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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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嗜血桿菌PCR檢測試劑盒說明書
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號:BKP3758
  • 價(jià)格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-10
  • 更新日期: 2024-11-26
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號 BKP3758
用途 公司產(chǎn)品僅用物科研
包裝規(guī)格 50次
純度 %
CAS編號
是否進(jìn)口

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:

方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl     
ddH2O 50 μl  
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,在72 7min。
3
:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4待電泳檢測或-20長期保存。
4
PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

嗜血桿菌PCR檢測試劑盒說明書

Haemophilus influenzaePCR

BKP3758

技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:

實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。

特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:嗜血桿菌PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
 2.   
重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3.   
靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4.   
實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5.   
優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

腸粘膜上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)D-葡萄糖醛酸-r-內(nèi)酯,英文名或英文縮寫:D-Glucurone,級別:BR98%,規(guī)格:1

人海馬神經(jīng)元 人細(xì)胞,NCI-H226[H226]細(xì)胞 P388D1(瘤細(xì)胞)(S)-(+)-同洛芬 (S)-(+)-Kqtoprofqn 161-81-2

人色素瘤細(xì)胞;A875L-溶血卵鱗脂(冷藏運(yùn)輸) Lysophosphctidylcholinq 9008-30-4

AXL Others Mouse 小鼠 Axl Kinase 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) CAPSOFREEACIDCAPSO超級25G73463-39-5RT

大鼠腦細(xì)胞;C64975-73-9N,N-二環(huán)己基-4-嗎啉脒N,N'-Dicyclohexyl-4-morpholinecarboxamidine
人顱骨造骨細(xì)胞 (HCO) ( 5×105 ) NRK-52E,大鼠腎細(xì)胞 Rattus芴甲氧羰酰氯(Fmoc-ClFmoc chloride質(zhì)量規(guī)格:用于HPLC衍生化,99.0% (HPLC)

小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-B5氟羅里硅土(農(nóng)殘級)Florisil®質(zhì)量規(guī)格:農(nóng)殘級

人小腦顆粒細(xì)胞 (HCGC)( 5×105 )合成硅酸鎂吸附劑(250-125um)Magnesium silicate adsorbent(Synthetic)質(zhì)量規(guī)格:250-125um

Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)吡氟禾草靈標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.101mg/ml)Fluazifop-P-butyl solution質(zhì)量規(guī)格:0.101mg/ml

人髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞;D341Med 大鼠子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL惡唑酮菌(標(biāo)準(zhǔn)品) Famoxadone solution質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.5%
嗜血桿菌PCR檢測試劑盒說明書人胚胎成纖維樣細(xì)胞;HEH2 人子宮成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL2'-脫氧鳥苷-3'-1酸二鈉2'-Deoxy-3'-guanylic acid di salt質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

人表皮角質(zhì)細(xì)胞-新生HEK-nN-乙酰-DL-甲硫氨酸N-Acetyl-DL-mine質(zhì)量規(guī)格:0.99

RK2 Others Rat 大鼠 kB / RK2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) DL-高半胱氨酸DL-Homocysteine 質(zhì)量規(guī)格:0.95

大鼠直腸平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL間氟-DL-酪氨酸m-Fluoro-DL-tyrosine 質(zhì)量規(guī)格:0.99

BHK-21 [C-13]倉鼠腎成纖維細(xì)胞 BHK-21 [C-13] hamster kidney fibroblast cells MEM培養(yǎng)基10%FBS鈣蛋白酶抑制劑I(進(jìn)口)Calpain Inhibitor I(ALLN) 質(zhì)量規(guī)格:≥95%,美國進(jìn)口
tTA
基因修飾的小鼠(B);P19-CAG-tTA-1D3 膠原酶(100mL酶解緩沖液) 10mL3'-對羥基紫杉醇質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口3'-p-Hydroxy Paclitaxel

SK-MEL-1, 人皮膚色素瘤細(xì)胞 Human紫杉醇-d5質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Paclitaxel-d5

BCHE Others Human BCHE / CHE1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 7-差向紫杉酚質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口7-epi-Taxol

人小氣道上皮細(xì)胞RNAHSAEpiC miRNA5 μg紫杉醇C質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Paclitaxel C

SEMA5A Others Human SEMA5A / Semaphorin-5A / SEMAF 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2'-O-(tert-Butyldimethylsilyl)-6α-羥基-7-差向-紫衫醇質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口2'-O-(tert-Butyldimethylsilyl)-6α-hydroxy-7-epi-paclitaxel
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
引物擴(kuò)增跨度: 200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.11umol10100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。


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