產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3778 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
【產(chǎn)品名稱】: 幽門螺旋桿菌PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Helicobacter pylori(PCR
【貨號】: BKP3778
【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存,避免反復凍融,有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應避免反復凍融(最多凍融3次);
u 運輸:采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
組成及試劑配制:
酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
幽門螺旋桿菌PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結(jié)合是關鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結(jié)合(復性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術概論。
ADIPOQ Others Human 人 Adiponectin / Acrp30 / ADIPOQ 人細胞裂解液 (陽性對照) MEGA-8MEGA-8超級白色固體RTsigma
大鼠滑膜細胞完全培養(yǎng)基 100mL溴柏里酚藍內(nèi)鹽 BTB 347-90-
RSC96大鼠雪旺細胞 Schwann cells in RSC96 rats DMEM+10%FBS百里酚藍 Thymol Blue (indicator, Dye content, ... 76-61-9 5G 染色劑
IFNA8 Protein Human 重組人 Ierferon alpha-B / IFNA8 蛋白低范圍RNALadder,英文名或英文縮寫:RiboRuler Low range RNA Ladder,級別:BR,規(guī)格:25克
HuTu-80(人十二脂腸腺癌) 5×106cells/瓶×2 宋內(nèi)氏志賀氏菌(Sh.sonnei)(L-羥脯酸)
人Butt瘤細胞;RAJI氧化鉍Bismuth oxide 質(zhì)量規(guī)格:AR,>99%
ICOS Others Human 人 ICOS / AILIM / CD278 人細胞裂解液 (陽性對照) 2-氯-1,3-2-Chloro-1,3-propanediol質(zhì)量規(guī)格:進口原裝,98%
造骨細胞生長添加物ObGS富馬酸比索洛爾Bisoprolol fumarate質(zhì)量規(guī)格:>99%
TNFRSF13B Others Human 人 TNFRSF13B / TACI / CD267 人細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸溴己新Bromhexine HCl質(zhì)量規(guī)格:度>99%
CP-88 草魚胚胎細胞鹽酸布比卡因Bupivacaine HCl質(zhì)量規(guī)格:>95%,USP
幽門螺旋桿菌PCR檢測試劑盒說明書HuH-6(人肝母細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2苯氧乙酸(標準品)Phenoxyacetic acid質(zhì)量規(guī)格:分析標準品
Promocell C-22010 Endothelial Cell Growth Medium, 內(nèi)皮細胞生長培養(yǎng)基(即用型) 500ml菲(標準品)Phenanthrene質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,用于環(huán)境分析
人骨骼肌細胞裂解物HSkMCL芘(標準品)Pyrene質(zhì)量規(guī)格:分析標準品
PRKCD Others Mouse 小鼠 PKC delta / PRKCD 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (-)-鹽酸東莨菪堿(標準品)(?)-Scopolamine hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,99.0%
小鼠;P19十四烷(標準品)Tetradecane質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,≥99.5%(GC)
RH-35細胞,細胞 人胃腺癌細胞,AGS細胞 黃牛皮膚細胞;BTA-S2苯扎氯銨(標準品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定用Alkyldimethylbenzylammonium chloride
雜交瘤(B類);C3110D2B2甲硫酸新斯的明(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標準品Neostigmine methyl sulfate
HA Others H1N1 甲型 H1N1 (A/California/04/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) 甘草酸二鉀(標準品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Dipotassium glycyrrhizinate
臺盼藍TB尼美舒利(標準品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Nimesulide
MAP2K1 Others Mouse 小鼠 MEK1 / MAP2K1 / MKK1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 苯氧乙酸鈉(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRPhenoxyaceti acid salt
PCR檢測試劑盒:
幽門螺旋桿菌PCR檢測試劑盒說明書 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。