產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3598 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
細(xì)粒棘球PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書 | Echinococcus granulosusPCR | BKP3598 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
兔子基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)ELISAKit 7-Keto-dehydroepiandrosterone 566-19-8 中文名:7-酮基去氫表雄酮 分子式:C19H26O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
兔子基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 (1S,2S)-1-Amino-2-Indanol 163061-74-3 中文名:(1S,2S)-1-氨基-2-茚醇 分子式:C9H11NO 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
兔子基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)ELISA試劑盒 7-Keto-dehydroepiandrosterone 中文名:7-酮基去氫表雄酮 分子式:C19H26O3
兔子基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)ELISAKit 7-Chloro-1,2,3,4-tetrahydrobenzo[b]azepin-5-one 160129-45-3 中文名: 分子式:C10H10ClNO 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
兔子基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 (1S,2R)-1-Amino-2-indanol 中文名:(1S,2R)-1-氨基-2-茚醇 分子式:C9H11NO 度:98.0%
Nifuroxazide 中文名:硝呋酚 分子式:C12H9N3O5 度:98.0% 豚鼠球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒
Prasugrel 中文名:普拉格雷 分子式:C20H20FNO3S 度:98.0% 豚鼠球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒
Fexofenadine hydrochloride 中文名:鹽酸非索非那定 分子式:C32H40ClNO4 度:98.0% 豚鼠內(nèi)皮素1(ET-1)ELISAKit
Adefovir 中文名:阿德福韋 分子式:C8H12N5O4P 度:98.0% 豚鼠球蛋白E(IgE)ELISAKit
trans-4-Aminocyclohexanol 中文名: 分子式:C6H13NO 度:98.0% 豚鼠球蛋白A(IgA)ELISAKit
細(xì)粒棘球PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書高峰淀粉酶來(lái)源于米曲霉(4000U/g) Taka-Diastase from Aspergillus oryzae 質(zhì)量規(guī)格:BR,4000u/g 大鼠25羥維生素D3(25(OH)D3/25HVD3)ELISA檢測(cè)試劑盒Rat25-DihydroxyvitaminD3,HVD3ELISAKit 96T/48T
高峰淀粉酶來(lái)源于米曲霉(100U/mg ) Taka-Diastase from Aspergillus oryzae 質(zhì)量規(guī)格:BR,100 U/mg 人彈性蛋白酶2,中性粒細(xì)胞(ELA2)試劑盒 Human ELA2 ELISA KIT
甘油醛-3-脫氫酶 Glyceraldehyde-3-phosphate Dehydrogenase 質(zhì)量規(guī)格:BR,75U/MG Ratplasminogenactivatorinhibitor,PAIELISAKit大鼠纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
菠蘿蛋白酶 Bromelain from pineapple stem 質(zhì)量規(guī)格:>500U/MG,BR GST融合蛋白PROTEASE酶切試劑盒10
輔羧酶;羧化輔酶;焦硫胺素 Thiamine pyrophosphate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR MouseThromboxaneB2,TXB2ELISA試劑盒小鼠素B2(TXB2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
吲哚乙酸酯 Indoxyl acetate 質(zhì)量規(guī)格:0.97 小鼠抗小核糖核蛋白/Sm抗體(sNP/Sm)ELISA試劑盒 ,英文名: sNP/Sm ELISA Kit
α-環(huán)糊精 α-Cyclodextrin 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 大鼠透明質(zhì)酸(HA)ELISA檢測(cè)試劑盒RatHyaluronicacid,HAELISAKit 96T/48T
黃嘌呤氧化酶(XOD) Xanthine Oxidase from bovine milk 質(zhì)量規(guī)格:BR,>7U/MG, powder 人彈性蛋白酶(Elastase)試劑盒 Human Elastase ELISA Kit
?;?/span>,L-氨基酰化酶 Acylase from Aspergilus sp. 質(zhì)量規(guī)格:酶活力≥30000u/g Ratplateletactivatingfactor,PAFELISAKit大鼠血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
胰蛋白酶1:250 Trypsin 1:250 fromPorcine pancreas 質(zhì)量規(guī)格:>250U/mg,BR GST融合蛋白THROMBIN酶切試劑盒10(500微克/)
鉻標(biāo)準(zhǔn)溶液(500mg/L,溶劑:水) Chromium solution 質(zhì)量規(guī)格:500mg/L,溶劑:水 牛羥脯氨酸(Hyp)試劑盒 Bovine hydroxyproline,Hyp ELISA Kit
鉻標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/mL,基體:水) Chromium solution 質(zhì)量規(guī)格:100μg/mL,基體:水 牛羥脂酰輔酶A脫氫酶試劑盒 Bovine hydroxyacyl-Coenzyme A dehydrogenase ELISA kit
鈷標(biāo)準(zhǔn)溶液(500mg/L,溶劑:1%鹽酸) Cobalt standard 質(zhì)量規(guī)格:500mg/L,溶劑:1%鹽酸 牛熱休克蛋白70(HSP-70)試劑盒 Bovine Heat Shock Protein 70,HSP-70 ELISA Kit
鈷標(biāo)準(zhǔn)溶液(100(20℃)μg/mL,基體: 1%HNO3) Cobalt standard 質(zhì)量規(guī)格:100(20℃)μg/mL,基體: 1%HNO3 牛熱休克蛋白72(HSP-72)試劑盒 Bovine Heat Shock Protein 72,HSP-72 ELISA Kit
鏑標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml) Dysprosium standard 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml 牛溶菌酶(LZM)試劑盒 Bovine Lysozyme,LZM ELISA Kit
銪標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml) Europium standard 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml 牛肉堿試劑盒 Bovine carnitine ELISA kit
氟離子(F-)標(biāo)準(zhǔn)溶液(500mg/L,溶劑:水) Fluoride standard 質(zhì)量規(guī)格:500mg/L,溶劑:水 牛肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶-Ⅰ(CPT-Ⅰ)試劑盒 Bovine carnitine palmitoylansferase I,CPT-Ⅰ ELISA kit
氟離子(F-)標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000mg/L,基體:水) Fluoride standard 質(zhì)量規(guī)格:1000mg/L,基體:水 牛肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶-II(CPT-II)試劑盒 Bovine carnitine palmitoylansferase II,CPT-II ELISA kit
金標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml) Gold standard 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml 牛乳過氧化物酶(LPO)試劑盒 Bovine lactoperoxidase,LPO ELISA kit
鍺標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml) Germanium standard 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml 牛乳酸脫氫酶(LDH)試劑盒 Bovine lactate dehydrogenase,LDH ELISA Kit
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:細(xì)粒棘球PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。