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口蹄疫病毒亞型PCR檢測試劑盒說明書【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融，有效期6個(gè)月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運(yùn)輸】
u 樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
u 存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（最多凍融3次）；
u 運(yùn)輸：采用冰壺或泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒，也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。

【產(chǎn)品名稱】: 口蹄疫病毒亞型PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: FootandMouth Disease Virus(FMDV)ARTPCR
【貨號】: BKP3698
組成及試劑配制:

酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。

口蹄疫病毒亞型PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

BT-549(人管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M093小鼠胎兒真皮成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;LoVo皮質(zhì)甾酮，英文名或英文縮寫：Corticosterone，級別：CP，99%，規(guī)格：100克

EB病毒轉(zhuǎn)化的絨猴細(xì)胞;B95-8醋銻 cntimony triccqtctq 693-2-0

AMPK Others Human 人 AMPK (G1/B1/A1) Heteroimer 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) PROTEASEINHIBITORCOCKTAIL,BACTERIAL蛋白酶抑制劑混合物,細(xì)菌蛋白組學(xué)級白色粉末FROZENsigma

CL-0209SHZ-88(大鼠癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2偏硼酸，英文名或英文縮寫： borate monohydrate，級別：BR，98%，規(guī)格：500克

3T3-L1, 小鼠前脂肪細(xì)胞 小鼠細(xì)胞，HEPA1-6細(xì)胞 FO(細(xì)胞)AMVReverseTranscriptase 300u/1000u Promega原裝
小鼠肺腺癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記);LA1-GFP去甲維拉帕米鹽酸鹽Norverapamil, Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

A10細(xì)胞，大鼠主動脈平滑肌細(xì)胞 CCL13張氏肝細(xì)胞正常,Chang liver細(xì)胞 CL-0080WB-F344(大鼠肝上皮樣干細(xì)胞)5×106cells/瓶×2霉酚酸內(nèi)酯 (EP 雜質(zhì)H)Mycophenolic Acid Lactone (EP Impurity H)質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

中國倉鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1O-去甲基霉酚酸O-Desmethyl Mycophenolic Acid質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

RELT Others Human 人 RELT / TNFRSF19L 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 霉酚酸-d3 β-D-葡萄糖苷酸Mycophenolic Acid-d3 β-D-Glucuronide質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

腎動脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)霉酚酸?；?/span> β-D-葡萄糖苷Mycophenolic Acid Acyl-β-D-glucoside質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
綠色熒光蛋白標(biāo)記人細(xì)胞;MGC803-GFP1酸三丁酯(CP)Tributyl phosphate質(zhì)量規(guī)格：CP

786-O細(xì)胞，人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞 小鼠細(xì)胞,CMT93細(xì)胞 CL-0202Saos-2(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×21酸三丁酯(標(biāo)準(zhǔn)品)Tributyl phosphate質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品

VCaP(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×23-O-β-D-葡萄糖( 1→4)-[ a -L-鼠李糖(1→2)]- a-L-阿拉伯糖 常春藤配基- 28-O-鼠李糖(1→4)葡萄糖(1→6)葡萄糖苷V質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

NHEM.f-c M2 正常人表皮素細(xì)胞(NHEM)少年，M2培養(yǎng)液中培養(yǎng) 500,000cells 視網(wǎng)膜微內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)D-果糖-6-1酸二鈉鹽D-Fructose-6-phosphate di salt質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

虹膜色素上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)白頭翁皂苷BPulchinenoside B質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
口蹄疫病毒亞型PCR檢測試劑盒說明書穩(wěn)定表達(dá)EBNA1的人胚腎細(xì)胞;293E(±)-柚皮素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC>90%,標(biāo)準(zhǔn)品Naringenin

TMED4 Others Human 人 TMED4 / ERS25 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 二乙酰鳥嘌呤質(zhì)量規(guī)格：>95%N(2),9-Diacetylguanine

CL-0376LA795(小鼠)5×106cells/瓶×2山姜素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Alpinetin

Pcc4細(xì)胞，胚癌細(xì)胞 人細(xì)胞,SK細(xì)胞 Asp2人胚胎腎細(xì)胞轉(zhuǎn)化細(xì)胞;FC33埃博霉素A質(zhì)量規(guī)格：>98%,BREpothilone A

高背鯽魚尾鰭細(xì)胞;GBJd醋酸磺胺米隆質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRMafenide Acetate

PCR檢測試劑盒

 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min，EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。