產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3765 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
金黃地鼠病毒PCR檢測試劑盒直銷 | Hamster Leukemia VirusRTPCR | BKP3765 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
AMPK Others Human 人 AMPK (G1/B2/A1) Heteroimer 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 2.0ml離心管shēng huà shì jì容量:1KU
CL-0241VCaP(人細胞)5×106cells/瓶×21-氧基2-炳醇 1-Mqthoxy-2-propcnol 107-98-
HUVEC-12, 人臍內(nèi)皮細胞系 昆蟲卵巢細胞,SF9細胞 NK-92(人惡性非霍奇金瘤患者的自然殺傷細胞)蠶蛹蛋白胨shēng huà shì jì容量:保存:-20℃100毫克
人導管癌細胞;ZR-75-30Zincphosphatemonobasic嶙酸二氫鋅100克AR,99%
CHIT1 Others Human 人 CHIT1 / Chitinase-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 596-03-24,5-二溴熒光素4',5'-DIBROMOFLUORESCEIN
人急性T細胞細胞;Jurkat, Clone E6-1異魯米諾(>98.0%(HPLC)(T))Isoluminol質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)
IL18R1 Others Mouse 小鼠 IL18R1 / CD218a 人細胞裂解液 (陽性對照) 草酸雙[2,4,5-三氯-6-(戊氧羰基)苯基]酯(>98.0%(HPLC))Bis[3,4,6-trichloro-2-(pentyloxycarbonyl)phenyl] Oxalate質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 Cdna-TGF-β1 Dinding Protein cDNA8-氨基-1,3,6-萘三磺酸二鈉鹽水合物(>99.0%(HPLC)(T))Di 8-Amino-1,3,6-naphthalene 3sulfonate Hydrate質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(HPLC)(T)
ROBO2 Others Human 人 ROBO2 人細胞裂解液 (陽性對照) 102(>97.0%(HPLC)(N))Coumarin 102質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(HPLC)(N)
成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml) 314(>98.0%(HPLC)(N))Coumarin 314質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(N)
金黃地鼠病毒PCR檢測試劑盒直銷人胚肺二倍體細胞;HL橙皮苷(標準品)Hesperidin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/whooper swan/Mongolia/244/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) 橙皮苷Hesperidin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥90%,BR
人間充質(zhì)干細胞-骨髓總RNAHMSC-bm NA橙皮素(標準品)Hesperitin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
PARP1 Others Mouse 小鼠 PARP-1 / PARP 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 蟲草素(標準品)Cordycepin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
家貓肺細胞;FCA-L1川陳皮素;蜜橘黃素Nobiletin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,BR
人骨骼肌成肌細胞cDNAHSkMM cDNA1,4-α-D-葡聚糖麥芽水解酶,英文名或英文縮寫:β-Amylase,級別:BR,4000u/g,規(guī)格:5克
GPNMB Others Human 人 GPNMB / HGFIN 人細胞裂解液 (陽性對照) 3,4’-二安基二本迷 3,4'-Oxydicnilinq 627-87-6
3T3?L1 小鼠脂肪細胞N-DODECYL-β-D-MALTOSIDEN-十二烷基-β-D-麥芽糖苷*白色粉末FROZENsigma
CL-0246YAC-1(小鼠瘤細胞)5×106cells/瓶×2肝嶙脂鈉鹽,英文名或英文縮寫:Heparin wo7ium salt,級別:BR,1500-3000u/mg,規(guī)格:1克
rCF, 大鼠成纖維細胞10318-18-0DL-半胱酸鹽酸鹽;DL-2-基-3-酸鹽酸鹽DL-Cysteine xy7nochloride
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:金黃地鼠病毒PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。