產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3727 |
用途 | 公司產品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術服務內容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
加德納菌PCR檢測試劑盒供應 | Gardnerella vaginalisPCR | BKP3727 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
HCCC-9810細胞,人膽管細胞型細胞 小鼠細胞G-CSF依賴性,NFS-60細胞 水貂肺上皮細胞;Mv.1.Lu(NBL-7)GENE-PAGEPLUS5%,WITHTTEBUFFER 5% GENE-PAGE PLUS 含TTE生物技術級COLDsigma
MDBK(牛腎細胞) 5×106cells/瓶×2黃蓍樹膠粉 Gum tragacanth powder 9000-65-1 100G 通用試劑
Promocell C-22170 Myocyte GrowthMedium KIT, 心肌細胞生長培養(yǎng)基套裝 500ml單唾液神經節(jié)苷酯(-20℃) GcNGLIOSIDq GM1, cMMONIUM ScLT, BOVINq 37728-47-7
kasumi-1, 人細胞株Atr莠去津5克超,100mM
ART4 Others Mouse 小鼠 Art4 / CD297 人細胞裂解液 (陽性對照) 32449-92-6D-葡糖醛酸內酯D-Glucurone
視網膜色素上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)舒緩激肽三醋酸鹽Bradykinin acetate質量規(guī)格:>98%
DDR2 Others Human 人 DDR2 Kinase / CD167b 人細胞裂解液 (陽性對照) α-促激素,素皮質素α-MSH質量規(guī)格:>95%
雜交瘤(B類);Z1510A2G6A2C7內皮素-1,人,豬Endothelin-1, human,porcine質量規(guī)格:>95%
GLC-82細胞,人 轉S9基因倉鼠卵巢細胞,ZA6細胞 CL-0050Caco-2(人結直腸腺癌細胞)5×106cells/瓶×2蛙皮素,胃泌素Bombesin質量規(guī)格:>95%
SV-HUC-1(人膀胱上皮永生化細胞) 5×106cells/瓶×2活性腸肽VIP, human, porcine, rat; VIP (28 amino acids)質量規(guī)格:>95%
加德納菌PCR檢測試劑盒供應家豬皮膚細胞;SSC-S14-苯基-1,2,4-三唑啉-3,5-二酮(含氮量:23.50-24.30 %)4-Phenyl-1,2,4-triazoline-3,5-dione質量規(guī)格:含氮量:23.50-24.30 %
IFNGR1 Others Mouse 小鼠 IFNGR1 / CD119 人細胞裂解液 (陽性對照) N-叔丁基-α-苯基硝酮(>98.0%(HPLC)(T))N-tert-Butyl-α-phenylnitrone質量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)
HT-29 人細胞4-羥基氨苯蝶啶4-Hydroxy Triamterene質量規(guī)格:美國進口
U-118 MG人腦星形膠質母細胞瘤 U-118 MG of brain asocytic blastoma DMEM培養(yǎng)基+10%FBS4-羥基氨苯蝶啶硫酸鈉鹽4-Hydroxy Triamterene Sulfate, Salt質量規(guī)格:美國進口
VEGFA Protein Rat 重組大鼠 VEGF164 / VEGFA 蛋白2,4-二氨基-6-苯基-7-蝶啶2,4-Diamino-6-phenyl-7-pteridinol質量規(guī)格:美國進口
CSNK1G2 Others Human 人 CSNK1G2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) L-酰-L-谷酰,英文名或英文縮寫:Alu-Gln,級別:BR,99%,規(guī)格:5克
長白山豬胚胎皮膚成纖維樣細胞;201184三溴新務醇 3-Bromo-2,2-bis(bromomqthyl)propcnol 2012/9/2
BHK細胞,幼倉鼠腎細胞 人細胞,CFPAC-1細胞 CM-R093大鼠胎兒真皮成纖維細胞完全培養(yǎng)基100mLGLYCEROLGELLOADINGDYE,5X5X核酸電泳上樣緩沖液,30%甘油超級暗紫色微粘稠液體COLDsigma
大鼠胰腺外分泌腺細胞;AR42J5′-CTP,3Na5-胞嘧啶核苷三嶙酸三鈉鹽500UBR,95%
RTN4R Others Human 人 RTN4R / NOGOR 人細胞裂解液 (陽性對照) 109-43-3癸二酸二丁酯Dibutyl Sebacate (AS)
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:加德納菌PCR檢測試劑盒供應使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過GenBank及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。