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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | BKP3678 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
大片吸蟲PCR檢測試劑盒說明書 | Fasciola giganticaPCR | BKP3678 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
特點優(yōu)勢：
1. 特異性：大片吸蟲PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
MRC-5人胚肺細(xì)胞 MRC-5 in human embryo lung cells MEM+10% FBSROSANILINECHLORIDE堿性品紅(中文名稱對嗎)*綠色閃光粉末RTsigma
INHBA Protein Mouse 重組小鼠 Inhibin beta A / INHBA / Activin A 蛋白 (His 標(biāo)簽)扁桃酸 Mandelic acid,99% 90-64-2 100G 通用試劑
人膀胱基質(zhì)成纖維細(xì)胞(HBdSF)(5×105) 人絨毛間充質(zhì)成纖維細(xì)胞 Human錄化血紅速;錄高鐵血紅速;血晶;言醋血紅速 HqMin;HqMctinq xy7nochloridq;HqMin chloridq;Chloroprotoporphyrin IX iron(III);1,3,5,8-TqtrcMqthy1-2,4-divinylporphinq-6,7-dipropionic ccid fqrrichloridq;ChlorohqMin;Chlorofqrriprotoporphyrin;FqrrihqMq chloridq;Fqrriporphyr in chloridq 16009-13-2
大鼠骨骼肌成肌細(xì)胞;L6N-Hexadecane正十六烷*無色液體RTsigma
AFP Others Human 人 AFP / alpha-fetoprotein 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 110-40-7癸二酸二乙酯;皮脂酸乙酯Dietxyl Sebacate;Decanedioic acid dietxyl ester
小鼠心肌細(xì)胞MCM外消旋心得安-d7rac Propranolol-d7質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
EFNA5 Others Canine 狗 Ephrin-A5 / EFNA5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 5-羥基鹽酸心得安5-Hydroxy Propranolol Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
人胚胎肌肉組織來源細(xì)胞;CCC-HSM-2(R)-4-羥基鹽酸心得安(R)-4-Hydroxy Propranolol Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
NCI-H446細(xì)胞，人小細(xì)胞細(xì)胞 大鼠神經(jīng)細(xì)胞,C6細(xì)胞 CM-H111人成骨細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL(S)-4-羥基鹽酸心得安(S)-4-Hydroxy Propranolol Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
P815(小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2(+/-)-4-羥基鹽酸心得安(+/-)-4-Hydroxy Propranolol Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
大片吸蟲PCR檢測試劑盒說明書人表皮色素細(xì)胞-HEM-a吉非羅齊1-O-β-葡萄糖苷酸-d6Gemfibrozil 1-O-β-Glucuronide-d6質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
DAPK1 Others Human 人 DAPK1 / DAP Kinase 1 (aa 1-363) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) N-去甲基昂丹司瓊N-Demethyl Ondansetron質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
兔角膜后基質(zhì)層成纖維細(xì)胞;RCBBF6-羥基昂丹司瓊6-Hydroxy Ondansetron質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
Y1細(xì)胞，腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞 人細(xì)胞,MIApaca-2細(xì)胞 CM-M008小鼠成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL8-羥基昂丹司瓊8-Hydroxy Ondansetron質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
大鼠細(xì)胞;UMR-106奧昔康唑Oxiconazole質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
QSG-7701細(xì)胞，人胚肝細(xì)胞正常 人APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株,7WPS1細(xì)胞 中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆); EPO-CHO-T7-酮基去氫表雄酮質(zhì)量規(guī)格：>98%7-Keto-dehydroepiandrosterone
LLC-MK2(恒河猴腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2硝酸銣質(zhì)量規(guī)格：>99%Rubidium nitrate
Promocell Drosophila Schneider's Drosophila Medium果蠅培養(yǎng)基，無L-谷氨酰胺 500mlCHIR-99021 (CT99021.HCl)質(zhì)量規(guī)格：>99%,GSK-3α/β抑制劑CHIR-99021 (CT99021) HCl
人主動脈平滑肌細(xì)胞總RNAHASMC NA駱駝蓬堿;駱駝蓬靈;哈梅靈(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Harmaline;Dihydroharmine
CFD Others Mouse 小鼠 CFD / Adipsin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) JNJ-26854165 (Serdemetan)質(zhì)量規(guī)格：>98%JNJ 26854165
