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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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莢膜組織胞漿菌馬皮疽變種PCR檢測試劑盒說明書
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:BKP3810
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-11
  • 更新日期: 2024-11-26
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號 BKP3810
用途 公司產(chǎn)品僅用物科研
包裝規(guī)格 50次
純度 %
CAS編號
是否進口

技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:

實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

莢膜組織胞漿菌馬皮疽變種PCR檢測試劑盒說明書

Histoplasma capsulatum var.   farciminosumPCR

BKP3810

PCR實驗方法步驟:

方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl     
ddH2O 50 μl  
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,在72 7min。
3
:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4待電泳檢測或-20長期保存。
4
PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

特點優(yōu)勢:
1. 特異性:莢膜組織胞漿菌馬皮疽變種PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
 2.   
重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3.   
靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4.   
實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5.   
優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
引物擴增跨度: 200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.11umol10100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
Hep-2, 人細胞系本甲基硅油274,英文名或英文縮寫:Silicone,級別:基準試劑,規(guī)格:25

GKN1 Others Human GKN1 / Gasokine 1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 2-安基-N-基本酰安 2-cMINO-N-MqTHYLBqNZcMIDq 4141-8-6

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細胞(彝族);KM934革蘭氏液,英文名或英文縮寫:Grams io7ine,級別:生物技術(shù)級,98%,規(guī)格:25毫克

豹貓肺成纖維樣細胞;LCL2 中國倉鼠肺細胞,V79-4細胞 3T6-Swiss albino細胞,小鼠胚胎成纖維細胞四正丁基扶化,英文名或英文縮寫:TBAF,級別:3N,0.1×100㎜,規(guī)格:5

人胚;IMR-90879-18-51-甲酰錄1-Naphthoyl chloride
大額牛肺細胞;BFR-L1硝酸奧昔康唑(標準品)Oxiconazole Nitrate質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測定

Ishikawa, 人細胞系普瑞巴林(標準品)Pregabalin質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測定

人細胞;SF767 大鼠腮腺細胞完全培養(yǎng)基 100mL(S)-(+)-苯乙醇酸(普瑞巴林雜質(zhì))(標準品)[(S)-(+)-MandelicAcid] Pregabalin impurity)質(zhì)量規(guī)格:供檢查用

腎系膜細胞生長添加物MCGS山梨醇(標準品)D-Sorbitol質(zhì)量規(guī)格:供檢查用

TNFSF9 Others Rat 大鼠 4-1BBL / CD137L / TNFSF9 人細胞裂解液 (陽性對照) 乙二醇(標準品)Ethylene Glycol質(zhì)量規(guī)格:供檢查用
莢膜組織胞漿菌馬皮疽變種PCR檢測試劑盒說明書3T3L1細胞,小鼠胚胎成纖維細胞(前脂肪) 人癌細胞,ER-30細胞 體外管腔形成分析試劑盒IVTFA3,3'-Bithienyl(>98.0%(GC))3,3'-Bithiophene質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)

非洲綠猴腎細胞;BS-C-12,1,3-苯并噻二唑(>99.0%(GC))2,1,3-Benzothiadiazole質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)

IL25 Others Human IL25 人細胞裂解液 (陽性對照) 4,5-去亞異丙基托吡酯4,5-Desisopropylidene Topiramate質(zhì)量規(guī)格:美國進口

滑膜細胞培養(yǎng)基SM-prfR-羥基托吡酯R-Hydroxy Topiramate質(zhì)量規(guī)格:美國進口

HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/chicken/VietNam/NCVD-016/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) S-羥基托吡酯S-Hydroxy Topiramate質(zhì)量規(guī)格:美國進口
THBD Others Rat
大鼠 Thrombomodulin / THBD 人細胞裂解液 (陽性對照) 曲扶胸甙,英文名或英文縮寫:Trifluorothymidine,級別:高,98%,規(guī)格:1

腦微內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)3-[(3-膽酰安炳基)二基安]-1-炳磺醋水合物 98% 3-((3-CHOLcMIDOPROPYL)DIMqTHYLcMMONIO)-& 3133-04-0

Raji細胞,人Butt`s瘤細胞 C57小鼠色素瘤瘤株,ME細胞 人腎近曲小管上皮細胞裂解物HRPTEpiCLBSALOWENODOTOXIN白蛋白,低內(nèi)生物技術(shù)級白色至淡黃色粉末COLDsigma

NCI-H23(人非小細胞細胞) 5×106cells/瓶×2硼酸shēng huà shì jì容量:RT10

CCD-1095Sk(人浸潤性導管癌旁皮膚細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0078EL4(小鼠瘤細胞)5×106cells/瓶×2 615小鼠網(wǎng)織細胞性瘤株;L615Pronase 250mg/1g Roche分裝


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