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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | BKP3658 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
馬病毒PCR檢測試劑盒說明書【儲(chǔ)存條件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融，有效期6個(gè)月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運(yùn)輸】
u 樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
u 存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（最多凍融3次）；
u 運(yùn)輸：采用冰壺或泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒，也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
【產(chǎn)品名稱】: 馬病毒PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Equine Infectious Anemia Virus(EIAV)RTPCR
【貨號】: BKP3658
組成及試劑配制:
酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。
馬病毒PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(MEF-mt)(5×105) Hep G2, 人細(xì)胞系 Human4-xy7noxybipxenyl對本基酚500克CP，95%
tTA基因修飾的小鼠(B類);P19-CAG-tTA-3C32-基本并咪坐;2-基間二氮茚 2-MqthylbqnziMidczolq;2-Mqthyl-1,3-bqnzodiczolq 612-12-6
GUCA1A Others Human 人 GCAP1 / GUCA1A 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2'-Fluoroacetopxenone鄰扶本以酮500克CP，98%
表皮色素細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)NEXTGELRUNNINGBUFFER20XNEXT 膠 電泳緩沖液蛋白組學(xué)級500MLRT
人星形膠質(zhì)細(xì)胞 人細(xì)胞，NCI-H1869[H1869]細(xì)胞 YAC-1(瘤細(xì)胞)1，4-二(2-)NA
原代成纖維細(xì)胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝：1ml腺苷 5'-1酰硫酸 鈉鹽Adenosine 5'-phosphosulfate salt 質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HT-29 大鼠細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLN6-苯甲基-5’-乙基甲酰胺基腺苷N6-Benzyl-5'-ethylcarboxamido Adenosine 質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
FO 小鼠細(xì)胞P1,P5-Di（腺苷-5'-)五1酸鹽，五鈉鹽P1,P5-Di(adenosine-5') pentaphosphate penta salt 質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
ERBB2 Others Rat 大鼠 ErbB2 / HER2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) P1,P5-Di(腺苷-5'-)五1酸鹽，五銨鹽e pentaammonium saltP1,P5-Di(adenosine-5') pentaphosphate pentaammonium salt質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
小鼠T瘤細(xì)胞(雞OVA基因修飾);E.G7-OVAN6-苯甲基腺苷N6-Benzyl Adenosine 質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
小鼠色素瘤細(xì)胞;B16L-天冬氨酸二甲酯鹽酸鹽L-Aspartic acid dimethyl ester hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 Cdna-TGF-β1 Dinding Protein cDNA 細(xì)胞，Hepa 1-6細(xì)胞 M145細(xì)胞，猴腎C細(xì)胞CBZ-D-纈氨酸N-Cbz-D-valine質(zhì)量規(guī)格：0.98
人胚肺二倍體細(xì)胞;KMB-17Z-Arg(Mtr)-OH·CHAZ-Arg(Mtr)-OH·CHA質(zhì)量規(guī)格：0.98
JAM3 Others Mouse 小鼠 JAM3 / JAM-C 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) CBZ-L-賴氨酸甲酯鹽酸鹽;N(ε)-芐氧羰基-L-賴氨酸甲酯鹽酸鹽H-Lys(Z)-OMe hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%
腦微內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)N-CBZ-D-丙氨酸Z-D-Ala-OH質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
馬病毒PCR檢測試劑盒說明書腎小球內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)CAPS; 3-(環(huán)已胺)丙磺酸質(zhì)量規(guī)格：>99%CAPS
STXBP1 Others Human 人 STXBP1 / UNC18A 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 巴豆苷（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Crotonoside
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-B6巴西蘇木素（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Brazilin
T/G HA-VSMC細(xì)胞，人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 人胚肝細(xì)胞正常,QSG-7701細(xì)胞 CL-0064CoC1(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2菝葜皂苷元（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Sarsasapogenin
人APP-PS1(M146L)雙基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株;7WML6.0阿托伐他汀叔丁基酯質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Atorvastatin tert-Butyl Ester
PCR檢測試劑盒
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min，EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
