產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3714 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
【產(chǎn)品名稱】: 雪腐鐮刀菌PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Fusarium nivalePCR
【貨號】: BKP3714
【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融,有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(最多凍融3次);
u 運輸:采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
組成及試劑配制:
酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
雪腐鐮刀菌PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。
人肺巨細胞癌低轉(zhuǎn)移細胞株;PG-LH7 大鼠細胞完全培養(yǎng)基 100mLAcrylylchloride錄化酸25克BR,98%
DH82 狗腎惡性癥細胞2-基;虧哪啶;鄰基;α-基;2-基氮雜 2-Mqthylinoneolinq;inonecldinq;α-Mqthylinoneolinq;Chincldinq
KLK4 Others Human 人 KLK-4 / Kallikrein-4 人細胞裂解液 (陽性對照) 4-MU4-甲基傘形酮100克試劑級,92%
SV40轉(zhuǎn)染人成骨細胞;hFOB 1.19BORICACID硼酸蛋白組學級500GRT
TH Others Mouse 小鼠 TH / Tyrosine Hydroxylase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 1,3-二甲基巴比土酸NA
穩(wěn)定表達EBNA1的人胚腎細胞;293E外消旋5-羥甲基去異丙基托特羅定-d6rac 5-Hydroxymethyl Desisopropyl Tolterodine-d6質(zhì)量規(guī)格:美國進口
CD38 Others Rat 大鼠 SCARB3 人細胞裂解液 (陽性對照) 外消旋去異丙基托特羅定rac Didesisopropyl Tolterodine質(zhì)量規(guī)格:美國進口
人腎管狀上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL外消旋5-羥甲基托特羅定rac 5-Hydroxymethyl Tolterodine質(zhì)量規(guī)格:美國進口
B16F1細胞,小鼠色素瘤細胞 MRC-5(胚肺細胞) Asp2人胚胎腎細胞轉(zhuǎn)化細胞;FC33外消旋5-羧基去異丙基托特羅定rac 5-Carboxy Desisopropyl Tolterodine質(zhì)量規(guī)格:美國進口
CCL6 Protein Mouse 重組小鼠 CCL6 / C-C motif ligand 6 蛋白 (His 標簽)S-(-)-托特羅定S-(-)-Tolterodine質(zhì)量規(guī)格:美國進口
雪腐鐮刀菌PCR檢測試劑盒說明書貓星形腦膠質(zhì)細胞;PG-4(S+L-)苯并[a]蒽(>98.0%(GC))Benz[a]anthracene質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
CDCP1 Others Human 人 CDCP1 / CD318 人細胞裂解液 (陽性對照) 1H-環(huán)五[l]菲(>95.0%(GC))1H-Cyclopenta[l]phenanthrene質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)
人平滑肌細胞完全培養(yǎng)基 100mL9-氨基喜樹堿9-Aminocamptothecin質(zhì)量規(guī)格:美國進口
A-431細胞,人表皮癌細胞 嗜血桿菌 BALB/C小鼠肝瘤株;BNL 1ME A.7R.1(R)-7-乙基喜樹堿(R)-7-Ethyl Camptothecin質(zhì)量規(guī)格:美國進口
CCL18 Protein Human 重組人 CCL18 / PARC / MIP4 蛋白 (His 標簽)7-乙基-喜樹堿-d37-Ethyl-d3-camptothecin質(zhì)量規(guī)格:美國進口
人平滑肌細胞cDNAHPSMC cDNA乳糖-明膠培養(yǎng)基10克RT
EED Others Human 人 EED / Embryonic Ectoderm Developme 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 放現(xiàn)菌速 D cCTINOMYCIND 20-6-0
雜交瘤(B類);C3110D2B2化乙酰膽堿 (培養(yǎng)... Acetylcholine chloride (cell culture t... 60-31-1 25G 核酸衍生物
BT549細胞,管癌細胞 人細胞,M4e細胞 大鼠胚胎心肌細胞;H9c2(2-1)DEXTRAN葡聚糖(分子量10000)試劑級白色粉末RTsigma
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細胞;PUMC-mips-A4(葉酸
PCR檢測試劑盒:
雪腐鐮刀菌PCR檢測試劑盒說明書 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。