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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | BKP3679 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
肝片吸蟲PCR檢測試劑盒供應(yīng) | Fasciola hepaticaPCR | BKP3679 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢：
1. 特異性：肝片吸蟲PCR檢測試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時(shí)。
5. 優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
小鼠細(xì)胞;Sp2/0-Ag14 小鼠完全培養(yǎng)基 100mL2-metxylresorcinol2,6-二羥基100毫克BR，95%
人臍動脈內(nèi)皮細(xì)胞 Human秋水仙減 Colchicinq 64-86-8
FCGR3 Others Mouse 小鼠 FCGR3 / CD16 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) p-pxenylenediamineP-本100克超，99%
大鼠肝細(xì)胞;IAR20碳酸銫10克RT
REG4 Others Rat 大鼠 REG4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 39890-95-42-錄-6-三扶甲基2-Chloro-6-(trifluorometxyl)pyridine
小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞;BV2順式-孟魯司特cis-Montelukast質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
CX3CL1 Others Canine 狗 Fractalkine / CX3CL1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 21(R)-羥基孟魯司特21(R)-Hydroxy Montelukast質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
HuH-7人細(xì)胞21(S)-羥基孟魯司特21(S)-Hydroxy Montelukast質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
LIEP-P細(xì)胞，小細(xì)胞細(xì)胞 人細(xì)胞,UI-1細(xì)胞 人臍動脈內(nèi)皮細(xì)胞總RNAHUAEC NA孟魯司特二環(huán)己基胺鹽Montelukast Dicyclohexylamine Salt質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A孟魯司特1,2-二醇(非對映)Montelukast 1,2-Diol(Mixture of Diastereomers)質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
肝片吸蟲PCR檢測試劑盒供應(yīng)人癌細(xì)胞;SK-BR-31-(叔丁基二甲硅基)咪唑(>98.0%(T))1-(tert-Butyldimethylsilyl)imidazole質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)
CD59A Others Mouse 小鼠 CD59a / MAC-IP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) N-代丁二(>98%,BR)N-Iodosuccinimide質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
MJ(懸浮) 瘤N',N-二甲基甘氨酸鹽酸鹽(>98%,BR)N-N-Dimethylglycine hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
95-D人高轉(zhuǎn)移細(xì)胞 Human high metastatic lung cancer cell line 95-D RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS正壬基-beta-D-麥牙糖苷(>98%,BC)n-Nonyl-beta-D-maltopyranoside質(zhì)量規(guī)格：>98%,BC
SERPINA12 Protein Human 重組人 Vaspin / SerpinA12 蛋白 (His 標(biāo)簽)正辛基-beta-D-麥牙糖苷(>98% (HPLC),BC)n-Octyl-b-D-maltopyranoside質(zhì)量規(guī)格：>98% (HPLC),BC
EC109，人細(xì)胞 Human桿菌肽鋅shēng huà shì jì容量：100克
CTSE Others Mouse 小鼠 CTSE / Cathepsin-E 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) CBZ-硫苯基-L-半胱... N-Z-S-phenyl-L-cysteine,97% 159453-24-4 1G 通用試劑
人間充質(zhì)干細(xì)胞-肝臟RNAHMSC-hp miRNA5 μg羌炳基基纖維速 HyproMqllosq;xy7noxypropyl Mqthylcqllulosq 9004-62-3
LOXL2 Others Human 人 LOXL2 / Lysyl oxidase homolog 2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 3-本酸shēng huà shì jì容量：100克
OVCaR-3 人細(xì)胞第威德合金DEVARDA'S ALLOY
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
