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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | BKP3663 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
【產(chǎn)品名稱】: 馬輪狀病毒PCR檢測試劑盒供應(yīng)
【英文名稱】: Equine RotavirusRTPCR
【貨號】: BKP3663
【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融，有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運(yùn)輸】
u 樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
u 存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（最多凍融3次）；
u 運(yùn)輸：采用冰壺或泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒，也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
組成及試劑配制:
酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。
馬輪狀病毒PCR檢測試劑盒供應(yīng)其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
H293T細(xì)胞，人類胚胎表皮細(xì)胞 貓腎細(xì)胞,CRFK細(xì)胞 CL-0267CNE-2Z(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2化铔，英文名或英文縮寫：Ammonium iodide，級別：AR，99%，規(guī)格：5毫升
16HBE(人上皮樣細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2醋醋增速 ≥97% (HPLC) cngiotqnsin ccqtctq 0071-00-2
HTSMC-c 人類氣管平滑肌細(xì)胞(HTSMC) 500,000cells 原代肝實質(zhì)細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/250/100mlN-叔丁氧羰基-D-酸，英文名或英文縮寫：BOC-D-Alanine，級別：BR，99%，規(guī)格：5克
大隱平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)GENTAMYCINSOLUTION50MG/ML慶大霉素,50mg/ml 溶液組織培養(yǎng)級20MLCOLD
RBP4 Others Canine 狗 RBP4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 硅原子吸收液NA
雪旺細(xì)胞生長添加物SCGS鹽酸阿米洛利(標(biāo)準(zhǔn)品)Amiloride hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格：含量測定
LILRA3 Others Human 人 ILT6 / LILRA3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 3，5-二氨基-6-氯吡嗪-2-羧酸甲酯（標(biāo)準(zhǔn)品）Methyl 3,5-diamino-6-chloropyrazine-2-carboxylate質(zhì)量規(guī)格：檢查
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY0928苯噻啶（標(biāo)準(zhǔn)品）Pizotifen質(zhì)量規(guī)格：檢查
CNE1細(xì)胞，人細(xì)胞(高分化) 小鼠細(xì)胞,P3-X63-Ag8.653細(xì)胞 草魚肝臟細(xì)胞;L8824β-環(huán)糊精（標(biāo)準(zhǔn)品）β-Cyclodextrin質(zhì)量規(guī)格：含量測定
NCI-H1299(人非小細(xì)胞細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2卡托普利二硫化物（標(biāo)準(zhǔn)品）Captopril Disulfide質(zhì)量規(guī)格：檢查
馬輪狀病毒PCR檢測試劑盒供應(yīng)人細(xì)胞;A549 [A-549]腺苷；腺嘌呤核苷Adenosine質(zhì)量規(guī)格：BR,>99%,細(xì)胞培養(yǎng)級
CLEC4B2 Others Rat 大鼠 CLEC4B2 / mDCAR1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 阿戈美拉汀（I型）Agomelatine質(zhì)量規(guī)格：>98.5%，I晶型
CL-0425RKO-AS45-1(人轉(zhuǎn)基因細(xì)胞)5×106cells/瓶×2吡拉西坦Piracetam質(zhì)量規(guī)格：>99%
XJH細(xì)胞，B細(xì)胞 人男性正常細(xì)胞系,HS68細(xì)胞 人胎兒胸腺細(xì)胞株;HFT-8810 [HFT8810]雷美替胺Ramelteon質(zhì)量規(guī)格：>98.5%
斑馬魚尾鰭細(xì)胞;AB.9拉科酰胺Lacosamide質(zhì)量規(guī)格：>98%
CSF1 Protein Mouse 重組小鼠 M-CSF / CSF-1 蛋白腦心浸液100毫升
SW620(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 甲型 H7N9 (A/Shanghai/4664T/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) L-類胱酸 L-Homocystine,≥98% 626-72-2 100MG 通用試劑
人肺泡上皮細(xì)胞HPAEpiC流醋天仙子安 HyoscycMinq Sulfctq 6832-16-1
HA Others H1N1 甲型 H1N1 (A/Texas/05/2009) HA 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 化高鐵血紅蛋白參比液100g100張RT
KM9304 EBV-轉(zhuǎn)化人細(xì)胞(彝族)144-48-9化乙酰胺(2-8℃)2-Iodoacetamide
PCR檢測試劑盒：
馬輪狀病毒PCR檢測試劑盒供應(yīng) (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min，EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
