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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | BKP3770 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
沿岸單孢子蟲PCR檢測試劑盒說明書 | Haplosporidium costalePCR | BKP3770 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
特點優(yōu)勢：
1. 特異性：沿岸單孢子蟲PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
786-0 人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞PEPTONE140蛋白胨 140細(xì)菌學(xué)級淺棕色到棕色粉末RT不sigma
Hep G2人細(xì)胞 Hep G2 human hepatocarcinoma cells DMEM+10% FBS溴柏里酚藍(lán);溴麝香草酚藍(lán);溴柏里香酚藍(lán);3′,3″-二溴麝香草酚磺酞 BroMothyMol bluq 76-29-2
PDGFC Protein Mouse 重組小鼠 PDGF-C / SCDGF 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)聚酮 Polyvinylpyrrolidone 10 (PVP10) 9003-39-8 25G 染色劑
人上皮細(xì)胞(HBEpiC)(5×105 ) 細(xì)胞名稱 種屬β-caroteneβ-葉紅素250毫克IND
豹貓肺成纖維樣細(xì)胞;LCL44648-54-8疊氮化基硅烷 (TMSiA)Azidotrimetxylsilane
人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞 (HHSEC) ( 5×105 ) 大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs) Rattus碳酸氫鉀(AR)Potassium bicarbonate質(zhì)量規(guī)格：>99%,AR
小鼠細(xì)胞;Hepa 1-6 [Hepa1-6]十二烷基磺酸鈉(BR) dodecanesulfonate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
SERPINB3 Others Human 人 SerpinB3 / SCCA-1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 茶堿Theophylline質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
CM-R102大鼠腦內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL纖維素酶Cellulase質(zhì)量規(guī)格：>2000U/mg
786-O [786-0], 人腎透明腺癌細(xì)胞 小鼠T細(xì)胞,CTLL-2細(xì)胞 HT-29(人細(xì)胞)硫酸軟骨素Chondroitin sulfate質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR
沿岸單孢子蟲PCR檢測試劑盒說明書hFOB 1.19(SV40轉(zhuǎn)染人成骨細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 產(chǎn)氣腸桿菌D-色氨酸D-Tryptophan質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
膀胱上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)D-半乳糖胺鹽酸鹽D(+)-Galactosamine hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：BR,98%
TSPAN8 Others Human 人 TSPAN8 / Teaspanin 8 / TM4SF3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 薯蕷皂苷;重樓皂苷III(標(biāo)準(zhǔn)品)Dioscin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98.0%,標(biāo)準(zhǔn)品
人成細(xì)胞;Saos-2薯蕷皂甙Dioscin質(zhì)量規(guī)格：BR，含量≥95.0%
AD293細(xì)胞，人胚腎細(xì)胞 牛胚氣管細(xì)胞,EB(NBL-4)細(xì)胞 CL-0303PATU8988(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2薯蕷皂素(標(biāo)準(zhǔn)品)Diosgenin質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98.0%,標(biāo)準(zhǔn)品
EPCAM Others Human 人 EpCAM / OP1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) Antipaindixy7nochloride抗痛素100克生物技術(shù)級，600u/mg
人肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞總RNAHIBEpiC NA啊匹油脂 L cPIqZON GRqcSq L 1678-0-3
PAK3 Others Human 人 PAK3 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) Sulforhodaminep磺酰羅丹明B細(xì)胞培養(yǎng)試劑染料100毫克BS
中國倉鼠卵巢細(xì)胞;TPO-CHO-IBOVINESERUMALBUMIN,20%SOLUTION牛血清白蛋白溶液生物技術(shù)級500MLCOLD
SMC-1細(xì)胞，胸膜細(xì)胞瘤 早幼粒急性細(xì)胞系,HL-60細(xì)胞 小鼠子細(xì)胞;U14(化瓊脂)
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
