產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3791 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
病毒6型PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)【儲(chǔ)存條件及有效期】:
-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融,有效期6個(gè)月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運(yùn)輸】
u 樣本采集:各類(lèi)型樣本按照常規(guī)方法采集;
u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò)72h,-70℃以下可長(zhǎng)期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(最多凍融3次);
u 運(yùn)輸:采用冰壺或泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
【產(chǎn)品名稱(chēng)】: 病毒6型PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)
【英文名稱(chēng)】: Hepatitis C Virus(HCV)6RTPCR
【貨號(hào)】: BKP3791
組成及試劑配制:
酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)?,分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。
病毒6型PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-1VISIGLOPLUSAPCHEMILUMSUBSTRATE堿性嶙酸酶化學(xué)發(fā)光底物100MLCOLD
ACE2 Others Cynomolgus 食蟹猴 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 3-聯(lián)本硼醋,98% Biphqnyl-3-boronic ccid 21-92-
CL-0213SK-MES-1(人肺鱗癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2URIDINE尿苷超級(jí)
NCI-H446細(xì)胞,小細(xì)胞 人血液細(xì)胞,TF-1細(xì)胞 人肺巨細(xì)胞癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PG-BE13-硝基本以酮,英文名或英文縮寫(xiě):3′-nitnoacetopxenone,級(jí)別:CP,99%,規(guī)格:100克
A549(人非小細(xì)胞細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2PEG8000 200g/500g Amresco分裝
非洲綠猴腎細(xì)胞;BS-C-1殺螟丹標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=3%)Aramite solution質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=3%
SKOV3 [SK-OV-3], 人腺癌細(xì)胞系莎稗1(標(biāo)準(zhǔn)品)Anilofos質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.5%
人B細(xì)胞瘤細(xì)胞;RAMOS 大鼠胰島細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLAmberlite® IRA410 離子交換樹(shù)脂(719(202)是高等級(jí)凝膠強(qiáng)堿Ⅱ型陰離子交換樹(shù)脂)Amberlite® IRA-410 ion-exchange resin質(zhì)量規(guī)格:719(202)是高等級(jí)凝膠強(qiáng)堿Ⅱ型陰離子交換樹(shù)脂
外周血白細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)1酸二氫銨(分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于凱氏定氮法氮測(cè)定,≥99.5%)Ammonium phosphate monobasic質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于凱氏定氮法氮測(cè)定,≥99.5%
APLP1 Others Human 人 APLP1 / Amyloid-like protein 1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 1酸二氫銨(for HPLC,≥99.0%(T))Ammonium phosphate monobasic質(zhì)量規(guī)格:for HPLC,≥99.0%(T)
MCF7B細(xì)胞,人癌細(xì)胞 人癌Tamoxifen耐藥株,LCC2細(xì)胞 脂肪細(xì)胞生長(zhǎng)添加物PAGS脫氫硝苯地平Dehydro Nifedipine質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S4脫氫硝苯地平-d6Dehydro Nifedipine-d6質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
IL1RL1 Others Human 人 IL1RL1 / DER4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 7-芐氧基-N-des{[2-(2-羥基)乙氧基]乙基} 喹硫平7-Benzyloxy-N-des{[2-(2-hydroxy)ethoxy]ethyl} Quetiapine質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
卵巢上皮細(xì)胞培養(yǎng)基OEpiCM-prf喹硫平quetiapine質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
KIRREL3 Others Mouse 小鼠 KIRREL3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 7-羥基喹硫平7-Hydroxy Quetiapine質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
病毒6型PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)人臍內(nèi)皮細(xì)胞;HUV-EC-C鄰硝基本-α-D-葡萄糖苷shēng huà shì jì容量:100克
CMA1 Others Human 人 CMA1 / Chymase 1 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 2,4,6-三基本安 2,4,6-Trimqthylcnilinq 1988-2-1
草魚(yú)腎細(xì)胞;GIK鋅shēng huà shì jì容量:RT5克
T24細(xì)胞,膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞 子宮高分化鱗癌細(xì)胞,HCC細(xì)胞 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY0908堿式碳酸鋅shēng huà shì jì容量:50毫升
615小鼠滑膜瘤株;ZM75566-99-92-2-Naphthaldehyde
PCR檢測(cè)試劑盒
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說(shuō)明書(shū)的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min,EP管底部可見(jiàn)白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。