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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號(hào) | BKP3757 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
嗜血桿菌型PCR檢測(cè)試劑盒直銷 | Haemophilus influenzae BBPCR | BKP3757 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：
1. 特異性：嗜血桿菌型PCR檢測(cè)試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè)，特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè)，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè)，無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性：檢測(cè)范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè)，整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2：該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
WIF1 Others Mouse 小鼠 WIF1 / WIF-1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) D-FRUCTOSED-果糖*白色精細(xì)粉末RTsigma
大鼠骨細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL2′-脫氧腺苷-5′-... 2′-Deoxyadenosine 5′-triphosphate di... 74299-50-6 25MG 通用試劑
293TN人胚腎細(xì)胞--用于慢病毒包裝 293TN human embryonic kidney cells -- for leiviral packaging DMEM+10%FBS+500ug/ml G418三十六烷;正三十六烷 Hqxctriccontcnq 630-06-8
IFNG Protein Ferret 重組雪貂 IFNG / Ierferon Gamma 蛋白 (His 標(biāo)簽)LIGHTGREENSFYELLOWISH亮綠*深紫紅色精細(xì)粉末RTsigma
HuT 78(人T細(xì)胞細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 阪崎腸桿菌125-31-5對(duì)兒價(jià)分藍(lán)P-xyleol BLUE
人胚;CCC-HPF-1依澤替米貝β-D-葡萄糖苷酸Ezetimibe β-D-Glucuronide質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
HA Others H3N2 甲型 H3N2 (A/Wisconsin/67/X-161/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 安普那韋-d4Amprenavir-d4質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)4'-羥基華法林4'-Hydroxy Warfarin質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
ASGR2 Others Human 人 ASGR2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 6-羥基華法林6-Hydroxy Warfarin質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
大鼠子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL7-羥基華法林7-Hydroxy Warfarin質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
嗜血桿菌型PCR檢測(cè)試劑盒直銷EGF Protein Human 重組人 EGF / Epidermal Growth Factor 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)變色酸2RChromotrope 2R質(zhì)量規(guī)格：AR
293ET(人胚腎細(xì)胞(SV40T和EBNA1基因修飾細(xì)胞)) 5×106cells/瓶×2 原代心肌細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/250/100ml1鉬酸Phosphomolybdic acid hydrate質(zhì)量規(guī)格：BC
人虹膜色素上皮細(xì)胞cDNAHIPEpiC cDNA甘氨酸Glycine質(zhì)量規(guī)格：>99%,美侖
小鼠骨髓間充質(zhì)肝細(xì)胞(MMSC-bm)(5×105)甘氨酸(Sigma)Glycine質(zhì)量規(guī)格：>98%,sigma分裝
大鼠腦細(xì)胞;C6L-甘氨酸(標(biāo)準(zhǔn)品)L-Glycine質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
人平滑肌細(xì)胞cDNAHBVSMC cDNALanolin無(wú)水羊毛脂100毫克GR
NRN1L Others Human 人 NRN1L / neuritin 1-like / Cpg15-2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 3,5-二錄水楊全 3,5-DICHLOROScLICYLcLDqHYDq 90-60-8
小鼠瘤株;H22IAA3-吲哚酸100KU超，99%
GBC-SD細(xì)胞，人細(xì)胞 人APP基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株,7WD10細(xì)胞 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1AldehydeDexy7nogenase,potewwium-activated乙醛脫氫酶25克BR，5′d(NNN NNN NNN)3′
Li-7(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×295-64-73,4-二3,4-Dimetxylaniline
