產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3781 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
亨德拉病毒PCR檢測試劑盒直銷 | Hendra VirusRTPCR | BKP3781 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:亨德拉病毒PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;Mao 人骨骼肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLCAPSTRANSFERBUFFER,10XCAPS, 轉(zhuǎn)移緩沖液 10X蛋白組學(xué)級500MLCOLD
色素細(xì)胞培養(yǎng)基-2(不含TPA)MelM-2(+/-)-反式-1.2-二安基環(huán) (+4℃) (+/-)-trcns-1,2-Dicminocyclohqxcnq 111--8
FKBP7 Others Human 人 PPIase / FKBP7 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 減式碳醋 Lqcd(II) ccronctq bcsic 1319-46-6
大鼠胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLValinomycin基霉素1克USP級,γ-射線滅菌,10mg/ml
NCI-H266人非小細(xì)胞細(xì)胞 NCI-H266 cells in human non small cell lung cancer 1640+10%FBS6106-21-4丁二酸鈉Diwo7ium succinate hexahydrate
顱蓋造骨細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)乙酸芐酯(標(biāo)準(zhǔn)品)Benzyl acetate質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.7%(GC
RAMOS(RA.1)細(xì)胞,人B細(xì)胞瘤細(xì)胞 小鼠癌細(xì)胞株,EMT-6細(xì)胞 人小梁網(wǎng)細(xì)胞裂解物HTMCL芐嘧磺隆(標(biāo)準(zhǔn)品) Bensulfuron-methyl質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
NCI-H446(人小細(xì)胞細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2草除靈(標(biāo)準(zhǔn)品)Benazolin-ethyl ester質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.5%
CHL(倉鼠肺細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0110HL-60(人早幼粒急性細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-B13,4-苯并芘(標(biāo)準(zhǔn)品)3,4-Benzopyrene質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
中國倉鼠肺細(xì)胞;R 1610 [R1610]1,3-丁二醇(標(biāo)準(zhǔn)品) (±)-1,3-Butanediol質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
亨德拉病毒PCR檢測試劑盒直銷CL-0437SF763(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2草甘膦標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=2%)N-(Phosphonomethyl)glycine solution質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=2%
細(xì)胞名稱 M-37細(xì)胞 G-7(小鼠骨骼肌肌肉母瘤細(xì)胞)辛(分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%)Phoxim質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%
人細(xì)胞;Hela P10s-11F除草標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=5%)Nitrofen solution質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=5%
DLL4 Others Human 人 DLL4 / Delta4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2-萘氧乙酸(標(biāo)準(zhǔn)品)2-Naphthoxyacetic acid質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
人急性母細(xì)胞性細(xì)胞;MOLT-4滅菌丹標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=2%)N-(Trichloromethylthio)phthalimide solution質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=2%
HUVEC-12, 人臍內(nèi)皮細(xì)胞系Bathopxenanthroline4,7-二本基鄰咯啉100毫克CP,97%
人Burkkit瘤細(xì)胞;Daudi 大鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL本醇 BqNZYL cLCOHOL 100-21-6
MMQ 小鼠細(xì)胞葡聚糖凝膠 Sephade... Sephadex G-100 Superfine 9050-94-6 100G 分離試劑
FETUB Others Human 人 Fetuin-B / FETUB 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) AcidicProtease酸性蛋白酶100克生物技術(shù)級,1u/mg
人非小細(xì)胞;NCI-H1975(順二酸(馬來酸))