產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3657 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
【產(chǎn)品名稱(chēng)】: 馬病毒通用PCR檢測(cè)試劑盒直銷(xiāo)
【英文名稱(chēng)】: Equine Herpesvirus(EHV)PCR
【貨號(hào)】: BKP3657
【儲(chǔ)存條件及有效期】:
-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融,有效期6個(gè)月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運(yùn)輸】
u 樣本采集:各類(lèi)型樣本按照常規(guī)方法采集;
u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò)72h,-70℃以下可長(zhǎng)期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(最多凍融3次);
u 運(yùn)輸:采用冰壺或泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
組成及試劑配制:
酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)謩e配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。
馬病毒通用PCR檢測(cè)試劑盒直銷(xiāo)其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
Bowes Melanoma細(xì)胞,色素瘤細(xì)胞 人原髓細(xì)胞細(xì)胞,AL7P/HL-60R細(xì)胞 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HT-29DNAMarkerⅢ25克
A172(人腦細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2D(+)-密二糖一水 》99.0% 6-O-cLPHc-D-GcLcCTOPYRcNOSYL-D-GLUCOSq MONOHYDRcTq 66009-10-7
IL8 Others Human 人 IL-8 (aa 1-77) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) A.C.Eformide毛細(xì)管電泳級(jí)甲先胺測(cè)序級(jí)50ML1975-2-7Frozen
非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO75cm2三角斜口細(xì)胞培養(yǎng)瓶shēng huà shì jì容量:25克
BTK Others Human 人 Bruton Tyrosine Kinase / BTK Kinase 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) Fibrinogen 250mg/1g/5g Sigma F8630
原代單核細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝:5/2.5/1ml鹽酸吉西他濱(標(biāo)準(zhǔn)品)Gemcitabine HCl質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
BLK Others Human 人 BLK / B Lymphocyte Kinase 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 甲磺酸吉米沙星Gemifioxacin Mesylate質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1甲磺酸吉米沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)Gemifioxacin Mesylate質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
A549[A-549]細(xì)胞,細(xì)胞 人細(xì)胞,SMMC-7721細(xì)胞 T-104BII型膠原酶(含100mL酶解緩沖液)10mL膽酸鈉 cholate質(zhì)量規(guī)格:>98%,牛或羊膽汁,培養(yǎng)基用
大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞;PC-12 [PC12]醋酸胰素Glucagon Acetate質(zhì)量規(guī)格:purity>97%,BR
馬病毒通用PCR檢測(cè)試劑盒直銷(xiāo)人肺泡上皮細(xì)胞RNAHPAEpiC miRNA5 μg達(dá)那唑(標(biāo)準(zhǔn)品)Danazol質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
FCER1A Others Mouse 小鼠 FcERI / FCER1A 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 氨苯蝶啶(標(biāo)準(zhǔn)品)Triamterene質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測(cè)定
人臍內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL拉呋替丁Lafutidine質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
HSC-T6細(xì)胞,鼠肝星形細(xì)胞 SW620(細(xì)胞) 人低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PC-3M-2B4拉呋替?。?biāo)準(zhǔn)品)Lafutidine質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
CSF1 Protein Mouse 重組小鼠 M-CSF / CSF-1 蛋白托可索侖/維生素E聚乙二醇琥珀酸酯Tocofersolan,VE-TPGS質(zhì)量規(guī)格:VE含量≥260.00mg/g as dl-α-tocopherol
A-375[A375]細(xì)胞,惡性色素瘤細(xì)胞 細(xì)胞,Jurk. Clone E6-1細(xì)胞 人皮膚鱗癌細(xì)胞;A-431 [A431](S)-萘普生異?;?/span>-β-D-葡萄糖苷酸質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口(S)-Naproxen Iso-acyl-β-D-glucuronide
艾氏腹水瘤瘤株;Ehrlich(R)-?;疗丈?/span>-β-D-葡萄糖苷酸質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口(R)-Naproxen Acyl-β-D-glucuronide
DKK1 Others Rhesus 恒河猴 DKK-1 / Dkk1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (1RS)-1-(6-甲氧-2-萘基)乙醇(萘普生雜質(zhì)K)質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口(1RS)-1-(6-Methoxy-2-naphthyl)ethanol (Naproxen Impurity K)
人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞HRPEpiC6'-甲氧基-2'-萘乙酮 (萘普生雜質(zhì) L)質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口6'-Methoxy-2'-acetonaphthone (Naproxen Impurity L)
EPO Others Rat 大鼠 Erythropoietin / EPO 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (S)-普拉克索二鹽酸化物質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口(S)-Pramipexole Dihydrochloride
PCR檢測(cè)試劑盒:
馬病毒通用PCR檢測(cè)試劑盒直銷(xiāo) (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說(shuō)明書(shū)的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min,EP管底部可見(jiàn)白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。