成酶(iNOS)ELISAKit
Losartan 中文名:氯沙坦 分子式:C22H23ClN6O 度:98.0% 兔子孕激素elisa試劑盒 兔子孕激素試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔子孕激素試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔子孕激素試劑盒、兔子孕激素eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
Glyburide 中文名:格列本脲 分子式:C23H28ClN3O5S 度:98.0% 兔子樣生長因子1elisa試劑盒 兔子樣生長因子1試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔子樣生長因子1試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔子樣生長因子1試劑盒、兔子樣生長因子1eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
槍狀肝吸蟲PCR檢測試劑盒供應L-天冬酰胺,無水物(標準品) L-Asparagine Anhydrous 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 MouseTumornecrosisfactorβ,TNF-βELISA試劑盒小鼠β(TNF-β)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
L-天冬素/L-天冬酰胺 L-Asparagine anhydrous 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,無水物 小鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)ELISA試劑盒 ,英文名: α-Fodrin IgG/IgA ELISA Kit
N'-(三苯甲基)-L-天冬酰胺 N'-Trityl-L-asparagine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 大鼠相關血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA檢測試劑盒RatpregnancyassociatedplasmaproteinA,PAPP-AELISAKit 96T/48T
L-天冬氨酸-1-芐酯 L-Aspartic Acid 1-Benzyl Ester 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人帶3蛋白(Band3)試劑盒 Human Band3 protein ELISA kit
L-天門冬氨酸1-甲酯 L-Aspartic acid 1-methyl ester 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Ratprostatespecificaigen,PSAELISAKit大鼠特異性抗原(PSA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
L-天冬氨酸-β-甲酯鹽酸鹽 L-Aspartic acid β-methyl ester hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:0.98 HHV6(HUMANHERPESVIRUS6)病毒標準曲線定量PCR擴增檢測試劑盒2
S-甲基-L-半胱氨酸 S-Methyl-L-cysteine 質(zhì)量規(guī)格:98%,進口分包 MouseTumorSpecificGrowthFacter/tumorsuppliedgroupoffactor,TGSFELISA試劑盒小鼠特異生長因子/相關因子(TGSF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
S-三苯甲基-L-半胱氨酸 S-Trityl-L-cysteine 質(zhì)量規(guī)格:>98% 小鼠抗Smith抗體(Sm)ELISA試劑盒 ,英文名: Sm ELISA Kit
L-谷氨酸1-甲酯 L-Glutamic Acid 1-Methyl Ester 質(zhì)量規(guī)格:0.97 大鼠高遷移率族蛋白1(HMG-1)ELISA檢測試劑盒RatHighmobilitygroupprotein1,HMG-1ELISAKit 96T/48T
L-谷氨酸二乙酯鹽酸鹽 L-Glutamic acid diethyl ester hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:0.97 人大皰性類天皰瘡抗體(BP)試劑盒 Human Bullous Pemphigoid,BP ELISA Kit
富馬酸 HPLC≥98% 20mg DNA產(chǎn)物去鐵化試劑盒20
覆盆子酮 HPLC≥98% 20mg DNA橙(acridineorange)熒光檢測試劑盒50
覆盆子酮葡萄糖苷 HPLC≥98% 20mg DNA定向連接克隆完全試劑盒(包括雙內(nèi)切酶)10
伽升沃 C HPLC≥98% 20mg DNA合成1樣本
伽升沃 D HPLC≥98% 20mg DNA甲基轉移酶(DNMT)總活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒20
甘草查爾酮A HPLC≥98% 20mg DNA甲基轉移酶-1(DNMT-1)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒20
甘草查爾酮B HPLC≥98% 10mg DNA甲基轉移酶-3A(DNMT-3A)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒20
甘草查爾酮C HPLC≥98% 20mg DNA甲基轉移酶-3B(DNMT-3B)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒20
甘草酸(β型) HPLC≥98% 20mg DNA末端平滑補缺同位素([35S]dATP)聚合酶標記試劑盒20
甘草酸十八酯 HPLC≥98% 20mg DNA南方雜交印跡消除試劑盒20
反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。