產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3627 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
腸桿菌屬通用PCR檢測試劑盒供應(yīng)【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融,有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(最多凍融3次);
u 運輸:采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
【產(chǎn)品名稱】: 腸桿菌屬通用PCR檢測試劑盒供應(yīng)
【英文名稱】: Enterobacter spp.PCR
【貨號】: BKP3627
組成及試劑配制:
酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
腸桿菌屬通用PCR檢測試劑盒供應(yīng)其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。
HAoSMC-c 人主動脈平滑肌細胞(HAoSMC) 500,000cells 胰島β細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)對硝基本-N-乙酰-β-D-基葡萄糖苷1克2~8℃,避光
肺大平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)抗氧劑 2,6-Di-tqrt-butyl-4-mqthylphqnol 18-37-0
CLCF1 Others Human 人 N1 / CLCF1 / CLC 人細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸環(huán)沙星25克
人皮膚鱗癌細胞;A-431 [A431]三乙二醇100克
豚鼠皮膚細胞;GP-S2 恒河猴腎細胞,LLC-MK2細胞 WEHI-3細胞,小鼠血細胞108-75-82.4.6-基2,4,6-Collidine
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-C鹽酸沙氟沙星;鹽酸沙拉沙星Sarafloxacin HCl質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR
Pt K1細胞,長鼻袋鼠腎細胞 人胰腺腺癌細胞,Panc 10.05細胞 CM-M095小鼠成年表皮角質(zhì)形成層細胞完全培養(yǎng)基100mL鹽酸沙氟沙星;鹽酸沙拉沙星(標準品)Sarafloxacin HCl質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98.0%,標準品
大鼠嗜堿性粒細胞性細胞;RBL-1甲硫二苯馬尼/二苯馬尼甲硫酸鹽Diphemanil mesylate質(zhì)量規(guī)格:>98%
KDR Others Human 人 VEGFR2 / CD309 人細胞裂解液 (陽性對照) 甲硫二苯馬尼(標準品)Diphemanil mesylate質(zhì)量規(guī)格:>98%,標準品
原代腎實質(zhì)細胞特制基礎(chǔ)無血清培養(yǎng)基Many types of cells包裝:500/100ml吡嗪-2-羧酸,吡嗪單羧酸2-Pyrazinecarboxylic acid質(zhì)量規(guī)格:含量98%,化學
PA319 人細胞白鮮堿(標準品)Dictamnine質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
CL-0466WI38/VA13(SV-40Z轉(zhuǎn)化)5×106cells/瓶×2羅替戈汀Rotigotine質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
小鼠神經(jīng)干細胞(EGFP標記)鹽酸羅替戈汀Rotigotine Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR
人細胞;1301 人腸動脈內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL右雷佐生鹽酸鹽;右丙亞胺鹽酸鹽Dexrazoxane HCl質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
人肝星形細胞HHSteCSGI-1776SGI-1776;SGI1776質(zhì)量規(guī)格:>98%,Pim1抑制劑
腸桿菌屬通用PCR檢測試劑盒供應(yīng)CD40LG Protein Human 重組人 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 標簽)淀粉酶測試盒shēng huà shì jì容量:1個
人臍帶動脈平滑肌細胞 (HUASMC)( 5×105 ) A-375 [A375], 人惡性素瘤細胞株 Human2,2’-二-4,4’-二羧醋(+4℃) 2,2'-BICINCHONINIC cCID 142-13-
人胚;MRC-5品紅亞鈉培養(yǎng)基(濾膜法用)shēng huà shì jì容量:1米
KLRB1F Others Mouse 小鼠 KLRB1F / NKR-P1F 人細胞裂解液 (陽性對照) 本shēng huà shì jì容量:RT25克
HCT-8 人回盲細胞110-87-23.4-二氫Dixy7nopyran
PCR檢測試劑盒
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。