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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號(hào) | BKP3670 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
大腸桿菌通用PCR檢測試劑盒說明書【儲(chǔ)存條件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融，有效期6個(gè)月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運(yùn)輸】
u 樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
u 存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（最多凍融3次）；
u 運(yùn)輸：采用冰壺或泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒，也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
【產(chǎn)品名稱】: 大腸桿菌通用PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Escherichia coliPCR
【貨號(hào)】: BKP3670
組成及試劑配制:
酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。
大腸桿菌通用PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
QBC-939, 人細(xì)胞 (瘤株),Ke-3細(xì)胞 HL-60(急性粒細(xì)胞細(xì)胞)Estradiolβ-雌二醇100克CP，99%
小鼠細(xì)胞;Sp2/0-Ag1417-羥基 sprengerin... Hydroxy Sprengerinin C, 17 (HPLC,≥98%) 1029017-75-1 10MG 標(biāo)準(zhǔn)品
FLT3 Others Human 人 FLT3 / FLK2 / CD135 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 5-拂-2’-脫氧脲核苷 Floxuridinq 20-91-9
大鼠腎小球系膜細(xì)胞;HBZY-1寶石紅蛋白染色試劑，英文名或英文縮寫：SYPRO red protein stain，級(jí)別：高，95%，規(guī)格：500克
人成纖維細(xì)胞( HCF) ( 5×105 )9032-75-1果膠酶(+4℃)Pectinase
微內(nèi)皮細(xì)胞cDNAHCMEC cDNA溴化膽,從牛脂來(>98.0%(T))Cholesteryl Bromide from Beef Fat質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)
SLPI Others Human 人 SLPI 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 膽壬酸酯(>89.0%(GC))Cholesterol Pelargonate質(zhì)量規(guī)格：>89.0%(GC)
大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞;IEC-6膽壬基碳酸酯Cholesterol Nonyl Carbonate質(zhì)量規(guī)格：
95-D細(xì)胞，高轉(zhuǎn)移細(xì)胞 人細(xì)胞,M2e細(xì)胞 正常大鼠腎細(xì)胞;NRK膽庚基碳酸酯Cholesterol Heptyl Carbonate質(zhì)量規(guī)格：
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-A2膽油醇碳酸酯(>70.0%(HPLC))Cholesterol Oleyl Carbonate質(zhì)量規(guī)格：>70.0%(HPLC)
人導(dǎo)管瘤細(xì)胞;BT-4742,2'-二羥基偶氮苯(>98.0%(T))2,2'-Dihydroxyazobenzene質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)
PDPN Others Mouse 小鼠 Podoplanin / PDPN 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) S-乙酰半胱氨酸鹽酸S-Acetamidomethyl-L-cysteine hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
CM-R022大鼠甲狀腺上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLO-叔丁基-L-蘇氨酸甲酯鹽酸鹽O-tert-Butyl-L-threonine methyl ester hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：0.98
Raw264.7, 小鼠單核巨噬細(xì)胞細(xì)胞 牛腎細(xì)胞,MDBK細(xì)胞 Hs 578Bst(人成纖維細(xì)胞)L-丙氨酸異丙酯鹽酸鹽L-Alanine isopropyl ester hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：>98%
小鼠腎集合管細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化);M-1L-天冬酰胺甲酯鹽酸鹽Methyl L-asparaginate monohydrochloride質(zhì)量規(guī)格：0.98
大腸桿菌通用PCR檢測試劑盒說明書人癌細(xì)胞;MDA-MB-468Flurprimidol2-甲基-1-嘧啶-5-基-1-(4-三扶甲氧基本基)丙-1-醇1KU高，98%
TF Others Human 人 ansferrin / TF 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 1-溴-3-基-2- 3,3-Dimqthylcllyl bromidq 870-63-3
牛腦垂體提取物BPEEDACoHC11-乙基-(3-二甲基基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽100毫克高，99%
GAP43 Others Human 人 GAP43 / Neuromodulin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 羥基乙酸shēng huà shì jì容量：100毫克
CHL-Don 中國倉鼠肺成纖維樣細(xì)胞(-N，N-雙
PCR檢測試劑盒
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min，EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
