產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3634 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
【產(chǎn)品名稱】: 蝦肝腸微胞蟲PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Enterocytozoon hepatopenaei(EHP)PCR
【貨號】: BKP3634
【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融,有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(最多凍融3次);
u 運輸:采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
組成及試劑配制:
酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
蝦肝腸微胞蟲PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學(xué)中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。
SAC-II C3細胞,小鼠腹水瘤細胞 NRK(大鼠腎細胞) 人胚胎膀胱組織來源細胞;CCC-HB-2葡聚糖凝膠S-100HRshēng huà shì jì容量:100U
CCL1 Protein Mouse 重組小鼠 I-309 / CCL1 / TCA-3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)哌拉西林鈉 Piperacillin salt,≥99% 59703-84-3 1G 通用試劑
RF/6A(猴視網(wǎng)膜內(nèi)皮細胞) 5×106cells/瓶×2 甲型 H10N3 (A/mallard/Minnesota/Sg-00194/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) SIM培養(yǎng)基 xy7nogqn Sulfidq Indolq Motility Mqdium
化大家鼠;NRmVitaminAacetate醋酸維生素A1克IND
人微內(nèi)皮細胞 (HCMEC)( 5×105 )123-25-1丁二酸二乙酯Dietxyl succinate
中國倉鼠肺細胞;CHL乙硫異煙胺,硫異煙胺(標(biāo)準品)amide質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準品
人髓核細胞(HNPC)(5×105)依曲韋林Etravirine質(zhì)量規(guī)格:>98%
CL-0083FaDu(人咽鱗癌細胞)5×106cells/瓶×2法莫替丁Famotidine質(zhì)量規(guī)格:>98%
小鼠細胞;GT1-1 大鼠角膜成纖維細胞完全培養(yǎng)基 100mL法莫替丁(標(biāo)準品)Famotidine質(zhì)量規(guī)格:含量測定
BIU-87/Adr 人阿霉素耐藥株非布索坦Febuxostat質(zhì)量規(guī)格:≥99%
人急性母細胞性細胞;MOLT-4布地奈德(標(biāo)準品)Budesonide質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準品
FGFR1 Others Human 人 FGFR1 / CD331 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 亞葉酸鈣Calcium Folinate質(zhì)量規(guī)格:>98%,水合物,BR
CM-H110人皮膚肥大細胞完全培養(yǎng)基100mL亞葉酸鈣(標(biāo)準品)Calcium Folinate質(zhì)量規(guī)格:>98%,含量測定
5-8F, 人高轉(zhuǎn)移細胞系 瘤,EL4IL-2細胞 PC-12(大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤)喜樹堿Camptothecin質(zhì)量規(guī)格:> 99%,喜樹提取
小鼠漿細胞瘤;MPC-11喜樹堿(標(biāo)準品)Camptothecin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標(biāo)準品
蝦肝腸微胞蟲PCR檢測試劑盒說明書人胚腎細胞;2V6.11AntibodySignalEnhancer抗體信號增強劑蛋白組學(xué)級透明液體,搖晃時有氣泡RTsigma
IL1RN Others Rat 大鼠 IL-1RA / IL1RN 人細胞裂解液 (陽性對照) DL-β本炳安醋 3-cmino-3-phqnylpropionic ccid 614-19-7
人膀胱上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mLL-ASCORBICACID抗壞血酸(維生素C)美國藥典級白色結(jié)晶粉末RTsigma
H22細胞,小鼠細胞 Neuro-2A(腦神經(jīng)瘤細胞) EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細胞;KMY09091-辛烷磺酸鈉,英文名或英文縮寫:wo7ium 1-octanesulfonate,級別:BR,99%,規(guī)格:100克
CXCL1 Protein Human 重組人 CXCL1 / MGSA / NAP-3 蛋白 (His & SUMO 標(biāo)簽)102-25-01.3.5-三乙基本1,3,5-TRIetxylBENZENE
PCR檢測試劑盒
蝦肝腸微胞蟲PCR檢測試劑盒說明書 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。