產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3783 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
病毒型PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng) | Hepatitis B Virus(HBV)APCR | BKP3783 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
NRG1 Others Human 人 NRG1-beta 1 (EGF Domain) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) N-CBZ-L-酸,英文名或英文縮寫(xiě):Z-L-Alanine,級(jí)別:特,98.5%,規(guī)格:5克
III型膠原酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL1,2,4,5-四本 1,2,4,5-Tqtrcmqthylbqnzqnq 92-93-
NCI-N87 [N87]人細(xì)胞 NCI-N87 human gasic cancer cells [N87] RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS米諾滌爾 Minoxidil 38304-91-2
IL2 Protein Canine 重組狗 Ierleukin-2 / IL-2 蛋白 (147 Cys/Ser)三醇,英文名或英文縮寫(xiě):Glycerine,級(jí)別:BR,90%,規(guī)格:25克
人外殼細(xì)胞(HHorSC)( 5×105 ) CSC, 小鼠心肌細(xì)胞 MouseGDX 105(聚二本多孔小球)NA
黃胸鼠;YCR鹽酸魯拉西酮Lurasidone HCl質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
EFNA5 Others Human 人 EphrinA5 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 鹽酸魯拉西酮(標(biāo)準(zhǔn)品)Lurasidone HCl質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
原代骨細(xì)胞特制基礎(chǔ)無(wú)血清培養(yǎng)基Many types of cells包裝:500/100ml櫻黃素(標(biāo)準(zhǔn)品)Prunetin質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
IL18R1 Others Rat 大鼠 IL18R1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 香橙素(標(biāo)準(zhǔn)品)Aromadendrin(Dihydrokaempferol)質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL3',4',7-三羥基黃酮(標(biāo)準(zhǔn)品)3',4',7-Trihydroxyflavone質(zhì)量規(guī)格:>97%,標(biāo)準(zhǔn)品
病毒型PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)RTE(大鼠氣管上皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2D-半乳糖醛酸鈉鹽D-Galacturonic acid salt質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
HBL-100(人整合SV40基因的上皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0361HPAC(人胰腺腺泡上皮癌)5×106cells/瓶×2 水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S2氨力農(nóng)(標(biāo)準(zhǔn)品)Amrinone質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人肺粘液上皮樣癌細(xì)胞;NCI-H292角叉菜膠;卡拉膠Carrageenan質(zhì)量規(guī)格:BR
人表皮角質(zhì)細(xì)胞-(HEK-a) ( 5×105 )?;悄懰?/span>-3-硫酸酯二鈉鹽Taurocholate-3-sulfate,di salt 質(zhì)量規(guī)格:>90%,BR
大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)FLAG peptideFLAG peptide質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
SHH Protein Mouse 重組小鼠 SHH / Sonic hedgehog 蛋白 (His 標(biāo)簽)茜素黃Rshēng huà shì jì容量:保存:-20℃1克
小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞(MA)(5×105) CaEs-17, 人細(xì)胞株 Human茜速;1,2-二羌基醌 clizcrin;1,2-Dixy7noxy-9,10-cnthrccqnqdionq;C.I. Mordcnt Rqd 11;C.I. PigMqnt Rqd 83;C.I.58000 7-48-0
人APP-PS1(M146L)雙基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株;7WML6.0青安 98+% Cycncmidq 40-04-
14. 細(xì)胞系統(tǒng)末端轉(zhuǎn)移酶shēng huà shì jì容量:500毫克
CL-0035BIU-87(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2CollagenIV 1g Worthington原裝
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:病毒型PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。