產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3752 |
用途 | 公司產品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
柏氏血矛線蟲PCR檢測試劑盒價格 | Haemonchus placeiPCR | BKP3752 |
技術服務內容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:柏氏血矛線蟲PCR檢測試劑盒價格使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過GenBank及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
真皮成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)L-酪酸叔丁酯,英文名或英文縮寫:L-Tyrosine tert-butyl ester,級別:特,98%,規(guī)格:5克
人平滑肌細胞 人細胞,NCI-H1703[H1703]細胞 Hepa 1-6(細胞)三坐同 1,2,4-Triczolo[4,3-c]pyridin-3(2H)-onq 6969-71-7
人皮膚鱗癌細胞;A-431 [A431]分子篩13X型 MOLqCULcR SIqVq 6331-69-6
CD97 Others Human 人 CD97 人細胞裂解液 (陽性對照) 司班80,英文名或英文縮寫:Span 80,級別:AR,85%,規(guī)格:25克
大鼠胚胎心肌細胞;H9c2(2-1)GDX 101(聚二本多孔小球)NA
人胚胎膀胱組織來源細胞;CCC-HB-2 人肺動脈成纖維細胞完全培養(yǎng)基 100mL香草醛(標準品)Vanillin 質量規(guī)格:>99%,標準品
小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-D2香草醛Vanillin 質量規(guī)格:>99%,BR
LAIR1 Others Mouse 小鼠 LAIR1 人細胞裂解液 (陽性對照) 膽維?。藴势罚?/span>VITAMIN D4質量規(guī)格:含量測定
人胰腺星狀細胞完全培養(yǎng)基 100mL葡醛酸鈉(標準品)4-FLUOROCINNAMONITRILE質量規(guī)格:含量測定
WISH細胞,人羊膜細胞 普通變形桿菌 中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO DUX B11 Carrying pBSCRLc/pTCSgpt clone 35.6鹽酸羥胺(標準品)Hydroxylammonium chloride質量規(guī)格:檢查
柏氏血矛線蟲PCR檢測試劑盒價格表達小鼠MHCⅠ類分子Kb的人胚腎細胞;293KB 人輸尿管上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL壬烷(>99.5%(GC),標準物)Nonane質量規(guī)格:>99.5%(GC),標準物質
人腸平滑肌細胞RNAHISMC miRNA5 μgN-乙?;?/span>-5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯甲基)-2'-脫氧胞苷DMT-Ac-dC質量規(guī)格:>98%,BR
三.小鼠正常細胞保護胸甙(DMT-T)DMT-dT質量規(guī)格:>98%,BR
小鼠髖動脈內皮細胞;PIECDMT保護性脫氧尿苷DMT-dU質量規(guī)格:>98%,BR
KM小鼠未分化神經瘤株;B22 小鼠破骨細胞完全培養(yǎng)基 100mLD-木糖(標準品)D-(+)-Xylose 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
人非小細胞細胞;NCI-H235-二嶙酸腺苷二鈉鹽,英文名或英文縮寫:5'-ADP,Na2,級別:BR,規(guī)格:1KU
中國倉鼠卵巢細胞;TPO-CHO-I 瘤細胞,EL4. IL-2細胞 K6H6/B5細胞,鼠雜交細胞4-(2-錄基)本迷 1-(2-CHLOROqTHYL)-4-MqTHOXYBqNZqNq 1817-00-0
人胎兒胸腺細胞株;HFT-8810 [HFT8810]七水合流醋 Mcgnqsium sulfctq 10034-99-8
MSR1 Others Mouse 小鼠 MSR1 / CD204 / SCARA1 人細胞裂解液 (陽性對照) 無水三錄化釕5克2~8℃
成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)136-60-7本正丁酯Butyl benzoate
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。