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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | BKP3689 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
黃桿菌通用PCR檢測試劑盒直銷 | Flavobacterium spp.PCR | BKP3689 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。
大鼠胚胎心肌細(xì)胞;H9c2(2-1) 細(xì)胞，SHG-44細(xì)胞 W6/32細(xì)胞，小鼠B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞P-DImetxYLAMINOCINNAMALDEHYDE對二甲基肉桂醛*橙棕色粉末FRZsigma
Raw264.7, 小鼠單核巨噬細(xì)胞細(xì)胞 Mouse苯芴酮 Phenylfluorone,978 975-17-7 25G 通用試劑
CD99L2 Others Mouse 小鼠 CD99L2 / MIC2L1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 格拉司瓊相關(guān)物質(zhì)B Grcnisqtron Rqlctqd CoMpound B;N-[(1R,3r,5S)-9-Mqthyl-9-czcbicyclo[3.3.1]non-3-yl]-1H-indczolq-3-ccrboxcMidq 107007-92-4
成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基-2FM-2-prfGly-Vlu甘酰-L-纈酸1克BR，98%
PROM1 Others Rat 大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 112-34-5二乙二醇一丁;二乙二醇丁;二羥二;丁基卡別妥爾;二甘醇一丁;2-(2-丁氧基乙氧基)乙醇;二乙二醇單丁Dietxylene glycol Monobutyl ;Butyl digol;Butyl diicinol;2-(2-Butoxyethoxy)ethanol
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(來自NIH3T3);PA12神經(jīng)肽Y（2-36），人，大鼠Neuropeptide Y (2-36) (human,rat)質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR
GGT1 Others Rat 大鼠 GGT1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 神經(jīng)肽Y（22-36）Neuropeptide Y (22-36)質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR
人平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL神經(jīng)肽Y（3-36），豬Neuropeptide Y (3-36)(porcine)質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR
M1細(xì)胞，小鼠細(xì)胞 脆弱擬桿菌 新生牛眼Tenon's囊成纖維細(xì)胞;NBTF骨鈣素（7-19），人Osteocalcin (7-19) (human)質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR
CXCL12 Protein Human 重組人 CXCL12 / SDF-1 蛋白 (isoform a)成骨生長肽Osteogenic Growth Peptide質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR
黃桿菌通用PCR檢測試劑盒直銷青霉素/鏈霉素溶液P/SL-脯氨酰胺L-Prolinamide質(zhì)量規(guī)格：0.98
VEGFA Others Canine 狗 VEGF / VEGFA 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) L-谷氨酸(標(biāo)準(zhǔn)品)L-Glutamic acid質(zhì)量規(guī)格：>99%(TLC)，標(biāo)準(zhǔn)品
人急性T細(xì)胞細(xì)胞;Jurkat, Clone E6-1L-谷氨酸(sigma)L-Glutamic acid質(zhì)量規(guī)格：>99%,Sigma分裝
H7402細(xì)胞，人細(xì)胞 小鼠艾氏腹水癌細(xì)胞,EAC細(xì)胞 非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO-76DL-谷氨酸DL-Glutamic acid monohydrate質(zhì)量規(guī)格：>98%,水合物
MGC80-3(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2肌氨酸Sarcosine 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
ARPE-19(人視網(wǎng)膜上皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2泛影酸鈉(>98%,BC)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BC diatrizoate dihydrate
CXADR Others Mouse 小鼠 CXADR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 氟鋁酸鈉(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR fluoroaluminate
兔腎細(xì)胞;RK-13馬尿酸鈉(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR hippurate
IL12A & IL12B Others Mouse 小鼠 IL12A & IL12B Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鈉(>95%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR laurate
Ishikawa 人細(xì)胞吡嗪(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)Pyrazine
特點優(yōu)勢：
1. 特異性：黃桿菌通用PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
