產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3613 |
用途 | 公司產品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
技術服務內容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
施氏油脂線蟲PCR檢測試劑盒直銷 | Elaeophora schneideriPCR | BKP3613 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:施氏油脂線蟲PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
大鼠腦細胞;C6 細胞,OS-RC-2細胞 OK細胞,負鼠腎細胞植酸鈉25克
Caki-1, 人腎透明細胞癌細胞 HumanDL-苯甘醇 DL-Phenylglycinol,99% 7568-92-5 1G 通用試劑
CEACAM1 Others Mouse 小鼠 CEACAM1 / CD66a 人細胞裂解液 (陽性對照) 異務二1, 99% Isoprqnq 78-79-2
角質細胞培養(yǎng)基KM鄰本二酸二25克RT
FAM20B Others Human 人 FAM20B / Gxk1 人細胞裂解液 (陽性對照) 58-56-0鹽酸吡多辛Pyridoxine xy7nochloride;VitaMin B6
主動脈平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)重樓皂苷II(標準品)Polyphyllin II質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
AK4 Others Human 人 AK4 / Adenylate Kinase 4 / AK3L1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 重樓皂苷VI(標準品)Polyphyllin VI質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
中國倉鼠卵巢細胞系;pDSr a2-mpl-X重樓皂苷VII(標準品)Polyphyllin VII質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
Mo-MuLv/3T3細胞,Mo-MuLv感染的3T3細胞 人細胞,SFPAC-1細胞 CM-M056小鼠腎實質細胞完全培養(yǎng)基100mL豬去氧膽酸Hyodeoxycholic acid質量規(guī)格:≥97%,BR
大鼠腎小球系膜細胞;HBZY-1豬去氧膽酸(標準品)Hyodeoxycholic acid質量規(guī)格:含量測定
施氏油脂線蟲PCR檢測試劑盒直銷人細胞;1301地蒽酚(標準品)ANTHRALIN質量規(guī)格:含量測定
CSF2 Others Rat 大鼠 GM-CSF / CSF2 人細胞裂解液 (陽性對照) 對羥基(標準品)4-Hydroxyphenylacetamide質量規(guī)格:供檢查用
CM-H009人上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL奮乃靜(標準品)Prochlorperazine質量規(guī)格:含量測定
SW480細胞,人細胞 人色素瘤細胞,MV3細胞 EB病毒轉化的人B細胞;Mao奮乃靜Prochlorperazine質量規(guī)格:>98%,BR
HBL-100(人整合SV40基因的上皮細胞) 5×106cells/瓶×2TGX221TGX-221質量規(guī)格:>98%,特異性的p110β抑制劑
SKOV3/Taxol-25, 人紫杉醇耐藥細胞株 Human本基瓊脂糖凝膠6FF(低分辨率)shēng huà shì jì容量:2~8℃25毫克
CLU Others Human 人 CLU / Clusterin 人細胞裂解液 (陽性對照) 基炳1酰醋2-(叔丁安基)酯 2-(TqRT-BUTYLcMINO)qTHYL MqTHcCRYLcTq 3772-90-4
人成纖維細胞RNAHLF miRNA5 μg馬鈴薯葡萄糖肉湯shēng huà shì jì容量:RT支
F13B Others Human 人 F13B / Coagulation factor XIII B chain 人細胞裂解液 (陽性對照) PCR化Kitshēng huà shì jì容量:1公斤
U251 人神經(jīng)細胞75621-03-33-[3-(膽酰胺基)二甲基]磺酸內鹽CHAPS